实验二 细胞器的观察及临时制片.ppt

实验二 细胞器的观察及临时制片,前次实验报告存在问题小结！,1、图画得偏小或布局不合理；2、未找到典型细胞，形态失真；3、点点拖尾或涂阴影，线条粗细不均；4、结构标注不正确；5、细胞名称未写对。,一、实验目的,1、观察永久制片中各种细胞器的光镜下形态；,2、学习和掌握临时制片的原理和方法。,二、实验内容,1、细胞器永久制片的观察,（1）高尔基复合体,猫脊神经节切片,（1）高尔基复合体,10X,40X,（2）中心体,马蛔虫子宫受精卵细胞切片,10X,40X,（1）原理,2、洋葱内表皮临时制片,TritonX-100，一种非离子去垢剂，能去除细胞内除细胞骨架蛋白以外的所有蛋白质。,考马斯亮兰，一种非特异性的蛋白质染料，能使蛋白染色。, M缓冲液，含有促进微丝肌动蛋白聚合的所需成分。,（2）操作步骤,撕取洋葱鳞茎内表皮,6mM磷酸缓冲液5分钟,1%tritonX-100 37 23分钟,M缓冲液洗3次，5分钟/次,3%戊二醛固定10分钟,6mM磷酸缓冲液洗3次，8分钟/次,滴加0.2%考马斯亮兰染色15分钟,蒸馏水洗23次,装片观察,三、作业：,1、绘制示高尔基复合体和中心体的细胞图；2、绘制微丝的镜下结构。,