第03章离心技术和离心机习题.doc

【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流第03章离心技术和离心机习题首 页习 题习题参考答案习 题 名词解释 选择题 简答题 一、名词解释1离心现象 2重力沉降3沉降速度4扩散现象5解释R·C·F6解释沉降系数7K系数8最大转速9最大离心力10最大容量11调速范围12温度控制范围13工作电压14电源功率二、选择题 【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。1物体在离心力场中表现的沉降运动现象是指（ ）A向心现象B离心现象C离心力D向心技术E失重现象2应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为（ ）A向心现象B离心现象C离心技术D向心技术E失重现象3实现离心技术的仪器是（ ）A电泳仪 B离心机C色谱仪D生化分析仪E显微镜4当物体所受外力小于圆周运动所需要的向心力时，物体将作（ ）A向心运动B匀速圆周运动C离心运动D变速圆周运动E保持不动5利用不同的粒子在离心场中沉降的差别，在同一离心条件下，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内大小、形状不同的粒子分布沉淀的离心方法是（ ）A差速离心法B速率区带离心法C等密度区带离心法D高速离心法E超速离心法6在强大离心力作用下,单位时间内物质运动的距离称为（ ）A沉降运动B重力沉降C沉降速度D离心技术E向心力作用7在介质中，由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象，主要是由于密度差引起的，这种现象称为（ ）A数量极移动B扩散现象C细胞悬浮D分离沉降E重力场作用8相对离心力是（ ）A在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数B在离心力场中，作用于颗粒的地球重力相当于离心力的倍数C在离心力场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的乘积D在离心力场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的和E在离心力场中，作用于颗粒的离心力与地球重力的差9单位离心力场下的沉降速度是指（ ）A向心速度B离心速度C沉降系数D上浮速度E下沉速度10沉降系数与样品颗粒的质量或密度的关系，下列叙述中正确的是（ ）A质量和密度越大,沉降系数越大B质量越小,沉降系数越大C质量或密度与沉降系数无关D密度越大,沉降系数越小E质量和密度越小,沉降系数越大11利用样品中各组份的沉降系数不同而进行分离的方法称为（ ）A差速离心法B等密度区带离心法C超速离心法D高速离心法E沉降平衡离心法12密度梯度离心法又称为 （ ）A分离离心法B组份分离法C区带离心法D低速离心法E高速离心法13差速离心法和速率区带离心法进行分离时，主要的根据是不同样品组份的（ ）A密度B重力C沉降系数D体积E形状14在梯度液中不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的，这种方法是（ ）A差速离心法B密度梯度离心法C速率区带离心法D等密度区带离心法E分析离心法15根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是（ ）A差速离心法B密度梯度分析离心法C速率区带离心法D等密度区带离心法E分析离心法16Percoll分离液从外周血中分离单个核细胞的分离方法属于（ ）A差速离心法B速率区带离心法C等密度区带离心法D分析离心法E分析超速离心法17速率区带法要求样品粒子的密度与梯度液柱中任一点密度的关系必须是（ ）A大于B大于等于C等于D小于等于E小于18下列转头标识代表固定角转头的是（ ）AFABVCSWDCFEZ19等密度区带离心法对样品进行分离和纯化主要是利用不同的（ ）A质量B密度C沉降系数D体积E分子大小20等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是（ ）A液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度，液柱底部的密度明显大于样品组份的密度B液柱顶部的密度明显大于样品组份的密度，液柱底部的密度明显大于样品组份的密度C液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度，液柱底部的密度明显小于样品组份的密度D液柱顶部的密度明显大于样品组份的密度，液柱底部的密度明显小于样品组份的密度E液柱顶部的密度明显等于样品组份的密度，液柱底部的密度明显等于样品组份的密度21低速离心机可达到的最大转速是（ ）A1000B4000C6000D10000E2000022高速离心机可达到的最大转速是（ ）A5000B10000C15000D20000E2500023超速离心机可达到的最大转速是（ ） A10000B30000C50000D80000E10000024高速离心机由于运转速度高，一般都带有（ ）A自动控制装置B平衡控制装置C低温控制装置D室温控制装置E速度可调装置25下列属于低速离心机部件的是（ ）A真空系统B冷凝器C离心转盘D水冷却系统E透光池26国际上对离心机有三种分类法，分别是按用途分、按转速分和（ ）A按复杂程度分B按结构分C按时间分D按功能分E按体积分27离心机按转速分类，分为高速离心机、低速离心机和（ ）A分析离心机B细胞涂片离心机C超速离心机D冷冻离心机E台式离心机28表示从转轴中心至试管最外缘或试管底的距离的转头参数是（ ）ARminBRmaxCRPMmaxDRCFmaxERCFmin29表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是（ ）ARPMmaxBRmaxCRminDRCFmaxERCFmin30表示转头的最高安全转速的转头参数是（ ）ARPMmaxBRCFminCRminDRmaxERCFmax31为了研究生物大分子的沉降特性和结构，使用了特殊的转子和检测手段，以便连续监测物质在一个离心力场中的沉降过程，这种离心机称为（ ）A制备离心机B制备超速离心机C制备高速离心机D分析超速离心机E普通离心机32测定生物大分子的相对分子重量应用最广泛的方法是（ ）A差速离心法B沉降速率法C沉降平衡法D速率区带离心法E沉降平衡法33分析生物大分子中的构象变化采用的方法是 （ ）A差速离心法B沉降速率法C沉降平衡法D速率区带离心法E分析超速离心法34低速离心机的相对离心力可达（ ）A2500g B7500gC15000gD20000gE30000g35高速离心机的相对离心力可达（ ）A49000g B59000gC69000gD79000gE89000g36超速离心机的相对离心力可达（ ）A410000g B510000gC610000gD710000gE810000g37不同的离心方法选择的离心时间不同，对于差速离心法来说是（ ）A某种颗粒完全上浮的时间B某种颗粒处于离心管中央的时间C某种颗粒完全沉降到离心管底部的时间D全部组份在离心管中形成各自独立存在的区带，但没有沉降在离心管底部E全部组份沉降在离心管的底部38不同的离心方法选择的离心时间不同，对于等密度梯度离心而言是（ ）A某种颗粒完全上浮的时间B某种颗粒完全下沉的时间C全部组份颗粒完全到达各自的等密度点的平衡时间D全部组份沉降在离心管的底部E某种颗粒处于离心管的中央的时间【X型题】 每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。1常用的离心方法有（ ）A差速离心法B速率区带离心法C等密度区带离心法D经典沉降平衡离心法E沉降速率离心法2经典式沉降平衡离心方法主要用于（ ）A生物大分子量的测定B纯度估计C构象变化D相对离心力测定E以上都是3按转速分，离心机可分成（ ）A低速离心机B分析离心机C高速离心机D超速离心机E冷冻离心机4高速离心机装置包括（ ）A转动装置B速度控制系统C真空系统D温度控制系统E安全保护装置5高速离心机速度控制系统包括（ ）A标准电压B速度调节器C真空系统D速度传感器E电流调节器6高速离心机制冷压缩机组成包括（ ）A压缩机B冷凝器C毛细管D蒸发器E电动机7低速离心机的主要构成包括（ ）A电动机B离心转盘（转头）C调速装置D离心套管E真空装置8离心机的主要技术参数包括（ ）A最大转速B最大离心力C离心转头参数D最大容量E差速离心9为了保证离心机的正常使用，必须做到下述中的（ ）A平衡离心管和其内容物，要对称放置B装载溶液时，使用开口离心机不能装得过多，防止离心甩出C离心过程中应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常声音应立即停机检查，及时排出故障。D规定时间内进行E以上答案都正确10离心机转头损坏的原因包括（ ）A金属疲劳B超速C过应力D温度失控E使用中转头不平衡11离心机常见的故障有（ ）A电机不转B温度不到C达不到额定转速D转头损坏E机体振动剧烈、响声异常12离心机机体震动剧烈，响声异常的原因有（ ）A离心管重量不平衡，放置不对称B转头孔内有异物，负荷不平衡或使用了不合格的试管套C电机转子不在磁场中心会产生噪音D转轴上端固定螺帽松动，转轴摩擦或弯曲E转子本身损伤13专用离心机包括（ ）A细胞涂片离心机B普通低速离心机C免疫血液离心机D尿液沉渣分离离心机E微量毛细管离心机14离心管由多种材料制成，包括（ ）A塑料B不锈钢C聚凝胶D聚丙烯E乙烯15离心机转头的类型包括（ ）A固定角转头B垂直转头C甩平式转头D区带转头E平速转头16对于垂直转头，下面说法中正确的是（ ）A是一种固定角转头B密封要求严格C离心管垂直放置D主要用于样品在短时间作密度梯度离心E分离的粒子位移距离等于离心管直径17对于连续流动转头，下列说法中正确的是（ ）A用于高速分离较小的颗粒物质B利用离心淘析技术C被分离组份在无菌和低温的条件下能保持活性D大容量转头转速低E回收率高18分析型超速离心机的作用包括（ ）A能确定生物大分子是否存在及大致含量B计算生物大分子的沉降系数C测定生物大分子的分子量D检测生物大分子的构象变化E细胞悬液分离19高速（冷冻）离心机安全保护装置包括（ ）A主电源过电流保护装置B驱动回路超速保护C冷冻机超负荷保护D操作安全保护E全封闭保护系统20低速离心机用途包括（ ）A血清分离B血浆分离C脑脊液有形成份分离D胸腹水有形成份分离E生物大分子分离21制备型超速离心机主要用途包括（ ）A细胞器和病毒分离纯化B生物大分子分离纯化C能使亚细胞器分级分离D可用于测定蛋白及核酸的分子量E分离细胞碎片22高速离心机主要用途包括（ ）A分子生物学中的DNA、RNA的分离B生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液分离、浓缩、提纯样品C单个分子的分离D小细胞器分离E胸腹水有形成份分离23免疫血液离心机主要用途包括（ ）A淋巴细胞分离、洗涤B细胞染色体制作的细胞分离C血小板的分离D血溶比试验E洗涤红细胞及血浆的分离24差速离心法的优点有（ ）A样品处理量大B分离时间短C重复性高D操作复杂E离心分辨率较差25密度梯度离心法的优点有（ ）A具有良好的分辨率，分离效果好B颗粒不会积压变形，能保持颗粒活性，并防止已形成的区带由于对流而引起混合C样品浓度不能太高D达到平衡时间长E适应范围广，即能分离具有沉降系数差的颗粒，又能分离有一定浮力密度的颗粒26细胞涂片离心机主要用于临床和基础实验室中标本的脱落细胞的检查，包括（ ）A分泌物B脑脊液C胸腹水D可疑肿物E组织切片27差速离心法的缺点有（ ）A沉降系数在同一个数量级内各种粒子不易分开B壁效应严重C离心分辨有限D分离效果差E大样品的初步分离提纯28分析型超速离心机的结构包括（ ）A椭圆形的转子B真空系统C光学系统D沉降系统E高速驱动装置29离心机按用途可分成的类型包括（ ）A制备型离心机B制备分析两用离心机C分析型离心机D高速离心机E超速离心机30离心机按结构可分成的类型包括（ ）A台式离心机B多管微量式离心机C细胞涂片式离心机D血液洗涤式离心机E高速冷冻式离心机31以下属于密度梯度离心法的有（ ）A差速离心法B沉降速率法C速率区带离心法D等密度区带离心法E分析离心法32离心机日常使用的维护包括（ ）A每隔三个月对主机校正一次水平度B每使用5亿转处理真空油泵一次C每使用1500小时，应清洗驱动部位轴承并加上高速润滑油D转轴与转头结合部应经常涂酯防锈E平时不用时，应每月低速开机12次，每次0.5小时，保证各部位的正常运转33离心分离的效果与下述因素有关的是（ ）A离心机种类B离心方法C离心介质及密度梯度D离心机转速和离心时间的确定E离心介质的PH和温度等条件34离心机的转头参数有（ ）ARminBRmaxCRPMmaxDRCFmaxERCFmin35下列转头标识代表转头类型的有（ ）AFABVCSWDTiEZ36微粒在液体介质中的沉降将受其他因素的影响，这些因素包括（ ）A介质的浮力B介质的阻力C扩散现象D压力E空气的阻力37离心机转头的常用标记由三部分构成，包括（ ）A表示离心转头的类型B表示转头的最高转速C表示转头的制成材料D最大离心力E温度控制范围38下列解释离心机转头标记SW65Ti，其中正确的是（ ）ASW表示水平转头BSW65表示垂直转头C65表示转头长度为65mmD65表示最高转速为65000r/minETi表示转头制成材料是钛金属39离心机电机不转，应检查的内容有（ ）A指示灯不亮检查保险丝B指示灯不亮检查电源线，插头、插座是否接触好C指示灯亮电机不启动，检查波段开关、瓷盘变阻器损坏或其连接线是否断脱D指示灯亮而电机不启动检查磁场线圈的连接线是否层断脱或线圈内部短路E检查真空泵的油压指示值三、简答题1什么是离心技术，离心技术主要用于哪些方面？2离心机的工作原理是什么？3怎样克服微粒在沉降中所发生的扩散现象？4什么是离心力及离心现象？5离心力的数学表达式是什么？6什么叫相对离心力？7什么叫沉降速度？8什么叫离心沉降？9什么叫最小离心力场及最大离心力场？10常用的离心方法分几类？11什么是差速离心法？12差速离心法的优、缺点是什么？13什么是密度区带离心法？14什么是速率区带离心法？15什么是等密度区带离心法？16分析型超速离心机的工作原理是什么？17分析型超速离心机的应用范围？18国际上对离心机的分类有几种方法，分成哪些类型？19低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什么？20超速离心机按用途可分为几型？21制备型及分析型超速离心机的用途有哪些？22免疫血液离心机都用于哪些方面？23细胞涂片离心机的工作程序是怎样进行的？24低速离心机的大致结构有哪些？25高速、超速（冷冻）离心机的结构包括哪几部分？26离心机转头一般可分为几类、各自用途是什么？27简述区带转头的结构与用途？28对使用离心方法的选择要求是什么？29离心机分离样本时的离心时间、温度和pH的确定，其意义是什么？30在使用离心机时应注意哪些问题？31简述离心机转头的使用消毒及保养方式。32怎样对离心机进行保养？33离心机电机不转应怎样进行检查？34离心机机体震动、响声异常，常见的原因有哪些？35简述使用Ficoll梯度液直接分离外周血单个核细胞的原理。36简述快速氯化铯密度梯度离心法提取分离大质粒DNA的原理。37离心分离技术在实际工作中应用的范围大致有哪些？38简述国内外新型离心机的类型及应用特点。39离心方法目前发展的现状是什么?习 题 参 考 答 案一、名词解释1离心现象：物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。2重力沉降：液体中的微粒受重力的作用，较重的微粒下沉与液体分开，这个现象称为重力沉降。3沉降速度：在强大离心力的作用下，单位时间内物质的运动的距离。4扩散现象：在介质中，扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的，这种现象称为扩散现象。5解释R·C·F：相对离心力，是指在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”6解释沉降系数：是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度，其单位为秒。7K系数：是用来描述在一个转子中，将粒子沉降下来的效率。也就是溶液恢复成澄清程度的一个指标。8最大转速：指离心转头可达到最大转速，单位是rpm。9最大离心力： 指离心机可产生的最大相对离心力场R·C·F，单位是g。10最大容量： 指离心机一次可分离样品的最大体积，通常表示为m×n。11调速范围： 也叫转速设置范围，指离心机转头转速可调整的范围。12温度控制范围：指离心机工作时可控制的样品温度范围。13工作电压：一般是指离心机电机工作所需的电压。14电源功率：通常是指离心机电机的额定功率。二、选择题【A型题】1B 2C 3B 4C 5A 6C 7B 8A 9C 10A 11A 12C 13C14C 15D 16B 17A 18A 19B 20A 21D 22E 23D 24C 25C 26B27C 28B 29C 30A 31D 32B 33E 34C 35E 36B 37C 38C【X型题】1ABCE 2ABC 3ACD 4ABCDE 5ABDE 6ABCD 7ABCD 8ABD 9ABC 10ABCDE11ADE 12ABCDE 13ACDE 14ABD 15ABCD 16ABCDE 17ABCE 18ABCD 19ABCD 20ABCD 21ABCD 22AB 23ABCE 24ABC 25ABE 26ABC 27ABCD 28ABC 29ABC 30ABCDE31CD 32ABCDE 33ABCDE 34ABCDE 35ABCE 36ABC 37ABC 38ADE 39ABCDE三、简答题1什么是离心技术，离心技术主要用于哪些方面？答：应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备，在细胞生物学和分子生物学的每一进程中，总可见到离心技术的运用。2离心机的工作原理是什么？答：（1）离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。（2）悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降，从而使溶液得以分离。（3）颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。（4）微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。（5）离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度，把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。3怎样克服微粒在沉降中所发生的扩散现象？答：扩散现象是不利于样品的分离的，离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度，把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。4什么是离心力及离心现象？答：当物体所受外力小于运动所需要的向心力时，物体将向远离圆心的方向运动。物体远离圆心运动的现象称为离心现象。也叫离心运动。5离心力的数学表达公式是什么？答：公式式中是旋转角速度，N是每分钟转头旋转次数，r为离心半径，m为质量。6什么叫相对离心力？答：是指在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”。7什么叫沉降速度？答：指在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离。8什么叫离心沉降？答：（1）在离心机中，离心管放于离心转头里，当离心机开动时，离心管绕离心转头的轴旋转，作圆周运动，在离心管内的样品颗粒将同样运动。（2）对于离心管而言，样品颗粒由顶位移到了A位，也就是由离心管顶部移到了底部，这与重力场中的由高处落到低处相似。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降。9什么叫最小离心力场及最大离心力场？答：通常称离心管顶部到旋转中心的距离为最小离心半径Rmin，该处承受的离心力场为最小离心力场。通常称离心管底部到旋转中心的距离为最大离心半径Rmax,该处承受的离心力场称为最大离心力场。10常用的离心方法分几类？答：常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类。11什么是差速离心法？答：是利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分步沉淀的离心方法。所以这个方法又称为分步离心法。12差速离心法的优、缺点是什么？答：差速离心法的优点：（1）操作简单；（2）分离时间短、重复性高；（3）样品处理量大。缺点：（1）分辨率有限、分离效果差；（2）壁效应严重；（3）颗粒被挤压，离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。13什么是密度区带离心法？答：又称为区带离心法，是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀或沉降平衡，在一定离心力下把颗粒分配到梯度液中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。14什么是速率区带离心法？答：速率区带离心方法是根据分离的粒子在离心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。15什么是等密度区带离心法？答：当不同颗粒存在浮力密度差时，在离心力场下，颗粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上（即等密度点）形成区带，称为等密度区带离心法。16分析型超速离心机的工作原理是什么？答：其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗，离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质，可以通过对紫外光的吸收（如对蛋白质和DNA）或折射率的不同对沉降物进行监测。后一方法的原理是：当光线通过一个具有不同密度区的透明液，在这些区带的界面上产生光的折射。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜，结果在检测系统的照相底板上产出一个“峰”，由于沉降不断进行，界面向前推进，故“峰”也在移动，从峰移动的速度可以得到物质沉降速度的指标。17分析型超速离心机的应用范围？答：（1）测定生物大分子的相对分子重量；（2）生物大分子的纯度估计；（3）分析生物大分子中的构象变化18国际上对离心机的分类有几种方法，分成哪些类型？答：通常国际上对离心机的分类有三种方法：按用途分、按转速分、按结构分。按用途可分为制备型、分析型和制备分析两用型；按转速分类可分为低速、高速、超速等离心机；按结构可分为台式、多管微量式、细胞涂片式、血液洗涤式、高速冷冻式、大容量低速冷冻式、台式低速自动平衡离心机等。19低速离心机、高速离心机、超速离心机的应用范围是什么？答：（1）低速离心机主要用作血浆、血清的分离及脑脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分离；（2）高速离心机主要用于临床实验室分子生物学中的DNA、RNA的分离和基础实验室对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等；（3）超速离心机主要用于亚细胞器的分级分离，还可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等。20超速离心机按用途可分为几种类型？答：超速离心机按用途分为制备型、分析型及分析制备两用型三种。21制备型及分析型超速离心机的用途有哪些？答：制备型超速离心机主要用于生物大分子、细胞器和病毒等的分离纯化，能使亚细胞器分级分离，并可用于测定蛋白质及核酸的分子量；分析型超速离心机可以通过光学系统对测试样品的沉降过程及纯度进行观察。22免疫血液离心机都用于哪些方面？答：是为临床输血所设计的一种带有标准化操作程序的专用离心机。用于白细胞抗原检测的淋巴细胞分离、洗涤及细胞染色体制作的细胞分离；用于血小板的分离、凝血酶的处理离心；用于抗人球蛋白试验；用于洗涤红细胞及血浆的分离等。23细胞涂片离心机的工作程序是怎样进行的？答：当样品经梯度离心分离出杂质，将细胞使用离心力从液体悬浮物中分离出来，甩到载玻片上。染液由自动喷雾器的转盘喷到每一张涂片上，用离心的方法除去过剩的染液，细胞、细菌分布均匀，无重叠，染色效果好。24低速离心机的大致结构有哪些？答：结构较为简单，由电动机、离心转盘（转头）、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。25高速、超速（冷冻）离心机的结构包括哪几部分？答：高速（冷冻）离心机的结构由转动装置、速度控制系统、温度控制系统、真空系统、离心室、离心转头及安全保护装置等。超速(冷冻)离心机主要由驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头四部分组成。26离心机转头一般可分为几类、各自用途是什么？答：一般可分为五大类。（1）固定角转头：用于分离沉降速度有明显差异的颗粒样品。（2）甩平式转头：又分为敞开式和封闭式两种。敞开式主要用于样品的初分离。封闭式主要用于线粒体、细胞核等的分离和密度梯度离心。（3）连续流动转头：用于悬浮介质中高速分离较小的颗粒物质。（4）区带转头：用于大容量的密度梯度离心。（5）垂直转头：用于样品在短时间作密度梯度离心。27简述区带转头的结构与用途？答：该转头由四块叶片的转头体和密封系统组成为四个扇形小室，叶片上有径向导管，梯度液通过密封管道泵入转子内，然后通过密封组件中心输液管加入样品。主要用于大容量的密度梯度离心。28对使用离心方法的选择要求是什么？答：差速离心法的选择：若样品中存在两种以上质量和密度不同的样品颗粒，可采用差速离心法。密度梯度离心法的选择：对于有密度梯度差异的样品介质，可采用密度梯度离心法，使沉降系数比较接近的物质得以分离。等密度梯度离心法的选择：若不同样品颗粒的密度范围在离心介质的密度梯度范围内，离心时密度不同的物质颗粒因浮力差异或向下沉降，或向上漂浮，一直移到它们各自密度恰好对应的位置（等密度点），形成区带。可采用等密度梯度离心。29离心机分离样本时的离心时间、温度和pH的确定，其意义是什么？答：离心时间的确定依据离心方法的不同有所差别。对于差速离心来说，是指某种颗粒完全沉降到离心管底的时间；对等密度梯度离心而言，是指颗粒完全到达等密度点的平衡时间；密度梯度离心所需的离心时间则是指形成界限分明的区带的时间。 温度和pH值的确定是为了防止欲分离物质的凝集、变性和失活，除了在离心介质的选择方面加以注意外，还必须控制好温度及介质溶液的pH值等离心条件。30在使用离心机时应注意哪些问题？答：（1）使用各种离心机时，必须事先平衡离心管和其内容物，要对称放置，转头中绝对不能装载单数的管子，以便使负载均匀地分布在转头的周围：（2）装载溶液时，使用开口离心机时不能装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。制备型超速离心机的离心管，则要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管： （3）离心过程中应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。未找出原因前不得继续运转。31简述离心机转头的使用、消毒及保养方式。答：转头是离心机中须重点保护的部件，每次使用前要严格检查孔内是否有异物和污垢，以保持平衡；每次使用后，必须仔细检查，并用温水（500C600C）及中性洗涤剂浸泡清洗或定期用消毒液消毒（每周消毒一次），最后用蒸馏水冲洗，软布擦干后用电吹风吹干、上蜡、干燥保存。每一转头都应有使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用时限，则须按规定降速使用。 32怎样对离心机进行保养？答：在日常使用离心机的过程中，每隔三个月应对主机校正一次水平度，每使用5亿转处理真空泵油一次，每使用1500小时左右，应清洗驱动部位轴承并加上高速润滑油脂，转轴与转头接合部应经常涂酯防锈，长期不用时应涂防锈油加油纸包扎，平时不用时，应每月低速开机12次，每次0.5小时，保证各部位的正常运转。33离心机电机不转时应怎样进行检查？答：（1）主电源指示灯不亮，检查保险丝是否熔断，电源线、插头、插座是否接触良好。 （2）主电源指示灯亮而电机不能启动。检查波段开关，瓷盘变阻器损坏或其连接线是否断脱。检查磁场线圈的连接线断脱或线圈内部短路检查真空泵表及油压指示值。34离心机机体震动、响声异常，常见的原因有哪些？答：（1）离心管重量不平衡，放置不对称；（2）转头孔内有异物，负荷不平衡或使用了不合格的试管套；（3）转轴上端固定螺帽松动，转轴摩擦或弯曲；（4）电机转子不在磁场中心会产生噪音；（5）机座上减震弹簧的固定螺丝松动或其中一根弹簧断裂；（6）转子本身损伤。35简述使用Ficoll梯度液直接分离外周血单个核细胞的原理。答：红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可以从外周血中分离到单个核细胞。36简述快速氯化铯密度梯度离心法提取分离大质粒DNA的原理。答：用氯化铯密度梯度离心分离核酸时，在高浓度氯化铯溶液中和溴化乙锭（EB）过量的情况下，EB-DNA络合物的浮力密度发生改变，改变的大小与EB结合量成反比。因此，用氯化铯密度梯度超速离心法，可分离双链RNA和单链RNA。也可分离共价闭合环状DNA与线形或带缺口的环状DNA。同时，EB-DNA络合物在紫外光下能产生荧光，可见到离心后形成的区带，便于收集DNA，所得的EB-DNA络合物用异戊醇抽提去EB，即可回收所需的DNA。此法得到的DNA纯度很高。37离心分离技术在实际工作中应用的范围大致有哪些？答：离心分离技术已成为常规的分离、纯化、鉴别各种生物大分子的不可缺少的方法。高（超）速离心机已成为生物、医学、化学、农业实验室必不可少的实验设备。在生物化学领域，超速离心技术广泛应用于蛋白质、酶、激素、核酸和病毒的研究。38简述国内外新型离心机的类型及应用特点。答：我国研制的SS型三足式离心机是一种过滤式离心机，结构简单、操作方便、分离时颗粒不易破坏，已广泛应用于各行业和科研实验室。国外研制的P2离心机将拥有更强大的转子，旋转速度更快，浓缩能力更强的新式离心机。俄罗斯利萨马拉医科大学的专家，已研制了使下肢骨折患者更快地康复的新型医用离心机并应用于临床治疗。39离心方法目前发展的现状是什么?答：目前，离心方法已逐渐走向规范化、标准化、专业化。各种专用离心机不断出现，对所分离样品由计算机自动控制程序设定了一定的转速、相对离心力及离心时间等。.精品文档. 第三章 离心技术与离心机