血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定.doc

血血清清 丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶I IF FC CC C 推推荐荐方方法法 测测定定1 1. . 实实验验原原理理国际临床化学学会 (IFCC)推荐的紫外连续监测法。ALTL-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O加入磷酸吡哆醛（ P-5-P）是为了稳定 ALT 活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)12 2. . 标标本本：2.1 病人准备： 12 小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失： 28保存：1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围 4800U/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。不含磷酸吡哆醛批内精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)天间精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)样品 122.80.703.08样品 122.21.386.22样品 242.60.681.60样品 244.81.172.62样品 399.30.920.92样品 31011.021.00含磷酸吡哆醛批内精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)批间精密度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)样品 133.30.992.96样品 133.81.253.71样品 272.11.361.88样品 272.02.042.83样品 31331.761.32样品 31282.772.1614.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 78 个样品进行 ALT 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 80 个样品进行 ALT 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.994。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为4U/L。14.5 病人结果可报告范围 4U/L-800U/L 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法对 ALT 活力检测的最大A/min 在 340、334nm 为 0.16,在 365nm 为 0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法对 ALT 活力检测的最大A/min 在340、334nm 为 0.16,在 365 nm 为 0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度 1704mol/L，胆红素浓度 684mol/L，血红蛋白浓度 4.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L 时没有观察到干扰。1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1.Thomas L. Alanine aminotransferase(ALT), Aspartate aminotransferase(AST). In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.55-65.2.Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.617-721.3.Bergmeyer HU, Horder M, Rej R. International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) Scientific Committee, Analytical section: approved recommendation (1985) on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 3. IFCC method for alanine aminotransferase(L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase, EC 2.6.1.2). J Clin Chem Clin Biochem 1986; 24:481-95.4. Lorentz K, Rohle G, Siekmann L. Einfuhrung der neuen Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentrationen bei 37. DG Klinische Chemie Mitteilungen 1995;26:190-2.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。