血清总蛋白液体(TP)双缩脲法测定.doc

血血清清 总总蛋蛋白白液液体体 ( (T TP P) )双双缩缩脲脲法法测测定定1 1. . 实实验验原原理理双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。OH蛋白质 + Cu2+ -紫红色复合物2 2. . 标标本本采采集集2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清或血浆。3 3. . 标标本本存存放放 2025保存可稳定 6 天； 48保存可稳定 4 周； -20保存至少可稳定1 年。4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。6 6. . 实实验验材材料料 : :6.1 奥林巴斯总蛋白测定试剂盒 试剂 1试剂 26.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品 总蛋白 校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L 报告。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 g/L成人：6688儿童 /青少年：男女130 天4262416316 个月446647676 个月 1 岁56795570118 岁57805780（注：各实验室应有自己的参考范围。 ）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义： 总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围： 0.5150g/L14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法， AU2700 批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。批内精密度n=20x(g/L)s(g/L)CV(%)天间精密度n=20x(g/L)s(g/L)CV(%)样品 152.70.50.91样品 152.40.61.06样品 270.50.71.01样品 270.71.11.53样品 31040.80.80样品 31041.41.3214.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 68 个样品进行 TP 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x-0.7g/L；r=0.997。14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.5g/L。14.5 病人结果可报告范围 0150g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理： 本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以 2。17.2 干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度 684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度 11.3mmol/L 时没有观察到干扰1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献 1. Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.644-7.2. Johnson Am, Rohlfs EM, Silverman LM. Proteins. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999.p.477-540.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。