马铃薯抗逆基因的克隆与序列分析(小2号黑体).doc

马铃薯抗逆基因的克隆与序列分析(小 2 号黑体)张媛媛1，李 林2，王小娟1* （小（小 4 号，仿宋体）号，仿宋体）（1.东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030；2.黑龙江省农业科学院*分院，黑龙江 * 161606） （6 6 号，黑体）号，黑体）摘 要（小 5 号，黑体）： ：试验以马铃薯克新 19 号为材料，提取植株叶片总 DNA，利用同源序列法，根据Genbank 中登陆的番茄的 Fe-SODmRNA 全基因序列，设计一对引物（200300 字）。（小 5 号，楷体）关键词（小 5 号，黑体）： ：马铃薯；Fe-SOD；克隆；序列分析（小 5 号，楷体）Cloning and Sequence Analysis of Fe-SOD from Potato（ （4 号号 Arial） ）ZHANG Yuanyuan1, LI Lin1, WANG Xiaojuan2*（小 5 号，Arial）（1. Collage of Agriculture, Northeast Agricultural University, Harbin, Heilongjiang 150030, China; 2. Potato Research Institute，Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences, Keshan, Heilongjiang 161606, China） （6 号号 Arial） ）Abstract（小 5 号，加粗，Arial）：In this experiment, the total DNA was extracted from Kexin No.19, and a pair of primer was designed according to the conserved regions of the Fe-SOD mRNA from（小 5 号，Arial）Key Words（小 5 号，加粗，Arial）：potato; Fe-SOD; clone; sequence analysis （小 5 号，Arial）超氧化物歧化酶（SOD）是植物体内清除活性氧的关键抗氧化酶，也是一种十分典型的诱导酶。 在逆境条件下，植物组织中自由基产生和清除原本的动态平衡遭到破坏，致使活性氧大量积累形成 高氧环境，诱导 SOD 活性水平提高。根据结合金属离子的不同，超氧化物歧化酶可以分为 Cu/Zn- SOD、Mn-SOD、Fe-SOD 三种类型。其反应机理是与酶相连的金属交替的氧化或还原，催化快速 歧化反应，可迅速使有毒害的自由基（O2·）转化为过氧化氢和分子氧1。(5 号字，宋体)1材料与方法（小（小 4 号，仿宋）号，仿宋）1.1试验材料（5 号，黑体）1.1.1植物材料（ （5 号。楷体）号。楷体）马铃薯品种克新 19 号(5 号字，宋体)2结果与分析（小（小 4 号，仿宋）号，仿宋）2.1马铃薯叶片 DNA 的提取（5 号，黑体）利用 SDS 法提取马铃薯基因组 DNA，电泳检测表明，基因组 DNA 提取质量很高，没有 RNA 和蛋白质的污染，满足 PCR 分析要求。(5 号字，宋体)图 1 马铃薯叶片总 DNA 提取的电泳图(小 5 号，黑体)Figure 1 The electrophoresis pattern of total DNA extracted from potato leaves（小（小 5 号，号，Times New Roman）收稿日期收稿日期（6 6 号，黑体）号，黑体）：2010-01-06（6 号，宋体） 基金项目基金项目：农业部公益性行业专项（nyhyzx07-006-8） 。 作者简介作者简介：张媛媛（1986-）女，硕士研究生，从事马铃薯遗传育种研究。 * *通信作者通信作者：王小娟，研究员，博士，主要从事马铃薯遗传育种研究，E-mail: zhanglijuan163.com。2.2氨基酸序列的同源性比较（5 号，黑体）表表 1 1 不同盐碱浓度对各品种株高的影响不同盐碱浓度对各品种株高的影响（小（小 5 5 号，黑体）号，黑体）Table 1 Effects of various levels of saline-sodic treatment on the height of cultivars（小（小 5 号，号，Times New Roman）品 种Variety根 长（cm）Root length茎 粗（mm）Stem diameter株 高（cm）Plant height东农 303Dongnong30312.20*0.10021.9克新 1 号Kexin 17.70*0.09016.4克新 4 号Kexin 416.45*0.10123.7晋薯 2 号Jinshu 29.90*0.09318.7会-2（CK）Hui 28.00*0.08215.3注：F0.05=2.40； F0.01= 3.45；*表示 0.05 显著水平，*表示 0.01 显著水平，下同。Note：F0.05=2.40；F0.01=3.45; * stands for 0.05 significant level, *stands for 0.01 significant level. (三线表，三线表，6 号字，宋体，英文号字，宋体，英文 Times New Roman)3讨 论（小（小 4 号，仿宋）号，仿宋）Fe-SOD 一直以来被认为是一种比较原始的 SOD 类型，分子量在 42000Da 左右，呈黄褐色， 据推测该酶一般位于植物的叶绿体中2-6。大多数原核生物的 Fe-SOD 是同源二聚体，而植物等真核 生物的 Fe-SOD 则是同源四聚体，并且由两个亚基组成，每个亚基只含有一个金属离子，包含两个 结构域。(5 号字，宋体) 参参 考考 文文 献献 （小（小 5 号，黑体）号，黑体）1 门福义, 刘梦云. 马铃薯栽培生理M. 北京: 中国农业出版社, 1995: 65-80.2 屈冬玉, 谢开云. 加速马铃薯脱毒种薯三代繁育体系建设 促进产业全面升级和农民脱贫致富M/陈伊里, 屈冬玉. 马铃薯产业与粮食安 全. 哈尔滨: 哈尔滨工程大学出版社, 2009: 1-6.3 庞万福, 金黎平, 卞春松, 等. 马铃薯中薯 3 号品种密度试验J. 中国马铃薯, 2009, 23(4): 200-202.4 Lole K S, Bollinger R C, Paranjape R S, et al. Full-length human immunodeficiency virus type 1 genomes from subtype C-infected seroconverters in India, with evidence of intersubtype recombinationJ. Journal of Virology, 1999, 73: 152-160.5 苏小军. 马铃薯生料糖化发酵转化乙醇的研究D. 长沙: 湖南农业大学, 2009.6 西安电子科技大学. 光折变自适应光外差探测方法: 中国, 0112877.2P. 2002-03-06.（6 号，宋体，英文号，宋体，英文 Times New Roman，标点符号均为英文状态标点加一空格。，标点符号均为英文状态标点加一空格。 ）