实验 紫外-可见分光光度计的性能检查.doc

紫外紫外-可见分光光度计的性能检查可见分光光度计的性能检查一、一、实验目的实验目的 1. 掌握紫外-可见分光光度计性能检查方法。 2. 学会 TU-1901 型双光束紫外-可见分光光度计的使用方法。二、二、实验原理实验原理 分光光度计性能的好坏，直接影响到测定结果准确程度。因此，要对仪器 进行性能检查，以保证测定结果的准确性。三、三、仪器与试剂仪器与试剂 TU-1901 型双光束紫外-可见分光光度计；石英比色皿（一对） ；擦镜纸。 0.005mol/L H2SO4溶液；6.000105g/ml K2Cr2O7的 0.005mol/L H2SO4溶液；1.20%（g/ml）KCl 的水溶液；5.00%(g/ml )NaNO2的水溶液；蒸馏水。四、四、实验内容及操作步骤实验内容及操作步骤1. 波长精度与重现性检查 用仪器中氘灯的 486.02nm（F 线）与 656.10nm（C 线）谱线进行检查。 方法是用仪器的能量扫描功能，扫描波长范围为 200760nm，得到氘灯 的能量图谱。重复测定至少三次，用峰值检出得氘灯的 F 线与 C 线的实 测波长值。并与理论值比较。波长精度 = 实测值 理论值 重现性 = 测定最大值 最小值；或按平均偏差计，不应超出规定值。仪器波长的允许误差为：紫外光区±1nm，500nm 附近±2nm。 重现性为准确度允许误差值的一半。2. 吸收池的配对性检查 将两只 1cm 的石英比色皿都装入 0.005mol/L H2SO4溶液。以其中一个比 色皿作空白，在 350nm，313nm，257nm 和 235nm 处测定另一比色皿的 吸光度，记录校正值，或用仪器自动校零功能校正。3. 吸光度的准确度考察 用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取 120C 干燥至恒重的基准重铬酸钾约 60mg，精密称定，用 0.005mol/L 硫酸溶液溶解并稀释至 1000ml，在规 定的波长处（350nm，313nm，257nm 和 235nm）测定其吸光度值三次， 取平均值，并计算其吸收系数，与规定的吸收系数比较，应符合表中的 规定。波长/nm235nm（最小） 257nm（最大） 313nm（最小） 350nm（最大）吸收系数（）的规定%1 1cmE值124.5144.048.6106.6吸收系数（）的许可%1 1cmE范围123.0126.0142.8146.247.050.3105.5108.54. 重现性检查 以 0.005mol/L H2SO4溶液为空白，用 6.000105g/ml K2Cr2O7的 0.005mol/L H2SO4溶液为测定样品，在 313nm 处测定透光率 7 次，其透 光率最大读数与最小读数之差应不大于 0.1%。5. 杂散光的检查 用 1.20%KCl 溶液，以蒸馏水为空白，用 1cm 吸收池，在 200nm 波长下 测定透光率，重复测定至少三次，取平均值，应小于 1.0%。 用 5.00%(g/ml)NaNO2的水溶液，以蒸馏水为空白，用 1cm 吸收池，在 340nm 波长下测定透光率，重复测定至少三次，取平均值，应小于 0.8%。五、五、注意事项注意事项 1. 仪器长期工作或搬动后，要检查波长精度等，以确保测定结果的精确。 2. 测定过程中，不要关闭软件主画面。否则，仪器要重新自检。 3. 测定过程中，重复测定三次，以减少误差。 4. 比色皿使用注意事项： （1）清洗比色皿一般用水，若有有机物沾污，宜用 HCl-乙醇（1+2）浸 泡片刻，再用水冲洗，不能用碱液或强氧化性洗液清洗，切忌用 毛刷刷洗。 （2）比色皿使用前应用被测物淋洗 3 次，以保持被测物浓度不变。 （3）比色皿所装溶液高度以皿高的 2/33/4 为宜。测试时，比色皿外壁 必须干燥洁净，尤其是透光面。用毕，立即取出，洗涤干净，倒置 晾干。 （4）在测定标准系列各溶液吸光度时，要从稀溶液至浓溶液进行测定。 5. 不允许仪器处于工作状态而测定人员离开工作岗位。6. *(切记切记)输入测定波长时需从长波长至短波长长波长至短波长，例如实验内容和操作步骤项下的 2 和 3 项中四个测定波长，一定按 350nm、313nm、257nm、235nm 顺序输入。六、六、思考题思考题 1. 为什么要对仪器进行性能检查？ 2. 在以上各项性能检查中，你认为哪一项最重要？（如果该项指标不合格， 该仪器就不能用了） 3. 本实验所用的溶液，哪些需要准确的浓度？哪些可以不需要准确浓度？ 4. 什么是杂散光？如何测定？ 5. 为什么吸收池配对性的测定波长与吸收度准确度考察项中所需波长一致？七、七、附注附注 仪器使用方法：详见现代实验化学上册 P407 页附 3：TU-1900 双光束 紫外-可见分光光度计使用方法。