磷含量测定.doc

磷含量测定磷含量测定1 1 试剂试剂1.1 高氯酸。1.2 浓硫酸。1.3 30%过氧化氢。1.40.04mol /L 钼酸铵取钼酸铵 5g，加蒸馏水溶解成 100ml。1.5 还原剂称取亚硫酸氢钠 6g，亚硫酸钠 1.2g，1-氨基-2-茶酚磺酸0.1g，加蒸馏水溶解成 50ml，置棕色瓶中保存，一周内可用。1.6 磷标准液精确称取已干燥至恒重的磷酸二氢钾 439.3mg，加蒸馏水溶解，移入 100ml 容量瓶中，稀释至刻度，为贮备液（1mg 磷/ml）。精确量取贮备液 2ml，于 100ml 容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，为磷标准液（20g/ml）。2 2 操作操作2.1 样品A 群脑膜炎球菌多糖菌苗成品测磷至少取三支安瓿溶解后混合使用。精确量取一定体积样品（含磷 420g）于刻度试管中，加 4 滴浓硫酸（约 0.08ml），加热至炭化，再加 2 滴高氯酸（约 0.06ml），消化至无色澄清，必要时可加 12 滴 30%过氧化氢，但最后必须将过氧化氢除尽。消化后稍置片刻，趁热另2ml 蒸馏水（如冷却后加水，需再加热），加 0.4ml0.04mol /L 钼酸铵，混匀，加 0.2ml 还原剂，混匀，另蒸馏水至6ml，1520 分钟后，于 820nm 波长比色。2.2 标准曲线精确量取磷标准液（20g /ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置于刻度试管中，补加蒸馏水至 1ml，其余操作同样品，可得一标准曲线。3 3 计算计算从标准曲线查出样品相当标准液之 ml 数 A。样品磷含量（g /ml）=A×20/样品 ml 数核酸含量测定取含 A 群脑膜炎多糖抗原 5±1mg /ml 溶液，采用紫外分光法于 260nm 波长测定 OD 值，按 E1%1cm=200 计算核酸含量。