QB-C-QD-SMP-016检定菌管理规程.doc

QB-C-QD-SMP- 016 版本号01修订号00文件名称：检定菌管理规程文件编码：QB-C-QD-SMP-016起草人： 徐倩 日期：2015年12月26日版本号/修订号：01/00审核人： 洪光宇 日期：2015年12月28日制定部门：质量管理部批准人： 洪光宇 日期：2015年12月28日1目的： 建立检定菌管理规程，对检定菌进行确认，定期进行更新培养，并以适当条件保存，避免其它微生物污染或菌种老化。2适用范围： 适用于检验用菌种。3职责： 菌种保管员，质量管理部负责本规程的实施。4控制要求：4.1检定菌的购买与接收4.1.1菌种保管员由质量管理部授权专人担任，此人应受过专业培训，有足够的菌种保存经验。4.1.2 根据检验品种的需要，由菌种保管员填写购买计划单。内容：菌种名称、编号、购买数量、用途等，报质量管理部审核批准。4.1.3 检定菌由质量管理部直接派专人到当地菌药检所或菌种保存机构购买。4.1.4 菌种保管员在接收标准菌种时，须填写菌种入库及使用台账，内容包括：菌种名称、编号、来源、购买日期、购买人、接收日期、接收人、贮存条件、贮存处等，并在保存菌种容器外加贴标签，内容为名称、编号、接收日期。4.2检定菌保存4.2.1将新购进的检定菌菌种置冰箱中按规定的保存条件保存。检定菌所用冰箱必须专用。每隔13个月传代一次，接种在新鲜的琼脂斜面、液体或半固体培养基，按检定菌所需温度和时间培养后，再于普通冰箱内继续保存。各类菌种保存温度与时限见附表： 4.2.2每周检查一次保存菌种的冰箱温度，菌种管的棉塞是否松动、生霉。如有异常及时处理，并逐次记录。4.2.3移植时须核对编号、传代次数、传代日期、所用培养基，并记录。4.2.4每次移植培养后要与原种的编号、名称核对，检查培养特征无误时方可再继续保存并记录。4.3检定菌定期检查：保存期菌种的新陈代谢处于最低水平，易发生变异和死亡，因此必须对保藏期菌种定期检查。4.3.1定期检查菌种外观及干燥状态。4.3.2定期将菌种培养复活，检查保藏菌种的存活率和形态，并记录。4.3.3控制传代次数。传代次数越多，突变的机率越大，因此要尽量少传代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种，为第一代，购入的菌种最多传代次数为五次。超过此限度的或经鉴定检查不合格的应灭活后销毁（通常采用高压蒸汽灭活），并有灭活记录。4.4检定菌的（入库）编号规则4.4.1入库的检定菌菌种按照“菌种（国家）代码+CD+传代次数+传代流水号”进行编号。例如：大肠埃希菌CMCC(B)44 102CD102，其中CMCC(B)44 102表示菌种（国家）代码；CD表示传代，1表示第一代；02表示第一次传代所传的第二支。一般一次传代不得少于三支。所有购入和传代的菌种都需入库保存。4.4.2检定菌菌种（国家）代码表菌种名称代码菌种名称代码大肠埃希菌CMCC(B)44 102金黄色葡萄球菌CMCC(B)26 003枯草芽孢杆菌CMCC(B)63 501白色念珠菌CMCC(F)98 001黑曲霉菌CMCC(F)98 003铜绿假单胞菌CMCC(B)10 104生孢梭菌CMCC(B)64 941乙型副伤寒沙门菌CMCC(B)50 0944.5检定菌的发放4.5.1检定菌由菌种保管员负责发放。4.5.2所有发放的检定菌应是培养后健康、生命力强、无变异的菌种。4.6菌液的制备4.6.1用灭菌的生理盐水、注射用水或培养液将斜面上的菌苔或者孢子洗下，根据检验需要，稀释至规定浓度，置无菌具塞三角瓶或大号试管中，在冰箱中48保存。4.6.2每种菌液上应标明菌种的名称、编号、菌液浓度、制备日期、制备人和使用期限等。4.6.3除另有规定外菌液的使用期限一般为一个星期，超过期限或受杂菌污染时应重新制备。4.7检定菌的销毁4.7.1检定菌传代次数超过5代,或因某种特殊情况，导致菌种变异的应进行销毁。4.7.2销毁时要把菌种灭活（121，30分钟）。附表: 各类菌种保存温度与时限菌 种培养基保存温度传种时间细 菌多用普通肉汤琼脂，或根据菌种规定选用46芽胞杆菌36月;其它每个月放线菌多用高氏合成1号琼脂、察氏琼脂、PDA琼脂46每3个月移植一次酵母菌麦芽汁琼脂、麦芽汁酵母膏琼脂4646个月移植一次丝状真菌PDA琼脂，察氏琼脂、麦芽汁琼脂46（20）4个月移植一次（2个月移植一次）