抗球蛋白试验.ppt

抗球蛋白试验 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望抗球蛋白试验抗球蛋白试验原理原理 抗体是一种球蛋白，球蛋白本身又是很好的抗体是一种球蛋白，球蛋白本身又是很好的抗原，用人球蛋白免疫兔子使之产生抗人球蛋白抗原，用人球蛋白免疫兔子使之产生抗人球蛋白抗体，免疫性抗人球蛋白抗体与人体球蛋白可以抗体，免疫性抗人球蛋白抗体与人体球蛋白可以特异性结合。特异性结合。当免疫性抗体与相应红细胞结合时只能致敏当免疫性抗体与相应红细胞结合时只能致敏红细胞而不能使红细胞之间产生凝集，当加入抗红细胞而不能使红细胞之间产生凝集，当加入抗人球蛋白抗体后，抗人球蛋白抗体与人球蛋白抗人球蛋白抗体后，抗人球蛋白抗体与人球蛋白抗体结合，即抗人球蛋白抗体在人球蛋白抗体之间体结合，即抗人球蛋白抗体在人球蛋白抗体之间搭桥，从而使致敏红细胞产生凝集反应。搭桥，从而使致敏红细胞产生凝集反应。抗球蛋白法检测抗球蛋白法检测IgG抗体的原理抗体的原理抗球蛋白抗球蛋白可以和可以和IgG反应反应通过搭桥通过搭桥作用使红作用使红细胞凝集细胞凝集直接抗球蛋白试验（直接抗球蛋白试验（DAT）直接抗球蛋白试验是检查红细胞表面是否直接抗球蛋白试验是检查红细胞表面是否有不完全抗体覆盖的一种试验，是用抗球蛋白有不完全抗体覆盖的一种试验，是用抗球蛋白血清对洗尽血浆蛋白的红细胞进行试验，如红血清对洗尽血浆蛋白的红细胞进行试验，如红细胞在体内已被不完全抗体覆盖，则发生凝集细胞在体内已被不完全抗体覆盖，则发生凝集反应。反应。直抗试验检查对象直抗试验检查对象n n新生儿溶血病患儿的红细胞新生儿溶血病患儿的红细胞 n n溶血性输血反应者的红细胞溶血性输血反应者的红细胞n n自身免疫溶血性贫血患者的红细胞自身免疫溶血性贫血患者的红细胞 用于检测红细胞在体外是否致敏的一种试用于检测红细胞在体外是否致敏的一种试验，即通过抗球蛋白试剂用已知的抗原检测未验，即通过抗球蛋白试剂用已知的抗原检测未知知IgG类抗体的特异性或用已知特异性的类抗体的特异性或用已知特异性的IgG类类抗体检测未知的抗原特异性抗体检测未知的抗原特异性间接抗球蛋白试验（间接抗球蛋白试验（IAT）间抗试验的检查对象间抗试验的检查对象n n输血反应输血反应n n交叉配血交叉配血n n抗体筛选抗体筛选n n抗体鉴定抗体鉴定n n抗原检测抗原检测n n放散液抗体检测放散液抗体检测 抗球蛋白抗球蛋白试剂试剂 n n多特异性抗球蛋白试剂多特异性抗球蛋白试剂 含抗含抗IgG和抗和抗C3d n n单特异性抗单特异性抗IgG 无抗补体无抗补体C3成分成分n n单特异性抗单特异性抗C3 无抗无抗IgG成分成分抗球蛋白试验的三个阶段抗球蛋白试验的三个阶段n n第一阶段第一阶段第一阶段第一阶段：致敏和包被：致敏和包被：致敏和包被：致敏和包被 3737水浴，使血清中的抗体结合到红细胞上水浴，使血清中的抗体结合到红细胞上水浴，使血清中的抗体结合到红细胞上水浴，使血清中的抗体结合到红细胞上n n第二阶段第二阶段第二阶段第二阶段：洗涤：洗涤：洗涤：洗涤 用盐水洗涤，去除未包被在红细胞上的各种用盐水洗涤，去除未包被在红细胞上的各种用盐水洗涤，去除未包被在红细胞上的各种用盐水洗涤，去除未包被在红细胞上的各种球蛋白。球蛋白。球蛋白。球蛋白。n n第三阶段第三阶段第三阶段第三阶段：加入抗球蛋白试剂：加入抗球蛋白试剂：加入抗球蛋白试剂：加入抗球蛋白试剂 如果红细胞上包被有如果红细胞上包被有如果红细胞上包被有如果红细胞上包被有IgGIgG抗体或抗体或抗体或抗体或C3C3加入抗球加入抗球加入抗球加入抗球蛋白试剂会发生凝集，否则不会凝集。蛋白试剂会发生凝集，否则不会凝集。蛋白试剂会发生凝集，否则不会凝集。蛋白试剂会发生凝集，否则不会凝集。抗球蛋白试验抗球蛋白试验注意事项注意事项n n假如红细胞上的血清蛋白未被洗净，剩余的游假如红细胞上的血清蛋白未被洗净，剩余的游离球蛋白可以中和加入的抗球蛋白抗体，产生离球蛋白可以中和加入的抗球蛋白抗体，产生假阴性抗球蛋白试验结果。假阴性抗球蛋白试验结果。n n若为阴性结果，再加若为阴性结果，再加1滴滴25%IgG抗体抗体致敏的致敏的质控红细胞，离心观察结果，如凝集，表明阴质控红细胞，离心观察结果，如凝集，表明阴性结果是正确的；如不凝集，则阴性结果不可性结果是正确的；如不凝集，则阴性结果不可靠。靠。