国家自然科学基金的选题.ppt

国家自然科学基金申报体会郝军 河北医科大学 病理学教研室2007 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)对糖尿病肾病中脂质沉积的调节及药物逆转2009 高脂喂养对大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-b1表达和细胞外基质沉积的影响2010 高脂饮食对大鼠肾小管上皮细胞脂质代谢和细胞外基质沉积的影响2011 PI3K/Akt通路和SREBP-1联合调控对糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积影响的研究2012 microRNA在调控糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积中的作用研究2013 PTEN、SHIP和CTMP对糖尿病肾病的作用及机制研究课题的构思（idea）创新性原始创新性：是指前所未有的重大科学发现、技术发明、原理性主导技术等创新成果。二级创新二级创新 糖尿病肾病肾小球肾小管肾小球足细胞足细胞内皮细胞内皮细胞系膜细胞系膜细胞肾小管SREBP-1基因在糖尿病肾小球系膜细胞中表达与细胞脂质沉积有关（文献）SREBP-1基因在肾小管上皮细胞中表达与细胞脂质沉积有关吗？申报项目2007 固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)对糖尿病肾病中脂质沉积的调节及药物逆转结果基础差（paper 0）糖尿病中，高糖通过刺激肾小管上皮细胞引起固醇调节元件结合蛋白-1（Sterol Regulatory Element Binding Protein-1,SREBP-1）升高，引起脂肪酸合成酶（Fatty Acid synthase,FAS）升高，导致细胞内脂滴增多。发表论文SCI 1篇中文核心 2篇2009 高脂喂养对大鼠肾小管上皮细胞SREBP-1、TGF-b1表达和细胞外基质沉积的影响2010 高脂饮食对大鼠肾小管上皮细胞脂质代谢和细胞外基质沉积的影响申报项目结果创新性差对于高脂饮食的动物模型构建，没有基础下一步如何做SREBP-1基因在肝炎中受PI3K/Akt信号通路的正向调控（文献）SREBP-1基因对肾小管上皮细胞脂质沉积的影响，是否也受PI3K/Akt信号通路的调控？n糖尿病，高糖通过激活肾小管上皮细胞PI3K/Akt通路，引起SREBP-1升高，导致细胞内脂质沉积及细胞外基质增多nPTEN可通过抑制Akt的激活，避免高糖引起的细胞内脂质沉积及细胞外基质增多发表的论文SCI 4篇 中华 2篇 核心和 CSCD 9篇细胞坏死申报项目2011 PI3K/Akt通路和SREBP-1联合调控对糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积影响的研究小结将已有的科研基础做成图，从中去在寻找可能的切入点。研究一定要Forward。（正常组，糖尿病组）（正常组，糖尿病组）首先提取糖尿病大鼠肾小管上皮细胞及高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞内miRNA，进行基因芯片分析，对照正常大鼠及正常培养基培养大鼠肾小管上皮细胞，确定上调和下调的miRNA利用生物分析软件Targetscan预测可能与大鼠SREBP-1结合的miRNA结合基因芯片基因芯片和软软件分析件分析的结果确定可能参与调节糖尿病肾小管上皮细胞SREBP-1表达的待待选选microRNA。后续相关实验采用荧光实时定量荧光实时定量 PCR 技术技术（Real-time PCR）验证待选的SREBP-1调控相关的 microRNA。表达调控实验表达调控实验双荧光素酶实验双荧光素酶实验突变实验突变实验功能实验功能实验2012 microRNA在调控糖尿病肾小管上皮细胞脂质沉积中的作用研究申报项目失败项目设计过大，目标不明确基础差SH2结构含磷酸肌醇（结构含磷酸肌醇（SH2 domain-containing inositol 5-phosphatase,SHIP）C末端调节蛋白（末端调节蛋白（carboxyl-terminal modulator protein，CTMP）2013 PTEN、SHIP和CTMP对糖尿病肾病的作用及机制研究申报项目本研究需要掌握的实验技能n细胞培养n动物饲养n免疫组织化学及免疫荧光nWestern blotnReal-time PCRnELISAn质粒构建及转染其他技能数据分析统计分析图表制作论文撰写总结n基础n创新（Forward）谢谢