2019高中生物 第二章 克隆技术 第6课时 动物的克隆(Ⅱ)学案 浙科版选修3.doc

1第第 6 6 课时课时 动物的克隆动物的克隆()()知识内容要求考情解读动物的克隆a1.简述动物的细胞融合技术及应用。2.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的原因。3.简述动物细胞核移植的概念和程序。4.列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。一、动物的细胞融合技术及其应用1细胞融合与细胞杂交(1)细胞融合含义：指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。促融方法：灭活的仙台病毒、聚乙二醇介导、电融合技术等，其中电融合技术是效率很高的新型细胞融合技术。(2)细胞杂交概念：基因型不同的细胞间的融合。应用：细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可进行基因定位。2单克隆抗体的制备(1)过程(2)杂交瘤细胞的特点：无限增殖，产生单克隆抗体。(3)单克隆抗体的优点：其识别抗原部位的专一性，比一般抗血清优越得多，原因是一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物。(4)单克隆抗体的应用：单抗可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。2助学巧记 血清抗体与单克隆抗体比较项目分泌细胞特点生产单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高产量高，易纯化分离血清抗体各 B 淋巴细胞特异性差、灵敏度低产量低，分离困难探究 1理性思维下列是 A 细胞与 B 细胞融合杂交的过程图解。思考回答相关问题：概念指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的现象，其中基因型不同的细胞间的融合就是细胞杂交原理细胞膜的流动性诱导融合的方法物理、化学方法：聚乙二醇、电刺激等；生物方法：灭活的病毒过程描述膜融合质融合核融合融合成功的标志杂交细胞进行有丝分裂重组细胞的特点杂交细胞具有两个细胞的遗传信息，能表现两个亲本的性状应用检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系进行基因的定位；制备单克隆抗体探究 2图示解读下列是制备单抗的基本方法步骤。请完善下图并思考回答相关问题：31制备单克隆抗体的关键思路是：(1)克隆单一的 B 淋巴细胞，形成细胞群；(2)将 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。2用 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因是什么？答案 (1)每一个 B 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不同种类的 B 淋巴细胞分泌的抗体不同；(2)B 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖，骨髓瘤细胞能够无限增殖。3杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中获得单抗。4制备单克隆抗体过程中的几种细胞的特点：(1)免疫的 B 淋巴细胞：能产生单一抗体，但不能无限增殖。(2)骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体。(3)杂交瘤细胞：既能产生特定的抗体，又能在培养条件下进行无限增殖。5单克隆抗体制备过程中有两次筛选，其目的分别是什么？答案 第一次筛选是在 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，筛选出只有 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞。第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。6获取单克隆抗体的场所：若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从培养液中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。例 1 (2017·浙江选考联考)TOP2A 蛋白在多种肿瘤细胞中大量表达，成为抗肿瘤的研究靶点，某科研单位制作了 TOP2A 蛋白的单克隆抗体。请回答：(1)利用基因工程制备 TOP2A 蛋白：TOP2A 蛋白基因和质粒用_处理并连接成重组质粒，然后导入经_处理的大肠杆菌，并将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的 LB 液体培养基中培养，经离心得到菌体，破碎提纯得到 TOP2A 蛋白。(2)TOP2A 蛋白单克隆抗体的制备：将 TOP2A 蛋白反复多次注射到小鼠体内，使其发生_，取经过免疫的小鼠 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞在_(填物质名称)介导下发生细胞融合，形成杂交瘤细胞。并将各杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、_后，获得能产生单一抗体的_(A.连续细胞系 B有限细胞系C连续细胞株 D有限细胞株)。答案 (1)限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶 CaCl2 (2)免疫反应 聚乙二醇 克隆培养 C解析 (1)在基因工程中常用限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶处理并连接目的基因和质粒。为提高重组质粒导入大肠杆菌的概率，常用 CaCl2处理大肠杆菌，以增大大肠杆菌细胞壁的通透性。(2)在杂交瘤细胞制备过程中，常用聚乙二醇作介导物质，选择发生免疫的 B 细胞和可无限传代的骨髓瘤细胞融合，筛选后获得能产生某一特定抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞能够无限增殖，且筛选后已分离纯化，因此杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、克隆培养后，获得的是能产生单一抗体的连续细胞株。4例 2 (2016·瑞安期中节选)科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了 H5N1 禽流感病毒，用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体，如图为单克隆抗体制备过程示意图，图中 AG 分别表示生物技术或细胞名称，请回答有关问题：(1)若 A 细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则 B 细胞是取自_的细胞，C 过程化学诱导试剂常用_。(2)仅考虑某细胞两两融合，可能形成 3 种类型的 D 细胞，需经两次筛选，选出_(填特点)的 E 细胞用于培养。(3)在动物细胞培养过程中培养液中必须通入 O2和 CO2，通入 CO2的目的是_。随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。答案 (1)感染 H5N1 病毒的动物或人 聚乙二醇(2)既能无限增殖又能产生特异性抗体 (3)维持培养液的 pH 接触抑制解析 (1)单克隆抗体制备时将经过免疫的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，若 A 细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则 B 细胞是取自感染 H5N1 禽流感病毒的动物或人的细胞。C 过程为动物细胞融合，利用的诱导方法有物理法(电刺激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。(2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、B 淋巴细胞自身融合细胞 3 种类型的 D 细胞，因此需用选择性培养基筛选出既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞用于培养。(3)在动物细胞培养过程中培养液中必须通入 O2和 CO2，通入 CO2的目的是维持培养液的 pH。随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来。二、动物的克隆繁殖1不同的动物细胞及全能性的表现程度(1)受精卵：具有使后代细胞形成完整个体的潜能。(2)二分裂球：具有全能性，每一个细胞都可以发育为完整的个体，可形成同卵孪生个体。(3)多能细胞：具有分化为多种组织细胞的潜能。(4)单能细胞：只能分化为一种细胞。(5)已分化的细胞：不再分化为其他细胞，甚至终生不再分裂。2动物难以克隆的根本原因：来自动物的体细胞均已发生了分化，基因组中基因的活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性，以此为起点进行动物克隆，难度很大。53动物体细胞克隆原理和主要技术：利用细胞核的全能性进行核移植，将动物的一个细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)。4克隆动植物的应用(1)为遗传疾病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径。(2)对物种的优化、濒危动物的保存和转基因动物的扩群有重要意义。(3)丰富了人们的物质生活，可降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率。思考 克隆植物体细胞与克隆动物体细胞相比较而言，哪个较容易获得成功呢？为什么？答案 克隆植物体细胞较容易成功。植物体细胞具有全能性，在一定条件下能表现出来；而动物体细胞全能性降低，但是细胞核内含有全套遗传物质，仍然具有全能性。探究理性思维完成绵羊“多莉”克隆流程图：1体细胞羊的克隆成功证明：(1)高度分化的细胞经过一定技术处理，可以回复到类似受精卵时期的功能。6(2)在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细胞核发育的作用。2为什么选择卵细胞作为受体细胞？受体细胞去核的原因是什么？答案 一方面，卵细胞大，易于操作，且卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。另一方面，卵细胞此时具备受精能力，细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进行分裂、分化并形成重组胚胎的物质。受体细胞去核的原因是保证克隆动物的遗传物质最大程度地来自有重要利用价值的动物。3为什么核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同？答案 (1)克隆动物绝大部分 DNA 来自于供体细胞核，但其核外线粒体中的 DNA 来自于受体卵细胞。(2)性状是基因与环境共同作用的结果。供核动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其性状也不可能和供核动物完全相同。(3)在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供核动物没有的性状。4动物体细胞核移植属于哪种生殖方式？为什么？答案 无性生殖。因为动物体细胞核移植最终得到的个体的细胞核中遗传物质完全来自一个个体，不是精卵受精得到的，因此属于无性生殖。例 3 (2017·台州中学调研)下列有关克隆的叙述，错误的是( )A动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整B细胞克隆可用于从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系C “多莉”绵羊的性状与供核绵羊不完全相同D动物细胞培养需要用胰蛋白酶把组织分散成单个细胞答案 A解析 动物难以克隆的根本原因是动物细胞的全能性受到抑制，全能性降低，A 错误；细胞克隆的主要用途之一，就是从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系，B 正确；“多莉”绵羊的细胞核基因来自供核绵羊，而细胞质基因来自提供细胞质个体，所以其性状与供核绵羊不完全相同，C 正确；动物细胞培养需要用胰蛋白酶把组织分散成单个细胞，D 正确。易混易错 利用酶解法获得的组织单细胞悬液中含有不同类型的细胞，进行细胞克隆时，需要保证分离出来的细胞是一个而不是多个，即必须确保所建成的克隆来源于单个细胞。例 4 下图为克隆羊“多莉”的培育过程示意图：下列各项有关表述错误的是( )A克隆羊“多莉”的主要性状与甲羊一致，因为其细胞核基因来自甲羊B克隆羊“多莉”的培育过程中采用的生物技术有细胞核移植和胚胎移植7C乙羊的去核卵细胞为重组细胞的基因表达提供了细胞内的环境条件D此过程说明高度分化的动物细胞具有全能性答案 D解析 生物的性状主要由细胞核中的遗传物质控制，克隆羊的主要性状与提供细胞核的个体基本一致，A 正确；甲羊的体细胞核移植到去核的卵细胞中形成重组细胞后，在体外适宜条件下培养至早期胚胎再移植到第三只羊的子宫内完成妊娠、分娩等过程，用到了细胞核移植技术和胚胎移植技术，B 正确；选择去核卵细胞是因为其细胞质中含有使体细胞核表达全能性的物质，C 正确；此实验只能说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性，D错误。1下列关于动物细胞融合的说法不正确的是( )A细胞融合和细胞培养是细胞工程的主要技术手段B细胞融合可以发生在相同基因型或不同基因型细胞之间C常用于诱导动物细胞融合的手段：聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激、紫外线照射D细胞融合被誉为免疫学中的一次革命，主要是其促进了单抗技术的发展答案 C解析 动物细胞工程的主要技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合，A 正确；细胞融合可以在基因型相同或不同的细胞间进行，B 正确；常用于诱导动物细胞融合的手段：聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等，紫外线照射不可以诱导动物细胞融合，C 错误；细胞融合技术促进了单抗技术的发展，被誉为免疫学中的一次革命，D 正确。2如图为某哺乳动物的生殖过程图，下列叙述正确的是( )8A个体 2 为克隆动物，c 为高度分化的体细胞B个体 2 的遗传性状与提供 b 细胞的母羊完全不同C产生动物个体 2 的生殖方式为有性生殖De 细胞为完成减数分裂的卵细胞答案 A解析 通过克隆技术培育的动物称为克隆动物，提供细胞核的是高度分化的体细胞，A 项正确；考虑到细胞质基因，应该是“有相同之处” ，B 项错误；动物的克隆实际上是无性生殖过程，C 项错误；e 细胞是处于减数第二次分裂中期的卵细胞，并没有完全完成减数分裂，D 项错误。3单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( )B 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A BC D答案 A解析 单克隆抗体的制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞融合时，有以下三种情况：未发生融合的细胞(B 淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞)；自身融合的细胞(B 淋巴细胞自身融合、小鼠骨髓瘤细胞自身融合)；骨髓瘤细胞与单个 B 淋巴细胞融合的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞是制备单克隆抗体必需的，因此要将其筛选出来。4下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述正确的是( )A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应细胞毒性 T 细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成9C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群答案 D解析 是已经获得免疫的 B 淋巴细胞，A 项错误；胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞，B 项错误；同时具有 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C 项错误；经筛选后能够获得分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D 项正确。5单纯疱疹病毒型(HSV1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗 HSV1 的单克隆抗体可快速检测 HSV1。回答下列问题：(1)在制备抗 HSV1 的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的 HSV1 蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗_的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了_反应，再从小鼠的_中获取 B 淋巴细胞。将该 B 淋巴细胞与小鼠的_细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是_。(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_中使其增殖，再从_中提取、纯化获得。(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种 HSV1 蛋白，其原因是该抗体具有_和_等特性。答案 (1)HSV1 蛋白 体液免疫 脾脏 骨髓瘤 无限增殖且产生专一抗体 (2)腹腔 腹水 (3)纯度高 特异性强解析 (1)给小鼠注射 HSV1 后，小鼠体内发生体液免疫，小鼠血清中产生抗 HSV1 蛋白的抗体。B 淋巴细胞是从小鼠的淋巴器官中(如脾、骨髓、扁桃体、胸腺等)获取。杂交瘤细胞由 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而来，具有两个亲本细胞的特性；既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(2)若想获得大量单克隆抗体，通常有两种方法：一是将杂交瘤细胞在动物细胞培养液中培养，然后从动物细胞培养液中筛选分离出单克隆抗体；二是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。(3)单克隆抗体具有：特异性强、纯度高的特点。题组一 细胞融合与细胞杂交1在“神舟”宇宙飞船上，科学家进行了空间动物细胞融合实验，该实验所依据的原理和促进细胞融合的方法分别是( )A细胞的全能性；灭活病毒诱导融合B细胞的全能性；电融合10C细胞膜的流动性；灭活病毒诱导融合D细胞膜的流动性；电融合答案 D解析 细胞融合的理论基础是细胞膜的流动性，在“神舟”飞船上进行动物细胞融合所用融合方法是电融合。2将基因型为 Aa 和基因型为 Bb 的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( )AAAaa BAaBbCAabb DBBbb答案 C解析 基因型为 Aa 和基因型为 Bb 的动物体细胞之间可以自由融合，在两两融合(即 Aa 和Aa、Aa 和 Bb、Bb 和 Bb)的情况下，可产生 AAaa、AaBb、BBbb 三种基因型的细胞。题组二 杂交瘤技术和单克隆抗体制备3科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞是( )A经过特定抗原免疫的 B 淋巴细胞B不经过免疫的 B 淋巴细胞C经过特定抗原免疫的 T 淋巴细胞D不经过免疫的 T 淋巴细胞答案 A解析 骨髓瘤细胞必须与经过特定抗原免疫的 B 淋巴细胞融合，形成杂交瘤细胞，才能大量增殖并产生能够与相应的抗原特异性结合的单克隆抗体。4下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是( )AB 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的病毒或聚乙二醇诱导B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C体外培养时，一个 B 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显答案 A解析 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时可采用聚乙二醇、电激或灭活的病毒促融；融合后的杂交瘤细胞既有 B 淋巴细胞的特点，又有骨髓瘤细胞的特点，因此杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体；杂交瘤细胞产生的单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显。5下列关于用动物细胞工程获得单克隆抗体的实验步骤错误的是( )A将抗原注入小鼠体内，获得能产生相应抗体的 B 淋巴细胞11B用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，使能产生相应抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体答案 B解析 单克隆抗体的制备过程是：将一种抗原注入小鼠体内，获得能产生相应抗体的 B 淋巴细胞，然后将 B 淋巴细胞与小鼠骨髓廇细胞同时培养，在聚乙二醇的诱导下，促使经免疫的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到杂交瘤细胞，从中选出能产生相应抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体；因为动物细胞无细胞壁，所以用不到纤维素酶。6胃癌是我国发生率很高的一种恶性疾病，制备抑制胃癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体制备过程如下图所示。以下说法正确的是( )A诱导骨髓瘤细胞与甲融合，可用的诱导因素只有灭活的病毒B在甲、乙、丙及骨髓瘤细胞中，乙、丙经培养后，均可获得大量的抗胃癌单克隆抗体C用人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体D单克隆抗体制备过程中需加入血清或血浆答案 D解析 诱导动物细胞融合的因素除了灭活的病毒外，还有聚乙二醇、电激等；只有细胞丙既能无限增殖又能产生单一抗体；用人的胃癌细胞反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不是单克隆抗体；动物细胞培养过程中需要向合成培养基中加入血清或血浆，因为其中含有动物细胞生长所需的一些未知天然成分。题组三 细胞核移植实验和动物的克隆繁殖7下列关于动物体细胞克隆的叙述中，错误的是( )A供体为体细胞的细胞核B受体为去核卵细胞C细胞核移植是动物克隆的关键步骤D克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致答案 D解析 经体细胞核移植形成的克隆动物，遗传物质主要由供体细胞核提供，但也含有受体细胞质中的遗传物质，因此克隆动物与供体的遗传物质不完全相同，在相同条件下其表现型也不完全相同。8美国德克萨斯州科学家培育出世界上第一只克隆猫，这只小猫毛色花白，看上去完全不像生养它的花斑猫妈妈，也不完全像为它提供细胞核的基因猫妈妈。对该克隆猫毛色的解12释合理的是( )发生了基因突变 提供卵细胞的雌猫细胞质基因进行了表达 表现型是基因型与环境共同作用的结果 代孕花斑猫妈妈的基因进行了表达A BC D答案 B解析 克隆猫的基因主要来自于重组细胞核提供者，其细胞质基因来自于卵细胞提供者，代孕者不提供遗传物质。因此，其毛色完全不像生养它的花斑猫妈妈，也不完全像为它提供细胞核的基因猫妈妈。其实，即使其遗传物质完全来自于核提供者基因猫，毛色也未必就与之完全相同，因为生物的表现型也会受到环境的影响。9美国食品和药物管理局 2008 年 1 月 15 日宣布，经过克隆的牛、猪和山羊以及它们的后代均可以安全食用，克隆牛产的奶也可安全食用。除个体水平的克隆外，还有分子、细胞、器官等水平的克隆，下列不属于克隆技术的是( )A从出生不久的小鼠心脏取下细胞在体外离体培养成细胞系B使某些特定的外源基因在哺乳动物体内表达C农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D将单个 B 淋巴细胞进行无性繁殖答案 B题组四 综合应用10(2018·台州中学检测)图中甲、乙、丙表示生物个体或结构，表示相应过程，下列叙述与图示不符的是( )A若甲为二倍体植株，乙为花粉粒，丙为单倍体，则过程需要用秋水仙素处理B若甲为植物体的一部分，乙为愈伤组织，丙为胚状体，则过程通常在避光的条件下进行C若甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则基因重组发生在过程中D若甲为成年母羊，乙为去核的卵细胞，丙为重建合子，则过程的核心技术有核移植技术答案 C解析 若甲为二倍体植株，乙为花粉粒，丙为单倍体，则表示减数分裂，表示花药离体培养，过程需要用秋水仙素外理，A 与图示相符；若甲为植物体的一部分，乙为愈伤组织，丙为胚状体，则过程表示脱分化，通常在避光的条件下进行，B 与图示相符；若13甲为成熟哺乳动物个体，乙为配子，丙为受精卵，则基因重组发生在减数分裂过程中，C 与图示不符；若甲为成年母羊，乙为去核的卵母细胞，丙为重建合子，则过程的核心技术有核移植技术，D 与图示相符。11. (2018·绍兴一中模拟)下面两图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是_。(2)图甲中过程常在_诱导下完成，过程与体外培养相比，其优点是不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件。融合的细胞具有两种细胞的特性，即_和_。(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_。(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状并非全部像白面绵羊的原因是_。(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能( )A有选择地繁殖某一性别的家畜B繁殖家畜中的优良个体C用于保存物种D改变动物的核基因(6)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为最14主要的原因是( )A卵细胞大，便于操作B卵细胞含有的营养物质多C卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达D重组细胞才具有全能性答案 (1)动物细胞培养 (2)聚乙二醇(或灭活的病毒、电刺激) 无限增殖 产生单一抗体 (3)特异性 (4)卵细胞的细胞质中的遗传物质也能控制某些性状 (5)D (6)C解析 (1)制备单抗和培养克隆羊的过程中都用到了动物细胞培养技术。(2)形成杂交瘤细胞，可用一些方法诱导完成：物理方法如电刺激，化学方法如聚乙二醇，生物方法如灭活的病毒。杂交瘤细胞不但具有无限增殖的特性，还能产生特定的单一抗体。(3)单克隆抗体由于具有特异性，所以可以定向与抗原结合。(4)不考虑环境因素的影响，克隆羊的性状也不完全和提供细胞核的绵羊相同，因为卵细胞的细胞质中也有遗传物质，也能控制某些性状。(5)图乙过程用到的技术有核移植技术、胚胎培养和胚胎移植技术，可以用于保存濒危物种、繁殖家畜中的优良个体、有选择地繁殖某一性别的家畜等，但是无法改变动物的核基因。(6)将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，主要是因为卵细胞的细胞质可使体细胞的细胞核全能性得到表达。12下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，据图回答下列问题：(1)_技术是单克隆抗体制备技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于_培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。(4)动物细胞融合除了采用聚乙二醇作诱导剂外，还可以采用_(A.聚合酶 B连接酶 C灭活的病毒 D胶原蛋白酶)。(5)淋巴细胞是由动物_中的_细胞分化、发育而来的。(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。答案 (1)动物细胞培养 (2)选择 (3)专一性强 (4)C (5)骨髓 造血干 (6)主动转运解析 (1)动物细胞培养技术是单克隆抗体制备技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，题图中 HAT 培养基属于选择培养基，能够把需要的细胞类型选出来。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是专一性强，可以识别抗原分子的特殊部位。(4)动物细胞15融合除了采用聚乙二醇作诱导剂外，还可以采用灭活的病毒。(5)淋巴细胞是由动物骨髓中的造血干细胞分化、发育而来的。(6)杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质，是通过主动转运进入细胞内的。自助加餐13利用细胞工程方法，以 SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( )A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个 B 淋巴细胞可以获得大量针对 SARS 病毒的单克隆抗体C将等量 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与 SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者答案 D解析 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体；体外培养单个 B 淋巴细胞，不能无限繁殖，所以无法获得大量针对 SARS 病毒的单克隆抗体；将等量 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有 B 淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞；SARS 病毒感染者体内有病毒核衣壳蛋白，用相应的单克隆抗体与之发生特异性结合的方法可以诊断出病毒感染者。14中国自主完成的首批成年体细胞克隆牛有 3 个母亲，A 牛提供细胞核即供体细胞，B 牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞，两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后，通过细胞分裂形成早期胚胎，再将这个胚胎植入 C 牛子宫内。据此判断下列说法中错误的是( )A培育出的克隆牛几乎是 A 牛的复制品B克隆牛不仅具有 A 牛的遗传特征，也具有 B 牛的遗传特征C “克隆牛”就是“试管牛”D通过体细胞克隆技术培育出的小牛，其性别取决于供体细胞，人们可以根据需要，有目的地控制小牛的性别答案 C解析 “试管牛”是用牛的精子与卵细胞在体外完成受精，发育成胚胎，然后植入代孕母 牛子宫内而产生的小牛。 “克隆牛”与“试管牛”不是用相同的技术产生的，故 C 项错误。