实验二-大黄中大黄素的提取.pptx

实验二 大黄中大黄素的提取、分离和鉴定1.实验仪器：圆底烧瓶、冷凝管、电炉、滤布2.实验试剂：大黄粉、20%H2SO4 一、大黄的酸水解3.实验方法15g大黄粉120ml 20%H2SO4,直火回流加热1h，滤布抽滤滤渣水洗至中性，干燥滤饼酸水提取：大黄的蒽醌类化合物多以苷的形式存在，用酸水解可得总蒽醌苷元，苷原极性弱，留在滤渣中。水洗：有H2SO4 留在滤渣中，若不除去，干燥过程水分减少，H2SO4 浓度增高，造成药材碳化。回流：防止水分蒸发使硫酸浓度增加造成药粉碳化。二、总羟基蒽醌苷元的提取1.实验仪器：平底烧瓶、索氏提取器、冷凝管、滤纸2.实验试剂：干燥滤饼、乙醚3.实验方法干燥滤饼置索氏提取器中，加150（100+50）乙醚，提取1.5h乙醚提取液（总蒽醌苷元）乙醚提取：苷元极性弱，用弱极性乙醚提取。玻璃仪器必须干燥，若平底烧瓶中有水，水将会改变提取试剂的极性，影响提取效率，且可能与乙醚混溶后改变溶剂沸点。温度需控制在溶剂蒸汽至冷凝管第二个球处：防止乙醚蒸汽逸出造成污染且影响提取效率。三、pH梯度萃取1.实验仪器：锥形瓶、布氏漏斗、滤纸、pH试纸2.实验试剂：乙醚提取液、NaHCO3、Na2CO3、NaOH极性大小：大黄酸芦荟大黄素大黄素大黄素甲醚大黄酚酸性大小：大黄酸 大黄素芦荟大黄素大黄素甲醚大黄酚碱水层为红褐色，因为羟基醌类化合物在碱性溶液中会发生变构，使颜色加深TLC检查时，Rf值大小顺序：大黄酸芦荟大黄素大黄素大黄素甲醚大黄酚萃取大黄素时，碱水中若含有少量乙醚，则酸化后不能得到沉淀，因为大黄素会溶于乙醚中，即增溶作用，3.实验方法四、柱色谱分离大黄素1.实验仪器：色谱柱、烧杯、烧杯2.实验试剂：硅胶、脱脂棉、丙酮、石油醚-乙酸乙酯3.实验方法湿法装柱：200300目硅胶10g，用脱脂棉填柱子底部，用硅胶用洗脱剂拌均匀至无气泡，玻璃柱下端活塞打开，倒入柱中。干法上样：用5ml丙酮溶解样品后，加少许硅胶（约1g）拌匀，再在水浴上挥干丙酮，将此样品加到硅胶柱顶端。用洗脱剂检漏，留2cm洗脱剂缓冲且排除脱脂棉的气体待洗脱剂留至硅胶平面，用洗耳球敲打使紧实3.实验方法洗脱收集：沿柱壁加洗脱剂洗脱，待色带冲下时，用试管分段收集。洗脱剂：石油醚-乙酸乙酯（7：3）合并浓缩：TCL跟踪检查，合并单一大黄斑点的流份，回收溶剂至小体积。放置析晶。洗脱剂不能低于柱床平面位移值/（cm）2.10 2.10 1.10 1.10 1.10 1.10 0.65 0.65 0.65Rf值 2.10/2.70=0.78 1.10/2.70=0.41 0.65/2.70=0.24五、大黄素的鉴定1.实验仪器：熔点仪2.实验试剂：大黄素、茜草素、1%NaOH、0.5%MgAc2、滤纸3.实验方法熔点测定：大黄素（256257）显色反应：比较大黄素与茜草素的显色反应区别 实验结果：259.6 末