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02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang北京东方志禾商贸有限公司北京东方志禾商贸有限公司李保昌李保昌临床检验项目的合理选择与配伍临床检验项目的合理选择与配伍002.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang1TorchTorch检测的内容包括检测的内容包括Toxoplasma gondii：弓形虫Others：梅毒，B19细小病毒Rubella virus：风疹 Cytomegalo virus：CMVHerpes Simplex virus ：单纯疱疹病毒02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang2ToRCHToRCH检测方法检测方法印迹法：印迹法：a.a.蛋白印迹，蛋白印迹，westernblotwesternblot，b.b.将纯化的抗原印迹于膜上将纯化的抗原印迹于膜上Euroimmune Euroimmune）金标法金标法酶标法（酶标法（a.a.间接法间接法 b.b.捕获法）捕获法）化学发光法（化学发光法（a.a.间接法间接法 b.b.捕获法）捕获法）化学发光法酶标法（捕获法）印迹法、酶标间接法金标法化学发光法酶标法（捕获法）印迹法、酶标间接法金标法定量定性定量定性02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang3CMVCMV概述概述人类感染面最广的病毒之一人类感染面最广的病毒之一传播途径多样传播途径多样直接接触：唾液，性接触直接接触：唾液，性接触,垂直传播：经胎盘母婴传播垂直传播：经胎盘母婴传播血液传播：输血（白细胞）血液传播：输血（白细胞）移植移植潜伏部位常在唾液腺潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾等乳腺、肾等影响因素影响因素-年龄年龄-种族种族-职业职业-社会经济条件社会经济条件影响后果：影响后果：健康人（机会性感染）：无临床症状，单核细胞增多症健康人（机会性感染）：无临床症状，单核细胞增多症 免疫系统受损的病人：肺，心，肝和肾的多系统损伤免疫系统受损的病人：肺，心，肝和肾的多系统损伤 胎儿：先天性胎儿：先天性CMVCMV感染感染核内包涵体呈核内包涵体呈“猫头鹰眼猫头鹰眼”状状02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang4先天性先天性CMVCMV感染感染-Congenital infection-Congenital infection-孕孕妇初次感染初次感染 primary infection (对胎儿的影响严重）孕孕妇再次感染再次感染 re-infection（J Clin Virol.2009 Dec;46 Suppl 4:S6-10.Epub 2009 Oct 2.Congenital cytomegalovirus(CMV)epidemiology and awareness.）（占先天性CMV的3/4）90%无症状无症状10%出生有症状出生有症状几个月或几年后有几个月或几年后有 后后遗症（症（10-15%）无症状无症状先天性先天性CMV感染感染（0.2-2.5%）先天性CMV感染来源于孕妇的CMV急性感染感染感染后果02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang5先天性先天性CMVCMV感染胎儿不良后果感染胎儿不良后果神经发育方面疾病为主神经发育方面疾病为主出生后有症状出生后有症状出生后无症状但以后发病出生后无症状但以后发病：neurological problemsneurological problems（unilateral or unilateral or bilateral sensory neural hearing loss bilateral sensory neural hearing loss 单或双侧感觉神经性听力丧失）单或双侧感觉神经性听力丧失）Indian J Pediatr.2010 Jan;77(1):77-9.Neonatal cytomegalovirus infection:diagnostic modalities available for early disease detection.小头畸形小头畸形 (70%),(70%),智力缺陷智力缺陷 (35%),(35%),听力障碍听力障碍 (60%),(60%),肝脾肿大肝脾肿大 (70%),(70%),黄疸黄疸 (68%),(68%),血小板减少症血小板减少症 (65%),(65%),低体重低体重 (65%),(65%),肺炎肺炎 (2-5%)(2-5%)先天性心脏病先天性心脏病 (5%).(5%).02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang61.IgM阳性就是近期感染吗？！-仅有IgM+是不能下结论的。2.原发感染与复发感染的临床处理不同，如何鉴别-亲和力3.该如何做：IgG/IgM/Avidity合理配伍，灵活选择应用。伴IgM由-转+则为复发感染巨细胞病毒巨细胞病毒CMVCMV感染状况的实验检测方案感染状况的实验检测方案02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang7导致孕妇导致孕妇 CMV CMV IgM IgM 检测阳性结果原因众多检测阳性结果原因众多v 初次急性感染v 继发急性感染v交叉反应(疱疹病毒家族)v患者体内IgM持续阳性v免疫系统的多克隆刺激单独检测单独检测CMV IgMCMV IgM导致假阳性，一定加入导致假阳性，一定加入IgGIgG检测检测02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang8多克隆激活多克隆激活多克隆激活示意图多克隆激活示意图T T、B B细胞可通过多克隆激活剂直接被激活细胞可通过多克隆激活剂直接被激活T或B多克隆激活剂多克隆激活剂（如（如EB,EB,细胞内毒素）细胞内毒素）抗体抗体抗原抗原TH耐受耐受T TH HPreferential retroviral-mediated transduction of EBV-and CMV-specific T cells after polyclonal T-cell activation.Sauce D,Mercier P,Battini JL,Ferrand C,Certoux JM,et alGene Ther.2004 Jun;11(12):1019-22.02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang9CMV IgG avidity CMV IgG avidity 检测检测 ：引入细胞免疫，引入细胞免疫，确定感染时间确定感染时间CMV avidity 检测检测B B细胞在淋巴组织生发中心会经历克隆选择，生成高亲合力抗细胞在淋巴组织生发中心会经历克隆选择，生成高亲合力抗体的浆细胞才会选择性存活，而非高亲合力的则凋亡。体的浆细胞才会选择性存活，而非高亲合力的则凋亡。02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang10卫生部临检中心卫生部临检中心CMVCMV推荐检测方案推荐检测方案02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang11Liaison CMV panelLiaison CMV panelCMV IgG:IU/mL0.4 NEGATIVE0.4IU/mL0.6 EQUIVOCALIU/mL 0.6 POSITIVECMV IgM:AU/mL 15 NEGATIVE15 AU/mL 30 EQUIVOCALAU/mL 30 POSITIVE avidity recommendedCMV IgG avidity:Av 0.200 LOW AVIDITY0.200 Av 0.300 MODERATE AVIDITYAv 0.300 HIGH AVIDITY02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang12胎儿胎儿CMVCMV感染的诊断标准（北美）感染的诊断标准（北美）羊膜腔穿刺检测羊水羊膜腔穿刺检测羊水CMVCMV：CMVCMV分离培养（金标准）分离培养（金标准）&PCR&PCR检测检测注意：在孕妇注意：在孕妇CMVCMV感染后感染后7 7周和孕周和孕2121周后，检测过早往往导致假阴性周后，检测过早往往导致假阴性超声检查发现胎儿不良结果超声检查发现胎儿不良结果:J Obstet Gynaecol Can.2010 Apr;32(4):348-54.Cytomegalovirus infection in pregnancy.02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang13确认确认CMVCMV感染后的治疗感染后的治疗CMV hyperimmune globulin新生儿出生不良后果明显减少抗病毒药物：丙氧鸟苷（ganciclovir DHPG）有防止CMV扩散作用；耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠，但效果比前者差。孕 妇伐昔洛韦 新生儿更昔洛韦、缬更昔洛韦终止妊娠慎重，确诊胎儿CMV感染，同时与患者及家庭充分交流，不得已而为之的最后选择CMV疫苗处于研发中？疫苗对CMV再次感染有效性等问题尚待评估？02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang14弓形虫弓形虫 ToxoplasmaToxoplasma02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang15怀孕期间弓形虫诊断怀孕期间弓形虫诊断临床上临床上常无明显症状常无明显症状：轻度发热，酸痛，淋巴结肿大，无力，皮疹，眼：轻度发热，酸痛，淋巴结肿大，无力，皮疹，眼部感染等症状部感染等症状对成人危害不大，但是，在孕妇可引起流产，早产和死胎。对成人危害不大，但是，在孕妇可引起流产，早产和死胎。对于未出生的胎儿，它可以侵袭大脑和眼睛，导致严重疾病。对于未出生的胎儿，它可以侵袭大脑和眼睛，导致严重疾病。主要的传染源是猫的排泄物，进食生的或半生的肉类也有可能感染。主要的传染源是猫的排泄物，进食生的或半生的肉类也有可能感染。实验室诊断方法实验室诊断方法:血清学检测及其他血清学检测及其他 02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang16弓形虫感染来源弓形虫感染来源生食感染的肉类生食感染的肉类食入污染的蔬菜食入污染的蔬菜肉类加工肉类加工食入生鲜海产品食入生鲜海产品猫等动物猫等动物等等等等Clin Infect Dis.2009 Sep 15;49(6):878-84.Risk factors for Toxoplasma gondii infection in the United States.tachyzoteftussoil cysts cystsCat litter oocyst02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang17怀孕各阶段弓型虫的垂直感染率不同怀孕各阶段弓型虫的垂直感染率不同在孕期的前三个月为约在孕期的前三个月为约15%15%，进行治疗后，只有，进行治疗后，只有7%7%的新生儿发生了感染。的新生儿发生了感染。孕中期三个月的传染率为孕中期三个月的传染率为24-30%24-30%孕期的后三个月，感染的发生率高达孕期的后三个月，感染的发生率高达59%59%。早期检测和治疗具有重要意义。早期检测和治疗具有重要意义。Mem Inst Oswaldo Cruz.2009 Mar;104(2):389-92.Diagnosis of congenital toxoplasmosis:prenatal and neonatal evaluation of methods used in Toulouse University Hospital and incidence of congenital toxoplasmosis.Montoya J,Remington J.Management of Toxoplasma gondii infection during pregnancy.Clin Infect Dis 2008;47:55466.垂直感染率随孕周越来越高垂直感染率随孕周越来越高孕早期的感染导致的胎儿先天性不良后果较中后期更严重孕早期的感染导致的胎儿先天性不良后果较中后期更严重早期检测和治疗具有重要意义。早期检测和治疗具有重要意义。02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang弓形虫感染弓形虫感染筛查筛查流程流程1802.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang19Liaison ToxoplasmaLiaison Toxo IgG II:Curve range 0-400 IU/mLIU/mL 7.2 NEGATIVE 7.2IU/mL 8.8 EQUIVOCAL IU/mL 8.8 POSITIVELiaison Toxo IgM:AU/mL 6.0 NEGATIVE6.0 AU/mL 8.0 EQUIVOCALAU/mL 8.0 POSITIVELiaison Toxo IgG Avidity IIAv 3 LOW AVIDITY3 Av 34 WG34 WGAcyclovir 200 mg five times daily Acyclovir 400 mg three times daily from 36 weeks to deliveryCaesarean Caesarean DeliveryDeliveryAccidental Vaginal Accidental Vaginal DeliveryDeliveryVirus isolation in the Virus isolation in the mother and newbornmother and newbornFollow upFollow upVirus isolation in the Virus isolation in the mother and newbornmother and newbornTo consider To consider neonatal therapyneonatal therapyVirus isolation in the Virus isolation in the mother and newbornmother and newbornTo consider To consider neonatal therapyneonatal therapy孕期初次孕期初次HSV 临床方案临床方案WG:weeks gestationWG:weeks gestation02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang33Recurrent infectionRecurrent infectionAcyclovir 200 mg five times dailyat 36 weeks gestation Positive cultures&Positive cultures&negative genital lesions negative genital lesions at the time of deliveryat the time of deliveryCaesareanCaesareanSectionSectioncaesarean section with intact caesarean section with intact membranes or within 4-6 hours membranes or within 4-6 hours from membranes rupture from membranes rupture 孕期孕期孕期孕期HSVHSV复发的临床方案复发的临床方案复发的临床方案复发的临床方案 WG:weeks gestationWG:weeks gestationVaginalVaginalDeliveryDeliveryNegative cultures&Negative cultures&negative genital lesions negative genital lesions at the time of deliveryat the time of deliveryPositive genital lesions Positive genital lesions at the time of deliveryat the time of deliveryMaternal antivital therapyMaternal antivital therapy+Neonatl antiviral treatmentNeonatl antiviral treatment(if neonate develops signs of infection)(if neonate develops signs of infection)Lazzarotto Tiziana,UO di Microbiologia,Policlinico S.Orsola Malpighi,Bologna02.03.2023Sci Dpt:Yang Jiang34HSVHSV的的IgGIgG和和IgMIgM检测试剂盒检测试剂盒HSV-1/2 IgGHSV-1 IgGHSV-2 IgGHSV-1/2 IgM我该选择哪个品牌的我该选择哪个品牌的TorchTorch试剂，它们试剂，它们真的有区别吗？真的有区别吗？