实验化验员手册.doc

一、实验室基础知识一、实验室基础知识一、实验室安全守则一、实验室安全守则(一)分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程，了解设备性能及操作中可能发生事故原因，掌握预防和处理事故的方法。(二)玻璃管与胶管、胶塞等拆装时，应先用水润湿，手上垫棉布，以免玻璃管折断扎伤。(三)稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中，只能将浓硫酸慢慢到入水中，不能相反!必要时用水冷却。(四)蒸馏和提纯时不能离人，以防温度过高或冷却水突然中断。(五)化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。发现试剂瓶上标签掉落或将要模糊时应立即贴好标签。(六)不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。保持电器及电线的干燥。(七)正确操作闸刀开关，应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置，不能若即若离，以防接触不良打火花。(八)使用酒精灯时，注意酒精切勿装满，应不超过容量的 2/3，灯内酒精不足 1/4 容量时，应灭火后添加酒精。燃着的灯焰应用灯冒盖灭，不可用嘴吹灭，以防引起灯内酒精起燃。酒精灯应用火柴点燃，不应用另一正燃的酒精灯来点，以防失火。(九)若局部起火，应立即切断电源，用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。若火势较猛，应立即与有关部门联系，请求救援。(十)打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。(十一)打开高温烘箱前，须确认箱内温度小于 100后方可打开。(十二)若遇酸碱液灼烧时，速用大量自来水冲洗患处。属酸液烧伤，用 2%碳酸氢钠冲洗；属碱液烧伤，用 2%硼酸冲洗，再用清水冲洗。二、化学试剂的分类和规格二、化学试剂的分类和规格(一)化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。(二)实验室最常见试剂的规格1.基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质，可作为滴定分析中的基准物用，也可精确称量后直接配制标准溶液。主成分含量一般在 99.95100.05，杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当。标签颜色为浅蓝色。2.优级纯试剂，也称为保证试剂，其成分高，杂质含量低，主要用于精密的科学研究和测定工作，简称 GR 级。3.分析纯试剂，简称 AR 级，质量略低于优级纯，用于一般的科学研究和重要的测定。4.化学纯试剂，简称 CP 级，质量较分析纯差，用于工厂、教学实验的一般分析工作。5.实验试剂，简称 IR 级，杂质含量多，主要用于普通的实验或研究。三、化学试剂的使用方法和存放三、化学试剂的使用方法和存放(一)使用方法化验人员要熟知最常用试剂的性质，如市售酸碱的浓度，试剂在水中的溶解性，有机溶剂的沸点，试剂的毒性、危险性及其化学性质等，要注意保护试剂瓶的标签，它表明试剂的名称、规格、质量，万一掉失应照原样贴牢。分装或配置试剂后应立即贴上标签。决不可在瓶中装上不是标签指明的物质。无标签的试剂可取小样检定，不能用的要慎重处理，不应乱倒。为保证试剂不受沾污，应当用清洁的牛角勺从试剂瓶中取出试剂，决不可用手抓取。液体试剂可用干净干燥的量筒倒取或吸管吸取，取出的试剂不可倒回原瓶。打开易挥发的试剂瓶塞时不可把瓶口对准脸部。取出试剂后要盖紧塞子，不可换错瓶塞。不可用鼻子对准试剂瓶口猛吸气，如果必须嗅试剂的气味，可将瓶口远离鼻子，用手在试剂瓶上方扇动，使空气吸向自己而闻出气味。(二)存放1.易燃易暴试剂应贮于铁柜中，柜的顶部有通风口。严禁在化验室存放大于 20L 的瓶装易燃液体。2.药品柜和试剂溶液均应避免阳光直晒及靠近暖气等热源。要求避光的试剂应装于棕色瓶中或用黑布包好存于暗柜中。3.发现试剂瓶上标签脱落或要模糊时应立即贴好标签。无标签或标签无法辨认的试剂都要当做危险品重新鉴别后小心处理，不可随便乱仍，以免引起严重后果。4.剧毒品，如氰化钾等，应锁在专门的毒品柜中，交由保卫人员管理，领用时至少有两人签字，并做好登记。四、玻璃仪器的洗涤方法(一)沉涤仪器的一般步骤1.用水刷洗：准备一些用于洗涤各种形状仪器的毛刷，如试管刷、烧杯刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷表面粘附的灰尘。2.用合成洗涤剂水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液，可配成 1020g 几的水溶液，(也可用 50g 几的洗衣粉水溶液)刷洗仪器，它们都有较强的去油能力，必要时可温热或短时间浸泡。去污粉因含有细砂等固体摩擦物，有损玻璃，一般不要使用。洗净的玻璃仪器倒置时，水流出后壁应不挂水珠。至此再用少量纯水刷洗仪器三次，洗去自来水带来得杂质，即可使用。(二)各种洗涤液的使用要注意在使用各种性质不同的洗涤液时，一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种，以免相互作用，生成的产物更难洗净。对于己知的污物使用合适的洗涤液往往事半功倍，因次最好在做完试验后及时清洗仪器，以免溶剂挥发后污物干涸或在空中发生变化生成难于清洗的物质。几种常用的洗涤液洗涤液及其配方使用方法铬酸洗液研细的重铬酸钾 20g 溶于 40m1 水用于去除器壁残留油污。用少量洗液刷洗或浸泡一夜，洗液可重复使中，慢慢加入 360m1 浓硫酸。用。洗涤废液经处理解毒方可排放。(2)工业盐酸(浓或 1：1)用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣(3)碱性洗液氢氧化钠 10水溶液或乙醇溶液水溶液加热(可煮沸)使用，其去油效果较好；注意，煮的时间太长会腐蚀玻璃，碱一乙醇洗液不要加热。(4)碱性高锰酸钾溶液4g 高锰酸钾溶于水中，加入 10g 氢氧化钠，用水稀释至 100m1清洗油污或其它有机物质，洗后容器沾污处有褐色二氧化锰析出，再用浓盐酸或草酸洗液、硫酸亚铁、亚硫酸钠等还原剂去除(5)草酸洗液510g 草酸溶于 100ml 水中，加入少量浓盐酸洗涤高锰酸钾洗液后产生的二氧化锰，必要时加热使用五、几种指示剂的配制指示剂的配制指示剂名称变色域 pH颜色配制方法酸性碱性甲基橙.红黄0.1g 加水 100m1溴甲酚绿.黄蓝50mg，加 950m1/L 乙醇100m1甲基红.红黄0.1g 加 600m1 几乙醇100m1酚酞.无色红lg 加 950m1 几乙醇 100m1六、标准溶液的配置与标定1. 0.1N NaOH 和 1N NaOH 标准溶液1.1 配制将氢氧化钠配制成饱和溶液、注于内壁敷有石蜡的玻璃瓶中密闭放溶液清亮、倾取上层清液备用。(1) 0.1 N NaOH 标准溶液：量取 52m1 氢氧化钠饱和溶液、注入 1000ml不含二氧化碳的水中，混匀。(2) l N NaOH 标准溶液：量取 5ml 氢氧化钠饱和溶液、注入 1000ml 不含二氧化碳的水中，混匀。1.2 标定(1) 0.1 NNaOH 标准溶液：称取 105110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾 0.6 g，准确至 0.0002g。溶于 50ml 水中，加热至沸，加入 1酚酞指示剂 23 滴。用 0.1N NaOH 溶液滴定至溶液成粉红色。(2) 1N NaOH 标准溶液：称取邻苯二甲酸氢钾 6g，加水 80ml 其余同上。1.3 计算NWV×0.2042式中 W邻苯二甲酸氢钾(g)；V氢氧化钠溶液的用量(m1)；0.2042邻苯二甲酸氢钾(KHC8H404)的毫克当量。2. 0.1 N 硫代硫酸钠标准溶液2.1 配制称取 26g 硫代硫酸钠和 0.2g 无水碳酸钠，溶于 1000ml 水中，缓和煮沸10min，冷却。将溶液保存于棕色具塞瓶中，放置数日后过滤备用。2.2 标定2.2.1 标定法一称取于 100烘至恒重的基准重铬酸钾 0.2g，称准至 0.0002g。置于500m1 具塞锥形瓶中，溶于 25ml 煮沸并冷却的水中，加入碘化钾 2g 和4N 硫酸 20m1。待碘化钾溶解后，于暗处放置 lOmin，加入 250m1 水，用0.1N 硫代硫酸钠溶液进行滴定，进终点时，加入 0.5淀粉指示剂 3m1，继续滴定至溶液由蓝色转成亮蓝绿色。同时作空白实验校正结果。计算NWV×0.04903式中 W重铬酸钾的重量(g)；V硫代硫酸钠溶液的用量(m1)；0.4903每毫克当量重铬酸钾的克数。2.2.2 标定法二准确量取 0.1N 碘标准溶液 3035ml，加入水 100m1 和 0.1N 盐酸 5ml，用0.1N 硫代硫酸钠溶液进行滴定，近终点时加入 0.5淀粉指示剂 3m1，继续滴定至溶液蓝色消失。(注：水 100ml 和 0.1N 盐酸 5m1 所消耗碘量，应作校正)。计算：NN1V1V式中 N1碘标准溶液的当量浓度；V1碘标准溶液的用量(m1)；V.硫代硫酸钠的用量(m1)。. 0.05mol/LEDTA 一 2Na 标准溶液3.1 配制称取 208 乙二胺四乙酸二钠溶于 1000ml 水中，摇匀。3.2 标定(用纯锌作基准的标定方法)标定前锌粒或锌片处理：将纯锌粒或锌片放于 1：4 盐酸溶液中，浸沉片刻，用蒸馏水洗净，再用乙醇浸洗两遍，最后用乙醚洗净，烘干备用。称取基准锌粒或锌片 6.5380g，溶于 20ml 盐酸(密度 1.198cm)中，待全部溶解后，加水稀释至 1000ml，摇匀。在 20。C 的恒温槽内保温至 20，然后用水稀释至刻度，摇匀，即为 0.1000mol/L 的标准溶液，密封备用。准确量取 3035ml 制备的锌溶液，加 100ml 水，以乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至终点时，加入 PHl0 缓冲液 10ml 和铬黑 T 指示剂 5 滴，用0.1mol乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液由紫色转变为纯兰色时，即为终点。注： 1)PHl0 的缓冲溶液的配制：称取 54 克氯化铵，称准至 0.01 克，溶于 200 毫升水中，加入 350 毫升氨水，稀释至 1000 毫升。2)铬黑 T 指示剂：称取 0.5g 铬黑 T，溶于 10ml 缓冲溶液中，并用无水乙醇稀释至 100ml，盖紧塞，此溶液保存的有效期约 1 个月。可用下法配置长期保存指示剂：称取 0.58 铬黑 T，加 1008 固体氯化钠于乳钵中研磨均匀，装于棕色瓶中。3.3 计算Ml × VlM V式中 Ml锌标准溶液的摩尔浓度；. Vn锌标准溶液得用量(m1)；V乙二胺四乙酸二钠标准溶液的用量(m1)；七、消毒剂浓度的测定(稳定性二氧化氯含量的测定)1 原理稳定性二氧化氯在酸性溶液中与碘化钾起氧化作用，释放出一定量的碘，再以硫代硫酸钠标准溶液滴定碘，根据硫代硫酸钠标准溶液的消耗量计算出稳定性二氧化氯的含量。2 试剂2.1 0.1N 硫代硫酸钠标准溶液2.2 10硫酸溶液2.3 10碘化钾溶液2.4 1淀粉溶液3 操作方法取三个棕色带塞锥形瓶，分别依次加入 10硫酸溶液 5mL、10碘化钾溶液 6mL样品 1mL，用二次水冲洗瓶壁，迅速用塞子塞紧瓶口，在阴暗处放置 5 分钟，用 0.1N 硫代硫酸钠标准溶液进行滴定分析，分别记下消耗量，取三次分析值的平均值，作为分析结果 V。4 计算V×N×0.01349CL02含量×100m式中 N硫代硫酸钠标准溶液当量浓度V消耗硫代硫酸钠标准溶液毫升数m被测样体积(mL)注：根据消毒液浓度大小将滴定液浓度相应稀释，方法同上。二、理化检测一、饮料用水1 电导率1.1 原理水样中的导电性在一定条件下与水样中所含的阳离子和阴离子的总量的多少成比例。因此可用电导仪来测定水样溶解性固体的浓度，测定水样中的电导率是根据插在水样的两个电极之间的电阻来完成的。1.2 仪器意大利产 EC215 电导仪 烧杯(250 毫升)1.3 操作1.3.1 按说明书校正电导1.3.2 将水样倒入烧杯中，插入电极，直接读数。2.PH 值水的 PH 范围是：酸性水 5.54.5 碱性水 8.59.5弱酸性水 6.55.5 弱碱性水 7.58.5中性水 6.57.52.1 试纸法撕下一小片试纸，用干净的玻璃棒沾上少量水样滴在试纸的一端，使其呈色，在 23 秒内与标准色阶表比较。(注意：不可将试纸直接投入水样中呈色；呈色后的试纸亦不可与标准色阶表接触比色。)2.2PH 计法同果汁检测(二)13 碱度3.1 原理碱度是水介质与氢离子反应的定量能力，通过用强酸标准溶液将一定体积的水样滴定至某一 PH 值而定量确定。以酚酞为指示剂，用强酸滴定至终点时的反应，称为酚酞碱度，用 P 表示；滴定到酚酞终点后，加入甲基橙指试液，继续用强酸滴定至终点时的反应称为总碱度，以 T 表示。3.2 试剂3.2.1 0.02moL 几盐酸标准溶液3.2.2 0.1moL/L 氢氧化钠标准溶液3.3 操作3.3.1 吸取水样 100mL 于 250mL 三角瓶中，加 23 滴酚酞指示剂，水样呈红色(若不呈色，该水样无酚酞碱度)，用 0.02mol/L 盐酸标准溶液滴定至无色，记录消耗盐酸标准溶液的体积为 V1。3.3.2 再加 23 滴甲基橙指示剂，继续用 0.02mol/L 盐酸标准溶液滴定至橙黄色到桔黄色为止，记录消耗盐酸标准溶液的毫升数为 V2。3.4 计算酚酞碱度(DmmoL/L)V1×C×1000V总碱度(TmmoL/L)(V1 十 V2)×C×1000V式中：C盐酸标准溶液的量浓度V水样的体积V1用酚酞作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数V2用甲基橙作指示剂时消耗盐酸标准溶液的毫升数4 总硬度的测定4，1 原理水中的钙、镁浓度的总和称为总硬度。将水样的 pH 调到 10i0.1 后，以铬黑 T 为指示剂，用 EDTA 滴定，当滴定达到等当点(终点)时，溶液中的Ca2+、Mg2+被 EDTA 完全络合，溶液就从酒红色变为蓝色。由消耗已知浓度的 EDTA 溶液的体积，则可计算水样的 Ca2、Mg2 的总量。4.2 试剂4.2.1 0.01moL/LEDTA 标准溶液4.2.2 PH10 缓冲溶液4.2.3 铬黑 T 指示剂4.3 操作用移液管取水样 50mI 于 250mL 三角瓶内，向水样中加 l1.5mL 缓冲液，用小勺向水样中加入米粒大小铬黑 T 粉末，摇动混匀后溶液出现紫色(紫红色)，用 0.05moL 几 EDTA 标准溶液滴定至溶液出现蓝色为止，准确记录EDTA 消耗量后计算其结果。4.4 计算总硬度(CaOmg/L)VEDTA×0.05608×N×1000V式中：VEDTA消耗 EDTA 的毫升数NEDTA 的 moL 几浓度V取水样 mL 数二、果汁(一)原料I 浓缩果汁1 感官检验具有其特有的风味、状态、色泽。2 可溶性固型物2.1 原理在 20用折光仪测量待测液的折光率，并用折光率与可溶性固形物含量的换算表查得或折光计上直接读出可溶性固型物含量。2.2 仪器手持折光计(测量范围 090) 阿贝折光仪2.3 试液制备澄清果汁要充分混匀；浑浊制品用擦镜纸或纱布挤出汁液后进行测定。2.4 分析步骤2.4.1 测定前按说明书校正折光计2.4.2 分开折光计两面棱镜，用脱脂棉蘸乙醇擦净。2.4.3 用末端熔圆之玻棒蘸取试液滴于折光计棱镜面中央(注意勿使玻璃棒触及镜面)。2.4.4 迅速闭合棱镜，静置 lmin，使试液均匀无气泡，并充满视野。2.4.5 对准光源，读取目镜视野中的读数(手持糖量计)。2.4.5 对准光源，通过目镜观察接物镜。调节指示规，使视野分成明暗两部分，再旋转微调旋钮，使明暗界限清晰，并使分界线在十字交叉点上。读取目镜视野中的百分数，并记录棱镜温度(阿贝折光仪)。温度换算表见附录。2.4.6 允许差同一个样品两次测定值之差，不应大于 0.5。取两次测定的算术平均值作为结果，精确小数点后一位。2.5 引用标准 GBl229590GBl2143.1893 总酸的测定3.1 原理根据酸碱中和原理，用碱滴定试液中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点，按碱液的消耗量计算试液中的总酸含量。3.2 试剂3.2.1 0.1N 氢氧化钠标准溶液3.2.2 1酚酞指示剂溶液3.3 试液制备称取 10.0g 样品于小烧杯中，用量筒定容至 50ml(如溶液浑浊需过滤)。3.4 分析步骤3.4.1 取 5.0ml 试液置于 250ml 三角瓶中，加入蒸馏水 3050ml 及 4 滴 1酚酞指示剂，0.1N 氢氧化钠标准溶液滴定至微红色 30S 不褪色，记录消耗0.1N 氢氧化钠标准溶液的消耗数(V1)。3.4.2 空白实验用水代替试液，以下按 3.4.1 条操作。记录消耗 0.1N 氢氧化钠标准溶液的消耗数(V2)。3.4.3 计算XC×(V1 一 V2)×K×F×100m式中 X每 100 克(或每 100 毫升)样品中酸的克数 g100g 或g100m1；C氢氧化钠标准溶液浓度 N；m试液体积 m1；K酸的换算系数(苹果酸：0.067；柠檬酸：0.064)；F试液的稀释倍数；3.5 引用标准：GBl2292904 氨基态氮的测定4.1 原理氨基态氮为两性电解质。在接近中性的水溶液中，全部解离为双极离子。当甲醛溶液加入后，与中性的氨基酸中的分解离型氨基反应，生成单氢甲基和二羟基诱导体，此反应完全定量进行。此时放出氢离子可用标准碱液滴定，根据碱液的消耗量，计算出氨基态氮的含量。4.2 试剂4.2.1 0.1N 氢氧化钠标准溶液：GB601 配置与标定。4.2.2 0.05N 氢氧化钠标准溶液：用 0.1N 氢氧化钠标准溶液当天稀释。4.2.3 中性甲醛溶液：量取 200ml 甲醛溶液(GB685)于 400m1 烧杯中，置于电磁搅拌器上，边搅拌边用 0.1N 氢氧化钠标准溶液调至 PH 为 8.1。4.2.4 30过氧化氢(HG31082)。4.2.5 PH 6.8 缓冲溶液：按 GB604 中“缓冲溶液制备”配置。4.3 仪器设备酸度计(直接读数，测量范围 014pH，精度 0.lpH)电磁搅拌器 玻璃电极和甘汞电极4.4 试液的制备加入浓缩倍数等量的水，使其成为果汁，并充分混匀，供测试用。4.5 测定步骤4.5.1 将酸度计接通电源，预热 30min 后，用 PH6.8 的缓冲溶液校正酸度计。4.5.2 吸取试液 A 毫升(氨基态氮含量为 15mg)于烧杯中，加 5 滴 30过氧化氢。将烧杯置于电磁搅拌器上，电磁插入烧杯内试样中适当位置。4.5.3 开动电磁搅拌器，先用 0.1N 氢氧化钠标准溶液慢慢中和试样中的有机酸。当 pH 达到 7.5 左右时，再用 0.05N 氢氧化钠标准溶液调至 pH 为8.1，并保持 lmin 不变。然后慢慢加入 1015m1 中性甲醛溶液。lmin 后用0.05N 氢氧化钠标准溶液滴定至 pH 为 8.1。记录消耗 0.05N 氢氧化钠标准溶液的体积。4.5.4 计算XC×V×K×14×100m式中：X每 100g(100m1)试样中氨基态氮的毫克数，mg100g(mg100m1)；C氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，mol/L；V加入中性甲醛溶液后，滴定试样消耗 0.05N 氢氧化钠标准溶液得体积，m1；m试样的质量 g(m1)；K稀释倍数；14lml lN 氢氧化钠标准滴定溶液相当于氮的克数。同一样品两次测定结果的算术平均值作为结果，精确到小数点后第一位。4.6 同一样品两次测定结果之差：