生物科技行业临床生物化学和生物化学检验教学大纲临床生物化学和生物化.pdf

生物科技行业临床生物化学和生物化学检验教学大纲临床生物化学和生物化生物科技行业临床生物化学和生物化学检验教学大纲临床生物化学和生物化临床生物化学和生物化学检验教学大纲前言前言本课程采用卫生部规划教材:周新教授和涂植光教授主编临床生物化学和生物化学检验为理论讲授用书,钱士匀教授主编临床生物化学和生物化学检验实验指导为实验用书。本课程根据实际情况设立临床生物化学和生物化学技术二门相对独立的课程。临床生物化学以物质及物质代谢为纲,阐述物质代谢紊乱和疾病发展的基本病理改变,主要器官的功能失常和疾病的发展的相互关系;阐述疾病发生发展的病理生化及生化诊断。本课程总学时为 108 学时,理论课和实验课按 1:1 安排。生物化学检验内容包括生物化学发展中当前常用的几大技术的原理,基本设计和应用评价,以及包括诊断分子生物学的内容。本课程总学时为 90 学时,理论课和实验课按 1:1.25 安排。临床生化讲授内容和时数讲授内容讲授时数实验时数绪论0.52血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱3.53糖代谢紊乱33血浆脂蛋白及其代谢紊乱64诊断酶学311体液平衡和酸碱平衡紊乱6肝胆疾病的生物化学诊断69肾脏疾病的生物化学诊断37心脏疾病的生物化学标志物3骨代谢异常的生物化学诊断33内分泌疾病的生物化学诊断3遗传性疾病和精神疾病的生物化学5体液肿瘤标志物3治疗药物浓度监测33生化实验质量控制3检测能力测定3综合实验3考试3第壹章绪论第壹章绪论【目的要求】掌握掌握掌握临床生化的发展的简要回顾和现状。了解了解临床生化的领域和性质。【教学时数】讲授 0.5 学时；实验 2 学时【讲授内容】临床生物化学的学科领域和性质临床生物化学的学科领域和性质临床生化的定义；临床生化的主要作用。临床生化发展的简要回顾和现状临床生化发展的简要回顾和现状“临床生化”名词的由来；体液生物化学组分的分析应用及“细胞内环境相对稳定”概念；比色法和光度法在临床生化实验室中的应用；血清酶活力测定作为细胞和组织损伤的重要指标；治疗性药物监测成为临床生化的壹个重要分支；超微量的仪器分析、免疫学、分子生物学、放射性同位素等技术在生物化学实验室中的应用；临床生化的国际性、全国性及地方性学会和出版刊物。临床生物化学的现状及其作用临床生物化学的现状及其作用临床生化在医疗保健工作疾病诊断和治疗的作用；临床生化理论和技术在医学教育中的作用和地位；临床生化实验室面临的任务。【实验内容】自动生化分析仪【复习思考题】名词解释：临床生化问答题：概述临床生化发展的几个阶段。第三章血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱第三章血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱【目的要求】掌握掌握疾病对血浆蛋白质变化的图谱特征、检测和临床应用。熟悉熟悉几种重要的蛋白质的理化性质、功能及临床意义。了解了解细胞骨架蛋白-组织特异性蛋白的鉴定及其意义;细胞调节因子实验室检测的简介。【教学时数】讲授 3.5 学时；实验 3 学时【讲授内容】蛋白质和临床诊断蛋白质和临床诊断血浆蛋白质的理化性质、功能和临床意义；血浆蛋白质的正常参考值；疾病时血浆蛋白质变化的图谱特征；血浆蛋白质的检测及其临床应用。细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白组织特异性蛋白的鉴定及其意义。细胞调节因子细胞调节因子细胞因子的定义、分类、实验室的检测【实验内容】双缩脲测定血清总蛋白、溴甲酚绿测定血清白蛋白的原理及临床意义。【复习思考题】名词解释：C-反应蛋白、急性时相反应蛋白、细胞因子问答题：1.试述血浆蛋白质的概念及分类。2.哪些血浆蛋白质属于急性时相反应蛋白？3.试述风湿病、肝疾病、选择性蛋白尿丢失、妊娠时血浆蛋白质变化的图谱特征。第四章糖代谢紊乱第四章糖代谢紊乱【目的要求】掌握掌握血糖浓度的调节；糖尿病的主要代谢紊乱及生物化学检测。熟悉熟悉血糖的来源和去路；糖尿病的分型。了解了解低血糖症和糖代谢的先天性异常。【教学时数】讲授 3 学时；实验 3 学时【讲授内容】概述概述糖的重要生理作用；血糖及其来源和去路；血糖浓度的调节（神经系统的调节和激素的调节）。高血糖症和糖尿高血糖症和糖尿糖尿病的分型；糖尿病的主要代谢紊乱（糖代谢紊乱、脂代谢紊乱、体重减轻和生长迟缓、微血管和神经病变及白内障的发生）；糖尿病的生物化学检测（血糖的测定、尿糖的测定、口服葡萄糖耐量试验、糖化蛋白的测定、胰岛素和胰岛素原及 C 肽的测定）。低血糖症低血糖症低血糖的定义和分类；引起低血糖的原因；空腹型低血糖症；刺激型低血糖症。糖代谢的先天性异常糖代谢的先天性异常糖原贮积病的分型及其临床体征；丙酮酸激酶缺乏症；丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症；磷酸果糖代谢异常；红细胞中 G-6-PD 遗传缺陷或变异；先天性家族性非溶血性黄疸；果糖代谢异常；粘多糖沉积症。【实验内容】葡萄糖氧化酶测定血浆葡萄糖的原理及临床意义；OGTT 试验及临床意义。【复习思考题】名词解释：高血糖症、胰高血糖素、IDDN、NIDDN、OGTT、胰岛素、胰岛素原、C 肽、低血糖症、问答题：1.叙述机体如何调节血糖浓度？2.叙述糖尿病的主要生化紊乱机制。3.糖尿病的主要生物化学检测项目的原理及临床意义。第五章血浆脂蛋白及其代谢紊乱第五章血浆脂蛋白及其代谢紊乱【目的要求】掌握掌握血浆脂蛋白化学；载脂蛋白的分类和功能；各种脂蛋白颗粒的正常代谢。熟悉熟悉高脂蛋白血症的分型标准；脂蛋白和脂质测定方法；脂蛋白受体、脂代谢有关酶类和特殊蛋白质；脂蛋白代谢紊乱和动粥样硬化关系。了解了解常见的原发性和继发性高脂蛋白血症的病因。【教学时数】讲授 6 学时；实验 4 学时【讲授内容】血浆脂蛋白血浆脂蛋白血浆脂蛋白的分类、组成、结构。载脂蛋白载脂蛋白载脂蛋白组成和结构特点及生理功能；载脂蛋白的基因结构及表型。脂蛋白受体脂蛋白受体 LDL 受体结构、基因结构及功能；VLDL 受体结构、基因结构及功能；清道夫受体结构、受体配体及功能。脂代谢有关酶类和特殊蛋白质脂代谢有关酶类和特殊蛋白质脂蛋白脂肪酶、肝脂酶、LCAT、HMGCoA 仍原酶、胆固醇酯转移蛋白的特点及生理功能。正常脂蛋白代谢正常脂蛋白代谢乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白的代谢过程脂蛋白代谢紊乱脂蛋白代谢紊乱高脂血症的分型及其特征、遗传性脂蛋白代谢异常、继发性高脂血症。脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化脂蛋白代谢紊乱和动脉粥样硬化动脉粥样硬化的发病机制脂蛋白和脂质测定方法学评价脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白测定；血清总脂质测定；胆固醇测定；甘油三酯测定；磷脂测定；游离脂肪酸测定；载脂蛋白测定。【实验内容】甘油氧化酶测定血清甘油三脂的原理和临床意义；酶法测定血清胆固醇的原理及临床意义；高密度脂蛋白胆固醇测定的原理及临床意义。【复习思考题】名词解释：载脂蛋白、脂蛋白（a）、LDL 受体、VLDLD 受体、SRCR、高脂蛋白血症、清道夫受体、问答题：1.叙述载脂蛋白种类及主要功能。2.叙述 LDL 受体途径。3.叙述清道夫受体途径。4.世界卫生组织推荐的高脂蛋白血症分型标准及其特征。5.试述各类脂蛋白的正常代谢途径。6.试述动脉粥样硬化的脂蛋白代谢。第六章诊断酶学第六章诊断酶学【目的要求】掌握掌握血清酶变化的病理生理机制；临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶。熟悉熟悉缺血性冠状动脉和肝胆疾病的酶学诊断。了解了解血清酶的分类，测定方法，标本处理等对测定结果的影响,检测同工酶及其亚型的临床意义。【教学时数】讲授 3 学时；实验 11 学时【讲授内容】概述概述血清酶的分类；血清酶变化的病理生理机制；血清酶的生理变异；测定方法、标本处理等对测定结果的影响；免疫方法测酶质量的临床应用；检测同工酶及其亚型的临床意义。临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶肌酸激酶(CK)及其同工酶；乳酸脱氢酶(LD)及其同工酶；氨基转移酶(AST、ALT)及其同工酶；碱性磷酸酶(ALP)；-谷氨酰基转移酶及其同工酶；淀粉酶(AMY)及其同工酶；酸性磷酸酶(ACP)及其同工酶。缺血性冠状动脉疾病的酶学诊断缺血性冠状动脉疾病的酶学诊断肝胆疾病的酶学诊断肝胆疾病的酶学诊断【实验内容】终点法测定 LD、血清 CK 的测定、苏氏碘比色法测定血清淀粉酶活性【复习思考题】名词解释：同工酶、LD、CK、ALT、AST、-GT问答题：1.试述血清酶变化的病理生理机制。2.何谓同工酶？氨基转移酶(ALT、AST)及其同工酶测定有何临床意义？3.试述肝胆疾病的酶学诊断指标。第八章体液平衡和酸碱平衡紊乱第八章体液平衡和酸碱平衡紊乱【目的要求】掌握掌握体液的含量、分布，电解质在体内各部分之间的分布特点，血 Na；、K；、Cl-测定的临床意义；掌握血气的存在形式，Hb 在气体运输中的重要性；公式和血液酸碱平衡的调节方式；临床常见酸碱失衡的实验室诊断。熟悉熟悉各部分体液含量的测定原理，机体和外界水、电介质平衡情况及水平衡紊乱的实验室检查；影响血氧饱和度的常见因素；血液缓冲对；酸碱分析的参数及其意义。了解了解机体内各部分体液之间水的流动，水、电解质平衡的调节，水平衡的紊乱；电解质平衡和酸碱平衡的关系。【教学时数】讲授 6 学时【讲授内容】体液平衡及调节体液平衡及调节水平衡；钠、氯平衡；体液中的电解质分布及平衡，阴离子隙，体液交换；体液平衡的调节（口渴感觉调节，激素调节）。血气分析血气分析血液中 O2的运输，血氧饱和度、P50，影响 O2运输的因素；血液中 CO2的运输；PO2、PCO2、pH、2，3-DPG 对血红蛋白运输气体的影响。体液平衡紊乱体液平衡紊乱水平衡紊乱（脱水、水肿）；钠平衡紊乱（低钠血症、高钠血症）；钾平衡紊乱（钾代谢、低钾血症、高钾血症）。酸碱平衡紊乱酸碱平衡紊乱酸碱平衡紊乱的诊断指标；酸碱平衡紊乱的类型及其特点（代谢性酸中毒、呼吸性酸中毒、代谢性碱中毒、呼吸性碱中毒）。酸碱平衡紊乱典型病例检验结果分析酸碱平衡紊乱典型病例检验结果分析代谢性酸中毒、呼吸性酸中毒、代谢性碱中毒、呼吸性碱中毒。体液钾钠氯测定及方法学评价体液钾钠氯测定及方法学评价标本处理及含量变动的因素；无机元素存在形式及测定方法分类；钾、钠测定方法学评价；氯的测定。【复习思考题】名词解释：阴离子隙、血氧饱和度、P50、标准碳酸氢盐、实际碳酸氢盐、缓冲碱、碱剩余问答题：1.体液分几部分？各部分含量及测定原理是什么？2.电解质在各部分体液中分布的特点是什么？何谓阴离子隙？有何临床意义？3.血液 pH 值主要由什么决定？机体如何维持血液酸碱平衡？4.酸碱平衡紊乱的主要诊断指标有哪些？第九章肝胆疾病的生物化学诊断第九章肝胆疾病的生物化学诊断【目的要求】掌握掌握肝的生理功能；各类肝病对蛋白质代谢的变化及检测指标；胆红素代谢和黄疸；某些肝病血清酶活力的测定。熟悉熟悉肝病检查手段和肝功能生化检查分类；肝病对糖、脂代谢的变化及检测指标；胆汁酸代谢异常和疾病的关系了解了解肝的生物转化功能；肝硬化、肝癌的生物化学；肝细胞损伤时肝功能生化检验的目的及挑选检验项目的原则。【教学时数】讲授 6 学时；实验 9 学时【讲授内容】概述概述肝细胞的正常代谢功能；枯否细胞的功能；肝细胞损伤时的代谢障碍。肝的生物转化功能肝的生物转化功能生物转化的反应类型，致癌物质的生物转化，药物的生物转化，毒物的生物转化，有关生物转化和排泄的肝功能试验。肝和胆汁酸代谢肝和胆汁酸代谢胆汁酸代谢异常和疾病的关系；血清胆汁酸测定的临床意义。胆红素代谢和黄疸胆红素代谢和黄疸胆红素的来源、生成和运输，肝对胆红素的摄取、转化及排泄，胆红素在肠管中的变化及其肠肝循环；黄疸的发生机制，黄疸的鉴别试验。某些肝病的生化机制某些肝病的生化机制乙醇在肝内的代谢及乙醇性肝损伤；肝硬化的生化；肝昏迷的生化机制；肝癌的生化机制。肝细胞损伤时的肝功能试验肝细胞损伤时的肝功能试验急性肝细胞损伤的检验指标；慢性肝细胞损伤的检验指标；肝纤维化的生化诊断；肝癌的生化诊断。【实验内容】赖氏法测定血清 ALT、血清-GT 测定、改良 J-G 法测定血清胆红素【复习思考题】名词解释：生物转化作用、BSP 排泄试验、ICG 排泄试验、初级胆汁酸、次级胆汁酸、结合胆汁酸、-胆红素、未结合胆红素、结合胆红素、黄疸问答题：1.试述肝对胆红素的摄取、转化及排泄过程。2.简述黄疸的发生机制和鉴别试验。3.严重肝病时，蛋白质代谢可发生哪些主要变化？为什么？试列举相应的肝功能检查项目。第十章肾脏疾病的生物化学诊断第十章肾脏疾病的生物化学诊断【目的要求】掌握掌握尿液形成的三大过程及其相应生化检验指标；清除值概念及各类清除试验的临床意义。熟悉熟悉肾的生理功能；肾功能的调节；常见肾疾病的病理生物化学。了解了解肾功能不全的生化诊断及评价。【教学时数】讲授 3 学时；实验 7 学时【讲授内容】概述概述肾小球的过滤功能；肾小管的重吸收功能；肾小管、集合管的排泌作用；肾功能的调节。常见肾脏疾病的病理生物化学常见肾脏疾病的病理生物化学急性肾小球肾炎，肾病综合征，急性肾功能衰竭，慢性肾功能衰竭。肾功能不全的生化诊断及评价肾功能不全的生化诊断及评价蛋白尿；肾功能试验：肾清除率、肾小球滤过率、内生肌肝清除率、血肌酐和尿素测定、肾血流量测定，肾小管功能检查：自由水清除率；早期肾损伤的生化诊断：肾小球微量蛋白：选择性蛋白尿，白蛋白、免疫球蛋白测定，尿低分子量蛋白，尿酶的检测；肾小球-肾小管损伤标志物的组合分析。【实验内容】尿素酶法测定血清尿素、Jaffe 法测定肌酐及内生肌酐清除率、尿酸酶法测定血清尿酸。【复习思考题】名词解释：肾清除率、内生肌酐清除率、自由水清除率、选择性指数、问答题：1.常用清除试验有几种？各检查肾何种功能？2.肾如何调节机体酸碱平衡？第十壹章心脏疾病的生物化学标志物第十壹章心脏疾病的生物化学标志物【目的和要求】掌握掌握心肌损伤的早期标志物、心肌损伤的确定标志物。熟悉熟悉冠心病的危险因素、理想心肌标志物的条件、新的心肌损伤标志物。了解了解心肌肌钙蛋白在临床诊断中用途。【教学时数】讲授 3 学时【讲授内容】概述概述心脏的解剖和生理。冠心病危险因素学说冠心病危险因素学说危险因素的概念；危险因素的认识和发展；和生物化学有关的冠心病危险因素。急性心肌损伤生物化学标志物急性心肌损伤生物化学标志物传统的心肌酶谱；心肌肌钙蛋白；肌红蛋白；探索中的新标志物；心脏疾病生物化学标志物的临床应用。心力衰竭和高血压病的生物化学改变心力衰竭和高血压病的生物化学改变 B 钠尿肽；高血压病的生物化学改变。【复习思考题】名词解释：冠状动脉粥样硬化、急性冠状动脉综合征、CK-MB问答题：1心肌损伤的确定标志物有哪些？简述其临床意义。2请简要总结急性冠状动脉综合征的生化标志。3冠心病的危险因素有哪些？第十三章骨代谢异常的生物化学诊断第十三章骨代谢异常的生物化学诊断【目的和要求】掌握掌握血钙、血磷的代谢及调节；血钙、血磷和血镁的代谢异常。熟悉熟悉某些微量元素的分布及其生理功用。了解了解血钙、血磷、血镁的生理功能；某些微量元素和疾病的关系。【教学时数】讲授 3 学时；实验 3 学时【讲授内容】钙、磷代谢及其异常钙、磷代谢及其异常钙、磷的生理功能；钙、磷代谢及其调节；钙、磷代谢异常；尿路结石症的生物化学。镁代谢及其异常镁代谢及其异常镁在体内的动态及其生理功用；镁代谢异常。微量元素的作用及其和疾病的关系微量元素的作用及其和疾病的关系微量元素的分布及其生理功用；微量元素和疾病的关系；重要微量元素的生物学作用及代谢。【实验内容】血清钙、磷测定【复习思考题】名词解释：PTH、CT、高钙血症、低钙血症、高磷血症、低磷血症问答题：1.哪些激素对钙磷代谢有调节作用？机理如何？2.何谓低钙血症？病因是什么？3.人体内必需微量元素有哪些？和疾病有何关系？第十五章内分泌疾病的生物化学诊断第十五章内分泌疾病的生物化学诊断【目的要求】掌握掌握主要激素的生物合成及调节因素。熟悉熟悉主要激素的生物本质、结构和功能关系。了解了解激素的主要生物学作用及其失调所致的疾病的发病机理和临床表现。【教学时数】讲授 3 学时【讲授内容】概述概述甲状腺功能紊乱的临床生化甲状腺功能紊乱的临床生化甲状腺激素的化学及生物合成，甲状腺激素的分泌、运输、代谢及调节，甲状腺激素的生理生化功能。甲状腺功能亢进症，甲状腺功能减退症。血清甲状腺激素的测定：血清 TT4、TT3及 FT4、FT3测定，甲状腺激素结合比值，游离T4指数。甲状腺分泌调节功能测定及意义：促甲状腺激素、甲状腺功能动态试验、其他试验。肾上腺功能紊乱的临床生化肾上腺功能紊乱的临床生化肾上腺髓质激素，肾上腺髓质嗜铬细胞瘤及其临床生化诊断。肾上腺皮质激素及类固醇激素的生物合成；糖皮质激素的运输及代谢；糖皮质激素的生理生化功能；糖皮质激素分泌的调节：皮质醇增多症、肾上腺皮质功能减退症、先天性肾上腺皮质增生症。血尿中糖皮质激素及其代谢物测定、下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能及动态功能试验。下丘脑-垂体内分泌功能紊乱的临床生化下丘脑-垂体内分泌功能紊乱的临床生化下丘脑-垂体内分泌功能及调节，生长激素及生长调节素，生长激素功能紊乱的生化诊断催乳素瘤。性激素紊乱的临床生化性激素紊乱的临床生化性激素的化学生物合成及代谢，性激素的生理功能和分泌调节；性腺功能的临床生化检测；性激素紊乱性疾病的有关临床生化诊断。【复习思考题】名词解释：rT3、CBG问答题：1.试述甲状腺激素的生理生化功能。2.主要肾上腺皮质激素的结构及其主要生物学作用。3.甲亢的主要生化检验指标及其临床意义。第十六章遗传性疾病的生物化学和分子生物学诊断第十六章遗传性疾病的生物化学和分子生物学诊断【目的要求】掌握掌握常见遗传性疾病的基因诊断。熟悉熟悉常见遗传性疾病的病因，基因治疗。了解了解诊断分子生物学在生化遗传学实验室的发展前景。【教学时数】讲授 3 学时【讲授内容】概述概述常见遗传性疾病的发生和基因诊断常见遗传性疾病的发生和基因诊断血红蛋白分子疾病；先天性代谢缺陷病：苯丙酮尿症、嘌啉代谢紊乱和痛风；诊断分子生物学在生化遗传学实验室的发展前景。基因治疗基因治疗【复习思考题】名词解释：反义技术、基因治疗问答题：1.有哪些原因可导致血红蛋白分子病？2.常用的基因诊断技术有哪些？简述其原理。第十八章体液肿瘤标志物第十八章体液肿瘤标志物【目的要求】掌握掌握常见的肿瘤标志物的临床意义。熟悉熟悉肿瘤标志物的定义和分类。了解了解基因类肿瘤标志物的进展及其临床应用。【教学时数】讲授 3 学时【讲授内容】肿瘤标志物的发展概况肿瘤标志物的发展概况肿瘤标志物的定义、分类及临床应用肿瘤标志物的定义、分类及临床应用常见的肿瘤标志物及其临床意义常见的肿瘤标志物及其临床意义肿瘤胚胎性抗原标志物、糖类抗原标志物、酶类标志物、激素类标志物、其他蛋白质类标志物。基因类肿瘤标志物的进展及其临床应用基因类肿瘤标志物的进展及其临床应用 ras 基因家族及其表达产物，myc 基因家族及其表达产物，表皮生长因子受体；RB 基因及其表达产物，P53基因及其产物。【复习思考题】名词解释：肿瘤标志物、正位激素、异位激素、异位型同工酶、胚胎性同工酶、胎盘性同工酶问答题：1.按肿瘤标志物本身化学特性可分哪几类？2.作为壹种良好的肿瘤标志物应具备哪些条件？3.血液中常见的肿瘤标志物及其临床意义。第十九章治疗药物浓度监测第十九章治疗药物浓度监测【目的要求】掌握掌握治疗药物监测的定义。熟悉熟悉治疗药物监测的临床应用。了解了解需测定药物浓度进行监测的主要药物。【教学时数】讲授 3 学时；实验 3 学时【讲授内容】概论概论药代动力学基础及有关参数的应用药代动力学基础及有关参数的应用药动学模型：房室模型、消除动力学模型；单室模型壹级消除动力学：单剂静脉注射、恒速静脉注射、血管外单剂用药、多次用药；二室模型壹级消除动力学；非线性动力学。理使用治疗药物监测应考虑的基本因素理使用治疗药物监测应考虑的基本因素药效学原因；药动学原因。治疗药物监测的临床应用治疗药物监测的临床应用获取个体药动学参数，制定用药方案指导调整剂量，肝肾功能损伤时剂量的调整。治疗药物监测常用标本及预处理治疗药物监测常用标本及预处理药物浓度测定常用技术药物浓度测定常用技术光谱法，色谱法，免疫化学法，其他检测方法。需测定药物浓度进行监测的主要药物需测定药物浓度进行监测的主要药物强心甙类，抗癫痫药，治疗情感性精神障碍药，茶碱，抗心律失常药，氨基甙类抗生素，环孢素 A。【实验内容】治疗药物监测(TDM)医院参观【复习思考题】名词解释：治疗药物监测、第壹关卡效应、生物利用度、药代动力学、房室、消除速率常数、半衰期、药物清除率、稳态血药浓度、问答题：治疗药物监测的主要任务是什么？试叙治疗药物监测的临床应用。【参考资料】1.朱明德主编现代临床生物化学上海医科大学出版社 1996.122.CarlABuritisetal:TietzTextbookofClinicalChemistry2ndW.B.SaundersCompany3.李影林等主编中华医学检验全书人民卫生出版社 1996生物化学检验教学内容和时数生物化学检验教学内容和时数内容讲课时数实验时数绪论4分光光度法分析原理24电泳总论及醋酸纤维薄膜电泳24琼脂糖凝胶电泳23聚丙烯酰胺凝胶电泳24等点聚焦电泳23SDS-PAGE23离心技术3层析原理及凝胶层析32亲和层析24DNS-氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析36离子交换层析24酶学实验24DNA 的提取23聚合酶链反应技术22PCR-SSCP综合实验考试2313第二章临床生物化学实验基本技术和管理第二章临床生物化学实验基本技术和管理绪论绪论【目的要求】掌握掌握生物大分子分离纯化的方法和原理。熟悉熟悉生化技术的定义和特点。了解了解生化技术的应用剂发展趋势。【教学时数】讲授 4 学时【讲授内容】生化技术概论生化技术概论生物大分子的壹般制备法生物大分子的壹般制备法组织细胞破碎的方法；生物大分子的分离纯化。生化技术的特点生化技术的特点生化技术的应用生化技术的应用生化技术的发展趋势生化技术的发展趋势【复习思考题】问答题:请列举生物大分子分离纯化的方法，且分别简述其原理。常用组织细胞破碎的方法有哪些？分光光度法分析原理分光光度法分析原理【目的要求】掌握掌握分光光度法原理；可见分光光度计的波长校正。熟悉熟悉血红蛋白及衍生物吸收光谱测定；光谱分析技术的分类及常用方法。了解了解分光光度计的光电管对光灵敏度曲线。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】概述概述光的基本性质；光谱分析技术的分类及常用方法。光吸收的基本原理光吸收的基本原理光吸收的基本定律光吸收的基本定律分光光度计的组成及其功能分光光度计的组成及其功能【复习思考题】名词解释：吸光度、摩尔吸光系数问答题:1.光吸收的基本原理和基本定律是什么？2.吸光度和吸光系数俩者有何关系？3.在制作吸收曲线时为什么在分光光度计上每选择壹个波长都需重新用空白管调零点？电泳技术总论及醋酸纤维薄膜电泳电泳技术总论及醋酸纤维薄膜电泳【目的要求】掌握掌握电泳的基本原理及影响电泳迁移率的因素；血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法。熟悉熟悉被分离出的五种血清蛋白质参考范围。了解了解五种血清蛋白质百分含量的改变和疾病的关系。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】电泳技术的发展史电泳技术的发展史电泳技术的基本原理和分类电泳技术的基本原理和分类影响电泳迁移率的因素影响电泳迁移率的因素电场强度、离子强度、pH、电渗、分子筛效应。醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作方法醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作方法血清蛋白电泳的临床意义血清蛋白电泳的临床意义【复习思考题】名词解释:迁移率、电渗问答题:1.影响电泳迁移率的因素有哪些？2.血清蛋白电泳的基本原理是什么？琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳【目的要求】掌握掌握正常人血清脂蛋白的分类及血清脂蛋白琼脂糖电泳原理。熟悉熟悉血清脂蛋白琼脂糖电泳操作方法。了解了解琼脂糖凝胶电泳在临床上的应用。【教学时数】讲授 2 学时；实验 3 学时【讲授内容】正常人血清脂蛋白的分类及结构特点正常人血清脂蛋白的分类及结构特点血清脂蛋白琼脂糖电泳原理血清脂蛋白琼脂糖电泳原理琼脂糖及组成琼脂糖及组成电内渗、胶凝温度、熔化温度、凝胶强度、脱水收缩作用。血清脂蛋白琼脂糖电泳操作方法血清脂蛋白琼脂糖电泳操作方法琼脂糖电泳在临床上的应用琼脂糖电泳在临床上的应用【复习思考题】名词解释：电内渗、胶凝温度、熔化温度问答题:1.试述血清脂蛋白电泳的临床意义。2.试比较琼脂和琼脂糖的异同点。聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳【目的要求】掌握掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的特点；不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理；影响聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移率的因素。熟悉熟悉聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作注意点。了解了解聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】概述概述聚丙烯酰胺的组成及聚合聚丙烯酰胺的组成及聚合丙烯酰胺亚、甲双丙烯酰胺的物理化学特性；凝胶总浓度、凝胶交联度；化学聚合和光聚合；影响聚合的因素：系统的 pH、温度、分子氧和凝胶系统中的不纯物。聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理缓冲系统的选择：pH 的选择（分离胶缓冲系统的选择、先导离子的选择、尾随离子的选择、浓缩胶系统的选择反向离子的选择、电极缓冲液的选择）、离子强度的选择；不连续电泳的原理：凝胶浓度的选择、样品胶、浓缩胶、分离胶；连续电泳的原理聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点及临床应用聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点及临床应用聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作步骤及实验注意事项聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作步骤及实验注意事项【复习思考题】名词解释:凝胶总浓度、凝胶交联度问答题:1.和醋酸纤维薄膜电泳相比较，PAGE 有哪些特点？2.简述 PAGE 的原理。等电聚焦电泳等电聚焦电泳【目的要求】掌握掌握等电聚焦电泳的基本原理和操作方法。熟悉熟悉等电聚焦电泳影响因素；俩性电解质载体必须具备的特点。了解了解等电聚焦电泳在分子生物学及临床检验中的实际应用价值。【教学时数】讲授 2 学时；实验 3 学时【讲授内容】等电聚焦电泳的基本原理等电聚焦电泳的基本原理蛋白质的等电点、聚焦效应、等电聚焦的分辨率。俩性电解质载体的作用、组成及具备条件俩性电解质载体的作用、组成及具备条件合成、特性（分子量小、可溶性好、缓冲能力强、导电性均匀、紫外吸收低及不发荧光、无毒无生物学效应）。连续 pH 梯度的应用连续 pH 梯度的应用电泳支持介质的种类和作用电泳支持介质的种类和作用蛋白质等电点聚焦电泳的操作方法及注意点蛋白质等电点聚焦电泳的操作方法及注意点【复习思考题】名词解释：载体俩性电解质问答题:1.等电聚焦电泳的基本原理试什么？2.本实验的关键步骤是什么？为什么？SDS-PAGESDS-PAGE【目的要求】掌握掌握 SDS-PAGE 的基本原理。熟悉熟悉 SDS 的作用及 SDS-PAGE 操作方法。了解了解电泳过程中的不正常现象和对策。【教学时数】讲授 2 学时；实验 3 学时【讲授内容】SDS-PAGE 的基本原理SDS-PAGE 的基本原理去污剂的选择、样品的处理、检测方法的选择、电泳过程中不正常现象和对策。【复习思考题】名词解释：相对迁移率（Rf）问答题:1.简述 SDS-PAGE 的原理及测定的方法。离心技术离心技术【目的要求】掌握掌握差速离心法、速率区带离心法和等密度离心法的基本工作原理及操作注意点；RCF和 rpm 的换算。熟悉熟悉梯度溶液的制备。了解了解分析性超速离心的工作原理及应用。【教学时数】讲授 3 学时【讲授内容】离心技术发展简史离心技术发展简史离心工作基本原理离心工作基本原理离心力、相对离心力、沉降系数、沉降速度、沉降时间、K 系数。离心机种类及转头离心机种类及转头离心分离方法离心分离方法差速离心法；速率区带离心法；等密度离心法。梯度溶液的制备。分析性超速离心的工作原理及应用分析性超速离心的工作原理及应用【复习思考题】名词解释:相对离心力、沉降系数、沉降速度、K 系数问答题:试比较三种离心方法的原理、使用范围及注意点。层析原理及凝胶层析层析原理及凝胶层析【目的要求】掌握掌握层析的概念和壹般原理；凝胶层析的基本原理；装层析柱的过程及装柱要求。熟悉熟悉层析技术的分类；凝胶层析的特点；凝胶的结构和性质。了解了解凝胶的选择和保存；柱、样品、洗脱液的选择。【教学时数】讲授 3 学时；实验 2 学时【讲授内容】概述概述层析的概念；发展史。层析技术的分类层析技术的分类按俩相所处状态分类、按层析原理分类、按操作形式分类。层析的壹般原理层析的壹般原理分配系数；讨论层析中组分的移动情况；干扰因素。凝胶层析的原理凝胶层析的原理分子筛效应、层析的有关参数。凝胶层析的特点凝胶层析的特点凝胶的结构和性能凝胶的结构和性能凝胶的结构和分离效果、凝胶的物理化学特性。凝胶层析的操作步骤及注意点凝胶层析的操作步骤及注意点【复习思考题】名词解释：分配系数、外水体积、内水体积、柱床体积问答题:1.什么是层析？按层析的原理不同可分哪几类？2.本实验的流动相和固定相各为什么？3.本实验选择 G-50，是否可用其它型号的 Sephadex，为什么？亲和层析原理亲和层析原理【目的要求】掌握掌握亲和层析的基本原理；配基和载体的偶联。熟悉熟悉载体和配基的选择；亲和层析的吸附河洗脱。了解了解亲和层析的应用。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】概述概述亲和层析的基本原理亲和层析的基本原理载体载体载体应具备的特性；可供选择的载体。配基配基配基的选择条件；大分子和配基之间作用的性质和机理。配基和载体的偶联配基和载体的偶联手臂；手臂的条件。亲和层析的吸附和洗脱亲和层析的吸附和洗脱正常吸附、吸附效率不高、无效吸附；非特异性洗脱、特异性洗脱。亲和层析的应用亲和层析的应用【复习思考题】名词解释：配基、载体、亲和力问答题:1.本实验的载体和配基是什么？2.本实验为什么要选用俩种洗脱液？3.本实验的注意事项有哪些？DNS-氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析DNS-氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析【目的要求】掌握掌握聚酰胺薄膜层析的原理及操作方法；DNS-氨基酸的分离方法及注意点。熟悉熟悉薄层层析的原理、方法及实际应用。了解了解上行层析法和下行层析法的原理，薄层的制备、吸附及薄层层析的临床应用。【教学时数】讲授 3 学时；实验 6 学时【讲授内容】吸附层析的原理及其应用吸附层析的原理及其应用薄层层析的原理、操作方法及其应用薄层层析的原理、操作方法及其应用吸附剂的种类和应用吸附剂的种类和应用薄层层析的展开方式薄层层析的展开方式上行、下行DNS-氨基酸聚酰胺双向层析的原理DNS-氨基酸聚酰胺双向层析的原理DNS-氨基酸聚酰胺双向层析的操作方法聚注意事项DNS-氨基酸聚酰胺双向层析的操作方法聚注意事项【复习思考题】名词解释:活度问答题:1.薄层层析的基本原理及分类。2.试述 DNS-氨基酸的分离方法及原理。离子交换层析分离氨基酸离子交换层析分离氨基酸【目的要求】掌握掌握离子交换层析分离氨基酸的原理；离子交换层析操作方法。熟悉熟悉离子交换层析的原理和实际应用。了解了解茚三酮法测氨基酸。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】离子交换层析的原理离子交换层析的原理离子交换层析操作方法及其实际应用离子交换层析操作方法及其实际应用离子交换剂的种类、选择田间剂组成功能离子交换剂的种类、选择田间剂组成功能缓冲液和洗脱剂选择条件缓冲液和洗脱剂选择条件离子交换层析分离氨基酸的方法，试剂的作用以及样品的最终鉴定离子交换层析分离氨基酸的方法，试剂的作用以及样品的最终鉴定【复习思考题】名词解释:交联度、目数问答题:1.离子交换层析的基本原理是什么？2.离子交换剂的种类及各自的特点。第六章诊断酶学第六章诊断酶学【目的要求】掌握掌握酶促反应速度的影响因素；Km 的概念、意义及 Km 值测定原理和方法。熟悉熟悉酶促反应的特点；米-曼氏方程式。了解了解酶的概念。【教学时数】讲授 2 学时；实验 4 学时【讲授内容】酶的概念酶的概念酶促反应的特点酶促反应的特点酶促反应的动力学酶促反应的动力学温度对酶促反应速度的影响；pH 对酶促反应速度的影响；底物浓度对酶促反应速度的影响。【复习思考题】名词解释：Km问答题:1.试述影响酶促反应速度的因素。2.Km 其值测定原理是什么？3.酶促反应有何特点？DNA 的提取DNA 的提取【目的要求】掌握掌握苯酚法抽提 DNA 的原理；从组织中制备 DNA 的过程。熟悉熟悉制备 DNA 过程中各种试剂的作用。了解了解 DNA 测定方法。【教学时数】讲授 2 学时；实验 3 学时【讲授内容】DNA 的提取原理DNA 的提取原理DNA 的提取过程各试剂作用DNA 的提取过程各试剂作用DNA 鉴定和测试方法DNA 鉴定和测试方法操作注意事项操作注意事项【复习思考题】问答题:1.试述苯酚法提取 DNA 的原理。2.实验过程中各试剂的作用是什么？聚合酶链反应技术聚合酶链反应技术【目的要求】掌握掌握聚合酶链反应技术的原理。熟悉熟悉 PCR 反应体系和结果判断。了解了解 PCR 特点和实际临床应用价值。【教学时数】讲授 2 学时；实验 2 学时【讲授内容】聚合酶链反应技术的原理聚合酶链反应技术的原理核酸体内扩增的介绍、体外扩增的原理及过程。PCR 反应体系及选择PCR 反应体系及选择 10X 缓冲液、引物、dNTPs、DNA 聚合酶、目的基因。PCR 结果判断方法PCR 结果判断方法电泳、杂交等。PCR 特点PCR 特点PCR 的实际临床应用价值PCR 的实际临床应用价值【复习思考题】名词解释：PCR、引物问答题:1.试述聚合酶链反应(PCR)技术的原理和基本过程。2.PCR 反应体系包含哪些部分？PCR-单链构型多态性分析PCR-单链构型多态性分析【目的要求】掌握掌握单链构型多态性(SSCP)分析原理。熟悉熟悉 SSCP 操作过程剂银染原理。了解了解 SSCP 的应用。【教学时数】讲授 2 学时；实验 1 学时【讲授内容】单链构型多态性(SSCP)分析的原理单链构型多态性(SSCP)分析的原理SSCP 的操作SSCP 的操作银染原理和过程银染原理和过程SSCP 的应用SSCP 的应用突变的检测、多肽性的分析【复习思考题】问答题:1.单链构型多态性分析的原理是什么？2.银染的原理是什么？【参考资料】1.苏拨贤主编生物化学制备技术科学技术出版社 1998.52.李永明,赵玉琪等著实用分子生物学方法手册科学技术出版社 1998.63.R.WestermeierElecrophoresisinPracticeVCHPublisherIncNewYork1997