促进排铅功能评价方法.doc

68附件 7： 促进排铅功能评价方法促进排铅功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment1 试验项目试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重 1.1.2 血铅1.1.3 骨铅1.1.4 肝组织铅1.2 人体试食试验1.2.1 血铅1.2.2 尿铅1.2.3 尿钙1.2.4 尿锌2 试验原则试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。2.2 应对临床症状、体征进行观察。2.3 应对尿铅进行多次测定，以了解体内铅的排出情况。2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。3 结果判定结果判定3.1 动物实验：实验组与模型对照组比较，骨铅含量显著降低，同时血铅或肝铅显著降低，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。3.2 人体试食试验：试食组与对照组组间比较，至少两个观察时点尿铅排出量增加且显著高于试验前，或总尿铅排出量明显增加。同时，对总尿钙、总尿锌的排出无明显影响，或总尿钙、总尿锌排出增加的幅度小于总尿铅排出增加的幅度，可判定该受试样品具有促进排铅功能。69促进排铅功能检验方法促进排铅功能检验方法 Method for the Assessment of Alleviating Lead Excretion Function1 动物实验动物实验1.1 实验原理实验原理实验动物经口给予含铅化合物（推荐使用醋酸铅），可造成组织中铅含量增高。造模早期以肝、肾等组织中增高明显，之后骨组织中铅含量逐渐增高。比较给予实验动物受试样品后，模型动物组织中铅含量的变化情况，以确定此受试样品是否具有促进机体排铅的作用。1.2 实验动物实验动物推荐使用成年大鼠，单一性别，体重 150200 克，每组 812 只。小鼠则应使用近交系动物，单一性别，体重 1822 克，每组 1015 只。1.3 剂量分组及受试样品给予时间剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组、一个空白对照组和一个模型对照组，三个剂量组中应包括一个人体推荐量的 10 倍（小鼠）或 5 倍（大鼠）剂量组。受试样品给予时间 30 天，必要时可延长至 45 天。1.4 实验设计实验设计本实验使用预防性高铅动物模型。实验期间，在模型对照组、受试样品各剂量组饮用醋酸铅水溶液（推荐浓度为0.1%0.2%）或喂饲含铅饲料造模的同时，各剂量组灌胃给予受试样品或喂饲含不同剂量受试样品的饲料。空白对照组给予去离子水或基础饲料。1.5 观察指标观察指标于末次给予动物受试样品 24 小时后，称量动物体重。取血并处死动物，取适量血、肝、股骨样品进行湿式消化，使用石墨炉原子吸收分光光度计（或 ICP-MS 等方法）测定铅含量。1.6 数据处理和结果判定数据处理和结果判定 一般采用方差分析，但需先进行方差齐性检验，方差齐，则计算 F 值。若 F 值50）的资料，应使用秩和检验。结果判定：试食后，试食组与对照组组间比较，至少两个观察时点尿铅排出量增加且显著高于试验前，或总尿铅排出量明显增加。同时，对总尿钙、总尿锌的排出无明显影响，或总尿钙、总尿锌排出增加的幅度小于总尿铅排出增加的幅度，可判定该受试样品具有促进排铅功能。