卤虫培养.docx

第五章 卤虫培育第一节 卤虫的生物学其次节 卤虫卵第三节 卤虫的增养殖第四节 卤虫的应用第一节 卤虫的生物学一、卤虫的分类地位卤虫(Artemia )又称盐水丰年虫、丰年虾、卤虾等。是一种世界性分布的小型甲壳类。分类地位：节肢动物门/甲壳纲/鳃足亚纲/无甲目/盐水丰年虫科/卤虫属二、卤虫的形态特征Ø 卤虫的颜色与栖息水环境亲热相关Ø 高盐水域：红色Ø 盐度较低的水中：灰白色Ø 虫体(雌虫)较瘦长，全长 1.0-1.5 厘米。明显地分为头、胸、腹三局部，不具头胸甲。雄虫较小, 一般体长 0.7cm 左右。Ø 头部短小，不分节，5 对头肢。胸部 11 节，有 11 对胸肢。腹部由 8 节组成，不具附肢。三、卤虫的发育及生活史卤虫的发育过程中有变态，历经以下阶段：Ø 卵Ø 初孵无节幼体1 龄无节幼体：体长 400-500 m，橘红色，不摄食，靠卵黄维持陈代谢Ø 后无节幼体2 龄无节幼体：开头外源性养分Ø 拟成虫期幼体Ø 成体四、卤虫的生殖习性一卤虫的生殖类型由种的特性打算，不受环境因子的影响而转变。Ø 孤雌生殖卤虫：种的组成中没有雄虫或雄虫的比例极低，雌虫不需要与雄虫交配就可生殖后代。Ø 两性生殖卤虫：种的组成中有雌虫和雄虫之分，只有雌、雄虫交配后才能生殖后代。二卤虫的生殖方式卤虫的生殖方式与其生殖类型无关。生殖方式受内、外界环境因子的影响，环境的变化会引起卤虫生殖方 式的转变。生殖方式：Ø 卵胎生：子代自母体内产出时已孵化为小的无节幼体。Ø 卵生：子代以卵的方式自母体内产出。夏卵和冬卵五、卤虫的生态习性1. 分布2世界性分布。我国卤虫资源主要集中在西北内陆盐湖和华北盐田P184。2. 盐度适盐范围为 10-242，最适盐度范围为 30-50。耐高盐的特性是卤虫躲避敌害的唯一方法。3. 温度卤虫能忍受的温度范围为-3-42，因产地不同而有所差异，最适生长温度25-30。4. 溶解氧和pH 值卤虫的耐低氧力量很强，可生活在 DO 为 1mg/l 的水中。孵化用水的pH 值 8-9 为宜。5. 食性滤食性生物，对大小516 微米的颗粒有较高的摄食率。在自然环境中主要以细菌、微藻和有机碎屑等为食。6. 敌害水鸟，某些昆虫或其幼虫(如半翅类、甲虫等)也能捕食卤虫。其次节 卤虫卵一、卤虫冬卵的生物学特性卤虫冬卵的外层为一厚的卵壳，卵壳内为处于原肠期的胚胎。卵壳分为三层: 从外到里分别为外壳硬壳层、外表皮外表皮膜、胚表皮。卤虫休眠卵卵壳：Ø 外壳硬壳层：呈土黄至咖啡等不同深度的颜色。作用：保护其内的胚胎免受机械和辐射的损伤。Ø 外表皮外表皮膜：有筛分作用，可阻挡分子质量比二氧化碳大的物质通过，从而保护胚胎。Ø 胚表皮内层：为一透亮而有弹性的膜 。Ø 卵壳内的胚胎为一约有 4000 个细胞的原肠胚。二、卤虫卵的贮存风干后低温或冷库贮存。制成真空或充氮的密封罐，罐装贮存。饱和盐水保存。三、卤虫卵的孵化1. 卤虫卵孵化过程中形态及生理的变化2. 孵化的环境条件Ø 温度：25-30，保持恒温。以保持孵化的同步进展。Ø 盐度：常用盐度 20-30 的海水。Ø pH：最适范围 89 ，pH 值过低可用NaHCO3 调整。Ø 充气和溶解氧：孵化过程中需连续充气。作用：供给孵化所需氧气，防止卤虫卵沉底积存。Ø 虫卵密度：一般为 1-3 克/升。Ø 光照：连续光照，光照强度为 2023lx 左右。3. 孵化方法孵化流程（1） 预备孵化容器，具锥形底的玻璃钢桶较好。孵化容器用前需要进展消毒。（2） 用海水或淡水浸泡 1-2 小时， 使虫卵充分吸水，以加快孵化速度。（3） 虫卵的消毒：为了杀灭虫卵外表粘附的细菌，一般用200ppm 的福尔马林溶液浸泡30 分钟，或用300ppm的高锰酸钾溶液浸泡 5 分钟。在上述的孵化条件下，孵化 2436 小时可消灭无节幼体。四、卤虫卵的去壳卤虫卵壳的主要成分是脂蛋白和正铁血红素，去壳的原理就是利用次氯酸钠或次氯酸钙溶液氧化去除这些 物质。去壳步骤：1. 卤虫卵的吸水Ø 卤虫卵吸水膨胀后呈圆球形，有利于去壳。一般是在25淡水或海水中浸泡 12 小时。一般待虫卵变成圆球形即可。2. 配制去壳溶液Ø 常用的去壳溶液是次氯酸钠溶液、氢氧化钠和海水按肯定比例配制而成的。Ø 一般而言，每克干虫卵需使用含有0.5g 的有效氯的次氯酸钠或次氯酸钙，而去壳溶液的总体积按每克干卵 14ml 的比例配制。Ø 由于卤虫卵的去壳过程是氧化反响，氧化效率取决于次氯酸盐解离成次氯酸根的程度，而此解离程度与溶液的pH 值有关。当pH 大于 10 时，次氯酸盐解离成次氯酸根的比例最大，因而氧化效果也最好。因此，需要在去壳液中参加适量的pH 稳定剂。Ø 通常使用氢氧化钠用次氯酸钠时使用，用量为每克干卵0.15g)，或碳酸钠用次氯酸钙时使用，用量为每克干卵 0.67g，也可用氧化钙，用量为每克干卵0.4g来调整PH 值在 10 以上。Ø 由于有效氯的含量会随贮存时间的推移而下降，因此，在配制去壳液之前需要测定次氯酸钠的有效氯的精准含量。有效氯含量的测定可用蓝黑墨水法，更准确的可承受硫代硫酸钠法。Ø 此外，去壳液要现配现用。3. 去壳Ø 将浸泡好的卤虫卵沥干后放入已配好的去壳液中并不断搅拌。Ø 在去壳过程中，卤虫卵的颜色渐渐由咖啡色变为白色，最终变为橘红色。此过程最好在5-15 分钟内完成，时间过长会影响孵化率。Ø 去壳过程是一个氧化作用，并产生气泡，要不停地测定其温度，可用冰块防止升温到40以上。4. 清洗脱氯Ø 当在解剖镜下看不见咖啡色的卵壳时，即表示去壳完毕，此时去壳溶液的温度不再上升。Ø 用孔径为 120-130 微米的筛绢收集上述已去壳的卤虫卵，用足量的自来水或海水充分冲洗，直到闻不出有氯气味为止。Ø 为了进一步除去残留的次氯酸钠，可将去壳卵浸入 1-2%的硫代硫酸钠溶液中约 1min 中和残氯，然后进一步用自来水或海水冲洗。Ø 去壳卵经冲洗后，可以直接投喂，也可以孵化后投喂或放入-4冰箱中保存。五、卤虫卵的质量评价卤虫卵的质量Ø 外观质量Ø 孵化性能Ø 养分价值1. 外观质量的判别Ø 色泽与气味Ø 泥沙含量Ø 破壳与碎壳Ø 空壳Ø 含水率Ø 卵的大小Ø 细菌含量Ø 好的卤虫卵一般为棕色或棕褐色，有光泽，无霉腥臭味。Ø 泥沙含量较低。Ø 破壳卵与碎壳卵所占比例较低。Ø 空壳率较低。Ø 含水率在 10%以下。Ø 卵的大小比较适宜。2. 孵化特性的判别（1） 孵化率Hatching percentage, H%，孵化百分率或孵化百分比每百粒卤虫卵不包括空壳能够孵化出的无节幼体的只数，以百分比表示。孵化率是衡量卤虫卵孵化性 能最常用的指标。（2） 孵化效率Hatching Efficiency, HE每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数。（3） 孵化产量Hatching Output, HO每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的总干重mg。孵化产量最能反映卤虫卵的孵化质量。（4） 孵化速度Hatching Rate, HR孵化速度：孵化出 90%无节幼体所需的时间T90与孵化出第一个无节幼体所需的时间T0的差值。孵化同步性：孵化出 90%无节幼体所需的时间与孵化出 10%无节幼体所需时间的差值。卤虫卵孵化率的测定：国际上通用的方法：A 法和B 法。国内：溶壳法、数粒法、密度法等。A 法1称取 250mg 的待测卤虫卵，放入250ml 的锥形瓶中，往锥形瓶中参加100ml 的盐度为 35 的海水，连续光照，光照强度为 1000-2023lx，水温 25，从底部充气使全部的虫卵悬浮在海水中，但充气不行太强， 以免消灭泡沫。21h 后，用移液管移液器取 5-10 个样品，每个样品 0.5ml，每个样品约有 100 粒卤虫卵。（3） 将取得的样品分别放在滤纸上，然后计数，记录每个样品的虫卵数C。（4） 把滤纸上的虫卵分别冲洗下，放入培育皿中或5ml 的小试管中，参加盐度为35 的海水，水深0.3-0.5cm，在上述条件下进展孵化。548h 后，将孵出的无节幼体用碘液固定，在体视显微镜下计数每个样品中的无节幼体数N。也可用肉眼观看，用滴管吸取活体进展计数。6计算孵化率：H% = N/C×100% B 法1称取 250mg 的待测卤虫卵，放入250ml 的锥形瓶中，往锥形瓶中参加100ml 的盐度为 35 的海水，连续光照，光照强度为 1000-2023lx，水温 25，从底部充气使全部的虫卵悬浮在海水中，但充气不行太强， 以免消灭泡沫。248h 后，用移液管移液器取 5-10 个样品，每个样品 0.5ml，每个样品约含 100 只无节幼体及未孵化的卵粒。（3） 将每个样品分别参加培育皿中，用碘液固定，在体视显微镜下计数每个样品中的无节幼体数N。也可用肉眼观看，用滴管吸取活体进展计数。（4） 预先配好NaOH 溶液40gNaOH 参加 100ml 蒸馏水，向每个样品中滴 1 滴 NaOH 溶液，再滴 5 滴含有效氯 5.25%的次氯酸钠溶液漂白粉水。数分钟后，空壳溶解，未孵化的卵成为去壳卵。计数每个样品中的去壳卵个数C。5计算孵化率：H% = N/N+C×100% A 法和 B 法的比较A 法：与中华人民共和国水产行业标准规定的卤虫卵孵化率测定方法全都。优点：所需器具少、简便、快捷。缺点：计数卵子时必需认真排解破卵和卵壳。B 法：优点：不用识别破损的卵子和卵壳。缺点：所需器具较多、取样计数较为频繁，测量速度较慢。3. 养分价值的判别（1） 无节幼体的脂肪酸含量及组成成分的分析脂肪酸含量和组成可用气相色谱来分析。（2） 从投喂效果来测定饵料效果通过养殖动物的增重及生长发育状况等来推断卤虫卵的优劣。第三节 卤虫的增养殖盐田大面积引种增殖室外粗放养殖室内集约化养殖第四节 卤虫的应用卤虫无节幼体：可作为甲壳类、鱼类育苗的饵料。应使用刚刚孵化的无节幼体，养分价值较高。未用完的无节幼体应在低温(05)保存，以削减能量消耗。卤虫成体：Ø 可作为鱼、虾成体的饵料。Ø 鲜活卤虫作为人工协作饲料的成分，有增味作用，可作为诱食剂。Ø 将卤虫成体深加工后制成卤虫干粉或卤虫虾片，作为对虾苗种培育过程中的人工饵料使用。Ø 利用卤虫的无选择性滤食，可将卤虫用作某些药物或养分物质的生物载体或生物包囊，对养殖对象进展定向强化。