山东省地方标准草莓苗木繁育技术规程(定稿).doc
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1、ICS 65.020B 61DB37山东省 地方标准DB 37/T 草莓苗木繁育技术规程Technical regulotions of seedlings breeding for strawberry - - 发布 - - 实施山东省市场监督管理局 发 布DB 37/T I前 言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。 本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:山东农业工程学院、龙口市农业局、济南普朗特生物科技有限公司。 本标准主要起草人:秦旭、范崇慧、崔刚、王猛、刘文宝、段曦、束靖、徐波、鲁萌。DB 37/T 1草莓苗木
2、繁育技术规程1 范围本标准规定了草莓苗木繁育的品种与植株选择、脱毒苗繁育、生产用苗繁育和生产档案等。 本标准适用于山东省内草莓苗木繁育。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 8321(所有部分) 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 NY/T 5010 无公害农产品 种植业产地环境条件 NY/T 5105 无公害食品 草莓生产技术规程3 品种与植株选择3.1 品种选择选择抗性强、品
3、质优良草莓品种。促成栽培选择休眠短的品种。3.2 植株选择选择健康草莓植株,种苗质量标准为有三片以上新叶,根须发达,无病虫害。4 脱毒苗繁育4.1 繁育流程包括培养室培养和温室驯化移栽两个阶段。4.2 培养室培养4.2.1 培养室设置4.2.1.1 配药室配备冰箱、实验台、天平、恒温培养箱、加热器、pH计、蒸馏水制备器、三角瓶、培养皿、量筒、 烧杯、容量瓶等仪器设备。4.2.1.2 洗涤室DB 37/T 2配备洗瓶池、洗瓶机、纯水发生器等。4.2.1.3 灭菌室配备高压灭菌锅等设备。4.2.1.4 更衣室用于操作人员更衣,放置无菌操作服。4.2.1.5 冷凝室用于存储培养基。4.2.1.6 接
4、种室用于操作人员接种操作,放置超净工作台、双目显微镜、臭氧发生器等灭菌仪器、镊子、剪刀、 接种刀设备。4.2.1.7 培养室用于组培苗培养,放置多层培养架,室内保持在20 25 ,空气相对湿度保持在50 %60 %,采用日光灯、LED灯等补充光照,培养室内每日光照12 h14 h,光照强度2 000 lx3 000 lx。4.2.2 热处理将选好草莓植株放入39 1 恒温培养箱或人工气候箱内进行培养,光照模拟自然光,待长出 匍匐茎作为外植体。4.2.3 茎尖诱导培养4.2.3.1 外植体清洗洗涤剂清洗2 min3 min,再用吐温清洗2 min3 min,清洗过程中不停摇晃,以便清洗充分; 清
5、洗过后用流水冲洗30 min40 min。4.2.3.2 外植体消毒在超净工作台上将外植体置于无菌瓶中;用75 %酒精浸泡30 s,过程中不断摇晃,消毒均匀彻底; 无菌水冲洗45遍;用1 的HgCL浸泡3 min,过程中不断摇晃,消毒均匀彻底;无菌水冲洗45遍。4.2.3.3 培养基制作基本培养基为MS培养基。将加热溶化的培养基分装在100 ml三角瓶或其它培养容器中,在121 高压灭菌20分钟。茎尖分化培养基和增殖继代培养基添加6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)0.2 mgL-10.5 mgL-1,赤霉素(GA3)0.1 mgL-10.5 mgL-1,吲哚丁酸(IBA)00.02 mgL-1;生根
6、培养基附 加6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)0.1 mgL-10.2 mgL-1,吲哚丁酸(IBA)0.02 mgL-10.1 mgL-1。4.2.3.4 茎尖剥离在双目解剖镜下,用解剖针将0.3 mm0.5 mm的生长点完整取下,然后将其接入配制好的培养基 内培养。DB 37/T 34.2.3.5 茎尖培养接种后的玻璃瓶放在培养室中培养。环境条件同培养室要求。培养大约2个月,草莓茎尖可长成完 整植株,此后进行增殖继代培养。4.2.4 病毒检测组培苗要进行病毒检测,每个组培无性系抽取1 %的样品进行草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄 边病毒(SMYEV)、草莓镶脉病毒(SVBV)及草莓皱缩病毒(
7、SCrV)检测,检测采用酶联免疫法 (ELISA)、PCR、分子标记法进行。检测无病毒后继续增殖继代培养。4.2.5 增殖继代培养培养基为MS培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)0.05 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.01 mg/L+糖25 g/L。 在超净工作台上用镊子、剪刀将其分隔成34株在一起的小芽丛,再放入新培养基瓶中培养,每瓶 34个芽丛,每代周期大约30 d40 d,最好不超过两代,继代培养时间不应超过1年。4.2.6 生根培养培养基为1/2MS培养基+吲哚丁酸(IBA)0.2 mg/L+糖20 g/L。当瓶内苗增殖到需要数量时,将芽 丛分成单株,每株应达到23片叶,放置在生根培
8、养基的瓶内生根。45周后将生根的草莓苗从瓶内 移栽到温室中。4.3 炼苗移栽原原种苗4.3.1 温室条件用于瓶苗移栽的温室应设有防虫网,温度控制在10 25 。4.3.2 脱毒苗出瓶用镊子夹住草莓苗从培养瓶中轻轻拉出,在水中清洗附带在根系的琼脂,放入盛有水的容器内防 萎缩,然后拿到温室。4.3.3 脱毒苗驯化4.3.3.1 移栽瓶苗首先移栽至5 cm深穴盘,移栽基质可选用椰糠(EC值为1)、草炭等,移栽时根须全部进入基 质,生长点露出基质表面。移栽后浇透水,使根系与基质紧密结合。4.3.3.2 移栽后管理移栽后,保持叶片湿润、基质潮湿即可,每周喷一次杀菌剂(见附录A)。30天左右根系盘满,移
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