粪大肠杆菌检测作业指导书.doc
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1、粪大肠杆菌检测作业指导书粪大肠杆菌检测作业指导书1.1.试剂及培养基配制试剂及培养基配制1.1 试剂配制a)溴甲酚紫乙醇溶液:称取 1.6g 的溴甲酚紫溶于23ml 乙醇中,然后用蒸馏水定容到 100ml。b)碳酸钠溶液:称取 10.6g 碳酸钠溶于蒸馏水,并定容到 100ml。1.2 培养基的配制1.2.1 乳糖蛋白胨培养液:a)成分:蛋白胨 10.0g;牛肉膏 3.0g;乳糖 5.0g;氯化钠 5.0g;溴甲酚紫乙醇溶液 1ml;蒸馏水 1000ml。b)制法:将规定量的蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,用碳酸钠溶液调节 PH 为7.27.4。加入 1ml 溴
2、甲酚紫乙醇溶液,混匀,分装于置有倒管的试管内(10ml 左右) 。置高压蒸汽灭菌器中,于115灭菌 20min。1.2.2EC 培养基a)成分:胰蛋白胨 20.0g;乳糖 5.0g;胆盐混合物1.5g;磷酸氢二钾 4.0g;磷酸二氢钾 1.5g;氯化钠5.0g;蒸馏水 1000ml。b)制法:将上述成分加热溶解,分装于内装倒管的试管中。灭菌后 PH 值应为 6.9。此培养基用钱不宜置冰箱,以防检测时出现假阳性。2.2.样品采集样品采集2.1 样品瓶应用可耐灭菌处理的广口玻璃瓶或无毒的塑料瓶。灭菌前,把具有玻璃瓶塞得采样瓶用铝箔或厚的牛皮纸包裹,瓶颈系一长绳,在 121经 15min 高压灭菌。
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