血清-谷氨酰转移酶(-GGT)速率法测定.doc
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1、血血清清 - -谷谷氨氨酰酰转转移移酶酶 ( ( - -G GG GT T) )速速率率法法 测测定定1 1. . 实实验验原原理理GGT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以-谷氨酰-3-羧基 -对硝基苯胺为底物,将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成对硝基苯胺和-谷氨酰双甘肽。在405nm 进行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中GGT 活力成正比。-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺+ 双甘肽 GGT 对硝基苯胺 + -谷氨酰双甘肽2 2. . 标标本本:2.1 病人准备:无特殊。2.2 类型:血清或 EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放: 室温可保存 8 小时; 28可保存 3
2、天;-20保存至少可稳定1 周。4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 奥林巴斯 -GGT 测定试剂盒(试剂1 试剂 2)6.1.1 试剂准备:试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6.1.4 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品:
3、使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品: 具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 :奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数:参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤:参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2
4、S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品 GGT 校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行GGT 活力检测,可以直接使用A/min 均值乘以计算因子得到结果,但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算GGT 活力的计算因子见下表:A A/ /m mi in n因因子子 = = G GG GT T 活活力力 U U/ /L L 底物起始的反应( 37) 样品起始的反应(37)405nm 1421 11581 12
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