血清总胆固醇酶试剂法测定法.doc
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1、血血清清 总总胆胆固固醇醇酶酶试试剂剂法法 测测定定法法1 1. . 实实验验原原理理胆固醇酯酶 (CHE)、胆固醇氧化酶 (CHO)、过氧化物酶(POD)、Trinder 反应偶联比色终点法。反应式如下:CHE胆固醇酯 + H2O 胆固醇脂肪酸CHO胆固醇 O2 4-胆甾烯酮 H2O2POD2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 苯酚 醌亚胺 (显色) + 4H2O2 2. . 标标本本:2.1 病人准备: 12 小时禁食。2.2 类型:血清,肝素或EDTA 抗凝血浆。3 3. . 标标本本存存放放: 血清稳定性: 2025保存可稳定 1 周;48保存可稳定 1 周; -20保存可稳定 3 个
2、月。4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 威特曼总胆固醇试剂盒 试剂 1 试剂 2 6.1.1 试剂准备 试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6.1.4 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品:使用奥林巴斯公司提供的校
3、准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 :奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数:参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤:参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否
4、在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品总胆固醇校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠检测结果。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 (mmol/L)合适范围: 5.2mmol/L高度危险临界值: 5.26.2mmol/L高度危险范围: 6.2mmol/L1 13 3. . 临临床床意意义义: 胆固醇由体细胞合成和来自对食物的吸收 1 1 ,是细胞膜的组分和类固醇激素、胆汁酸的前体。血液中的脂蛋白是脂肪和载脂蛋白的复合物,由它转运胆固醇。脂蛋白有四种形式:高密度脂蛋白(HDL) ,低密度
5、脂蛋白( LDL) ,极低密度脂蛋白( VLDL)和乳糜微粒。 LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL 负责从细胞中吸收胆固醇。四种形式的脂蛋白与冠状动脉粥样硬化有着明确的关系。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)作用于动脉内膜形成动脉粥样硬化斑块,与冠心病(CHD)以及相关的死亡率有着非常密切的关系。即使总胆固醇在正常范围内,LDL-C 浓度的升高也预示了高度危险。HDL-C 具有抵御斑块形成的作用,它与冠心病的发生呈负相关。事实上,低 HDL-C 值是独立的危险因子。进行个体总胆固醇的检测只是起过筛作用,如果要对危险作较好的评估,必须另外进行 HDL-C 和 LDL-C 检测。近年来,通过
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