血清肌酸激酶CKDGKC推荐方法测定.doc
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1、血清肌酸激酶血清肌酸激酶 CKDGKCCKDGKC 推荐方法测定推荐方法测定1.1. 实验原理实验原理德国临床化学学会(DGKC)和国际临床化学学会(IFCC)推荐的连续监测法。ADP + 磷酸肌酸 肌酸 + ATPATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖 -6-磷酸葡萄糖 -6-磷酸 +NADP+ 6-磷酸葡萄糖酸 +NADPH+H+NADPH 在 340nm 处有特异吸收,通过测定NADPH 生成速率计算出 CK 活性。2 2. . 标标本本:2.1 病人准备:无特殊要求。2.2 类型:血清,肝素或EDTA 血浆。3 3. . 标标本本存存放放: 稳定性: 28保存稳定 7 天;1525保存
2、稳定 1 天;-20保存稳定 4 周(避光保存)。3 天内的活性损失: 28保存 24 小时或 1822保存 1 小时至少损失 10%。4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。CK己糖激酶(HK)(G6P-DH)5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 奥林巴斯 CK 测定试剂盒(试剂1+试剂 2 )6.1.1 试剂准备:试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质
3、,不能继续使用。6.1.4 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品:使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 :奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数:参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤:参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与
4、分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品 CK 校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行CK 活力检测,可以直接使用 A/min 均值乘以计算因子得到结果,但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算CK 活力的计算因子见下表: A A/ /m mi in n因因子子 = = C CK K
5、 活活力力 U U/ /L L 计算因子( 37): 340nm 4127334nm 4207365nm 47291 12 2. . 参参考考值值范范围围1:(U/L)成人:女性 24167男性 24190参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义 1 1、 2 2 :肌酸激酶( CK)主要由存在于肌肉中的同工酶( CK-M)和存在于脑中的同工酶(CK-B)组成。在血清中 CK 形式为 CK-MM,CK-MB,CK-BB 和巨酶等的二聚物。在心肌损伤或骨骼肌疾病时可以观测到CK活力的升高。 CK 和 C
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