血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法.doc
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1、血清葡萄糖血清葡萄糖 GLUGLU 己糖激酶己糖激酶 HKHK 法测定法法测定法1 1. . 实实验验原原理理己糖激酶紫外比色测定法。HK葡萄糖 + ATP -G-6-P+ ADPMg2+G6PDHG-6-P + NAD+ -6-磷酸葡萄糖 +NADH + H+2 2. . 标标本本:2.1 病人准备: 12 小时禁食。2.2 类型:血清或血浆( EDTA,肝素或氟化钠),标本最好不要溶血。迅速分离血清或血浆,减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。3 3. . 标标本本存存放放: 血清、血浆应在血液采集1 小时内,尽早分离。加入糖分解抑制剂(NaF,KF)后的稳定性:1525保存可稳定
2、 1 天,48保存可稳定 7 天。 血清中的葡萄糖,无溶血,无细菌污染,没有添加的防腐剂,在 25下可稳定 8 个小时,在 4下可稳定 72 小时。尿样应保存在 28下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在 28下稳定至少 5 天, 5 天内不检验的标本应在收集后立即储存在 -20的条件下。4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染、超时送检的的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 威特曼血糖测定试剂盒 试剂 1 试剂 2 6.1.1 试剂准备:试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳
3、定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6.1.4 注意事项:此试剂为体外诊断用。不要入口,吞下有害。保护剂为叠氮钠,避免接触皮肤及粘膜,与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物,即使只含有少量的叠氮钠,如排向下水道请用大量的水冲洗。6.2 校准品:使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 :奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1
4、项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件8.2 仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品血糖校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结
5、果,以 mmol/L 报告。手工测定计算方法为:Au葡萄糖浓度( mmol/L) 校准液浓度As1 12 2. . 参参考考值值范范围围: (mmol/L)新生儿脐带血 3.58.81 小时 2.05.52 小时 2.24.9514 小时 1.94.31028 小时 2.64.54452 小时 2.74.4儿童(空腹)16 岁 4.17.0719 岁 3.95.9成人(空腹) 3.96.4参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。1 13 3. . 临临床床意意义义: 检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视,还可用于检出新生
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