食品中硼酸的快速检测姜黄素比色法.doc
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1、附件 9食品中硼酸的快速检测姜黄素比色法(征求意见稿)1 范围本方法规定了食品中硼酸的姜黄素比色快速检测方法。 本方法适用于粮食制品、淀粉及淀粉制品、糕点、豆制品、速冻食品(速冻面米食品、 肉丸、蔬菜丸)中硼酸的快速测定。2 原理本方法采用姜黄素比色法的原理,通过超声辅助用水提取样品中硼酸,用乙基己二醇- 三氯甲烷溶液对样品中的硼酸进行快速的富集、萃取,利用硫酸与姜黄素混合生成的质子 化姜黄与硼酸反应生成红色产物。溶液颜色的深浅与样品中硼酸的含量成正相关,通过色 阶卡进行目视比色,确定样品中硼酸的含量。 3 试剂与材料除另有规定外,本方法所用的试剂均为分析纯,水为 GB/T6682 规定的二级
2、水。3.1 试剂3.1.1 硫酸。 3.1.2 无水乙醇。 3.1.3 亚铁氰化钾。 3.1.4 乙酸锌。 3.1.5 姜黄素(CAS:458-37-7),纯度 99%。 3.1.6 冰乙酸。3.1.7 2-乙基-1,3-己二醇(色谱纯)。 3.1.8 三氯甲烷(色谱纯)。 3.1.9 硫酸溶液(1+1):取等体积的硫酸(3.1.1)与水,将硫酸缓慢加入到水中,并用 玻璃棒不断的搅拌,待冷却后装入塑料容器中。 3.1.10 亚铁氰化钾溶液:称取 10.6g 亚铁氰化钾(3.1.3),用水溶解并稀释至 100mL。 3.1.11 乙酸锌溶液:称取 22.0g 乙酸锌(3.1.4),用水溶解并稀释
3、至 100mL。3.1.12 2-乙基-1,3-己二醇-三氯甲烷溶液(EHD-CHCl3 溶液):称取 2-乙基-1,3-己二醇(3.1.7) 10.6g,用三氯甲烷(3.1.8)溶解并稀释至 100mL,此溶液保存于塑料容器中。 3.1.13 姜黄-冰乙酸溶液:称取姜黄素(3.1.5)40mg,溶于 100mL 冰乙酸(3.1.6)中,此溶液 保存于塑料容器中,该溶液需临用新制。3.2 参考物质硼酸参考物质中文名称、英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量见表 1。表 1 硼酸参考物质中文名称、英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量中午名称英文名称CAS 登录号分子式相对分子质量硼酸B
4、oric Acid10043-35-3H3BO361.83.3 标准溶液配制3.3.1 硼酸标准储备液(1000g/mL):准确称取在硫酸干燥器中干燥 5h 以上的硼酸标 准品适量,用水溶解并配制成 1000g/mL 的标准储备液,保存于塑料容器中。 3.3.2 硼酸标准溶液(100g/mL):取硼酸标准储备液 10.0mL,加水定容至 100mL,保 存于塑料容器中。所配制溶液于 04冰箱中可储存 3 个月。3.4 材料硼酸快速检测试剂盒,需在阴凉、干燥、避光条件下保存。4 仪器与设备4.1 电子天平:感量为 0.01g。4.2 样品捣碎机。4.3 超声仪。4.4 离心机:转速4000r/m
5、in。4.5 氮气吹干仪或空气吹干仪:温度控制60。4.6 涡旋振荡器。4.7 移液器:200L、1mL、10 mL。5 分析步骤5.1 试样的制备取适量样品,充分粉碎混匀。5.2 试样的提取准确称取混合均匀的试样 2g(精确至 0.1g),置于 50mL 离心管中,准确加水 7mL, 加入硫酸溶液(3.1.9)2mL,涡旋振荡提取 1min 后超声提取 15min,期间振摇 23 次, 加入 0.5mL 亚铁氰化钾溶液(3.1.10)与 0.5mL 乙酸锌溶液(3.1.11) ,混匀后于 4000r/min 离心 5min(若离心效果不佳,可适当提高离心转速),准确吸取 1.0mL 上清液于
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