保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测胶体金免疫层析法.doc
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1、0附件 3保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测胶体金免疫层析法(征求意见稿)1 范围本方法规定了保健食品中巴比妥类化学成分的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于硬胶囊、软胶囊、丸剂、片剂、散剂及口服液等保健食品中巴比妥类化 学成分的快速测定。2 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的巴比妥类化学成分经提取后与胶体金标 记的特异性抗体结合,抑制了抗体和检测线(T 线)上抗原的结合,从而致使检测线不显 色。通过检测线的显色与否判读,对样品中巴比妥类化学成分进行定性判定。3 试剂和材料除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的二级水。3.1 试剂3.1.1
2、无水乙醇。3.1.2 提取液:将无水乙醇(3.1.1)与水按照体积比 10:90 混匀。 3.1.3 甲醇。 3.2 参考物质参考物质的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子式、相对分子量见表 1,纯度95%。表 1 参考物质的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子式、相对分子量中文名称英文名称CAS 登录号分子式相对分子量巴比妥Barbital57-44-3C8H12N2O3184.19苯巴比妥Phenobarbital50-06-6C12H12N2O3232.24异戊巴比妥Amobarbital57-43-2C11H18N2O3226.27司可巴比妥钠Secobarbital76-73
3、-3C12H17N2O3238.28注:或等同可溯源物质。3.3 标准溶液的配制3.3.1 巴比妥类标准储备液(0.5 mg/mL):精密称取巴比妥(或苯巴比妥,异戊巴比妥, 司可巴比妥钠)标准品(3.2.1)适量,置于 10mL 容量瓶中,加入适量甲醇(3.1.3)超声1溶解后,用甲醇稀释至刻度,摇匀,制成浓度为 0.5mg/mL 的巴比妥类标准储备液。20 避光保存,有效期 6 个月。 3.3.2 巴比妥类标准中间液(50g/mL):精密量取巴比妥类标准储备液(0.5mg/mL) (3.3.1)1mL,置于 10mL 容量瓶中,用甲醇(3.1.3)稀释至刻度,摇匀,制成浓度为 50g/mL
4、 的巴比妥类标准中间液。3.4 材料免疫胶体金免疫层析试剂盒,适用于保健食品硬胶囊、软胶囊、丸剂、片剂、散剂及 口服液。4 仪器和设备4.1 天平:感量为 0.01 g。 4.2 涡旋混合器。 4.3 移液器:200L 4.4 离心机:转速4000r/min。 4.5 环境条件:温度 1535,湿度80%。5 分析步骤5.1 试样制备取适量样品,硬胶囊及软胶囊取内容物充分混匀,丸剂及片剂充分粉碎混匀,散剂及 口服液充分混匀。5.2 试样提取准确称取试样 2.0 g(精确至 0.01g)于 15mL 具塞离心管中,加入 10mL 提取剂 (3.1.2) 。加盖后振摇或涡旋振荡 0.5min,放置
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