残留消毒剂化学中和法的鉴定试验.docx
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1、残留消毒剂化学中和法的鉴定试验(1)目 的本鉴定试验只在确定所选中和剂是否适用于拟进行的细胞感染法病毒灭活试验。(2)试验设计原则1) 通过所设各组试验结果综合分析,应可确定所用中和剂是否对测试消毒药物有良好的中和作用,对试验用病毒和细胞株是否有害或不良影响。2) 根据试验目的,选择适宜的病毒株和细胞株。3) 中和试验用药物浓度应为正式消毒试验最高浓度。作用时间最短不得少于 30s。(3)试验分组在使用细胞感染法进行病毒灭活试验时,对所用中和剂的鉴定,应进行以下各组试验。其中,先进行预备试验中的第 1 组3 组试验,如中和剂与中和产物对细胞生长无影响,再进行以下的正式试验。预备试验:1)中和剂
2、 + 细胞 培养观察所用中和剂对细胞的生长有无影响。2)(消毒剂 + 中和剂)+ 细胞 培养观察中和产物溶液对细胞生长有无影响。3)(消毒剂 + 细胞)培养观察消毒剂对细胞生长有无影响。正式试验:1)消毒剂 + 病毒悬液 接种细胞培养观察所试消毒剂对病毒有无抑制或灭活作用。2)(消毒剂 + 病毒悬液) + 中和剂 接种细胞培养观察残留消毒剂被去除后,病毒是否可恢复对细胞的感染作用。3)中和剂 + 病毒悬液 接种细胞培养观察中和剂对病毒有无抑制作用。4)(消毒剂 + 中和剂) + 病毒悬液 接种细胞培养观察中和产物,或未被完全中和的残留消毒剂对病毒有无抑制作用或对检测方法有无干扰。5)病毒悬液
3、接种细胞培养观察病毒是否可正常生长,并将其结果作为阳性对照值。6)未接种病毒的细胞 培养观察其生长是否正常。(4)病毒悬液定量法中和剂鉴定试验操作程序根据试验分组,准备足量有关器材,依次摆放,进行编号。各组分别用适宜大小容量的无菌定量吸管按以下程序吸取或添加试剂和试验样本。各组每吸一次试剂或样本,即应更换一次吸管或微量移液器吸头,以防相互污染。1)预备试验第 1 组。 将试验用细胞,分别加入不同稀释度的中和剂溶液,作用 3 h4h 后,吸去液体,另加细胞维持培养液,置37 二氧化碳培养箱中培养。2)预备试验第 2 组。将试验用细胞, 分别加入不同稀释度中和产物溶液作用 3h4h 后,吸去中和产
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