血清甘油三酯酶试剂法测定法.doc
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1、血血清清 甘甘油油三三酯酯 酶酶试试剂剂法法 测测定定法法1 1. . 实实验验原原理理脂蛋白酯酶( LPL) 、甘油激酶( GK) 、甘油 -3-磷酸氧化酶( GPO) 、过氧化物酶 (POD)、Trinder 反应偶联比色终点法。反应式如下:LPL甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸GK甘油 + ATP 甘油 -3-磷酸 + ADPGPO甘油 -3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2POD2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O2 2. . 标标本本:2.1 病人准备: 12 小时禁食。2.2 类型:血清,肝素或EDTA 抗凝血浆。3 3.
2、 . 标标本本存存放放: 血清稳定性: 2025保存可稳定 2 天;48保存可稳定 1 周; -20保存至少可稳定1 年。4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下保存运输。5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 细菌污染的标本。6 6. . 实实验验材材料料6.1 试剂 威特曼甘油三脂试剂盒 试剂 1 试剂 2 6.1.1 试剂准备:试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存:试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6.1.4 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.9
3、5 g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2 校准品:使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7 7. . 仪仪器器 :奥林巴斯 AU2700 生化分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤8.1 项目基本参数:参见AU2700 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2 仪器操作步骤:参见AU2700 生化分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本
4、中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程 .SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品甘油三脂校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。1 12 2. . 参参考考值值范范围围 (单位: mmol/L)合适范围: 2.3mmol/L高度危险临界值: 2.34.5mmol/L高度危险范围: 4.5mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。1 13
5、 3. . 临临床床意意义义: 甘油三酯是甘油与3 个脂肪酸形成的酯,是天然脂肪中含量最多的。在血液中,甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒,运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛,以检出致动脉粥样硬化的危险;监视降脂治疗的效果。近期的研究说明,甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白(LDL)的升高,特别对发生冠心病(CHD)具有高度危险。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病有关。流行病学研究观察到,若同时出现血清甘油三酯2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)2.3mmol/L)的临床应用需结合CHD 的其他危险因子。1 14 4. . 操操作作性性能能
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