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1、 厌氧菌的基本知识 第一节 厌氧菌的分类 * 1、严格厌氧菌(、严格厌氧菌(Strick anaerobes)在超过在超过0.5%氧含量的环境下即不能生长的菌类。氧含量的环境下即不能生长的菌类。2 温和厌氧菌(温和厌氧菌(moderate anaerobes) * 在不超过在不超过3%氧的培养环境中仍能生长并且暴露在空气中一氧的培养环境中仍能生长并且暴露在空气中一 段时间(段时间(6090min)后仍能传代的菌类)后仍能传代的菌类 * 3、微厌氧菌(、微厌氧菌(Microacrophilic)3-8%含氧环境及含氧环境及10%CO2空气环境中能生长的菌类。空气环境中能生长的菌类。第二节 氧及氧
2、化作用对厌氧菌的影响* 一、缺乏细胞色素酶和细胞色素氧化酶一、缺乏细胞色素酶和细胞色素氧化酶 * 二、缺乏过氧化氢酶(二、缺乏过氧化氢酶(Catalase)和过氧化物酶)和过氧化物酶 (Peroxidose) * 三、缺乏超氧化物歧化酶(三、缺乏超氧化物歧化酶(Superxide dismutase) * 四、分子氧干扰厌氧菌的繁殖四、分子氧干扰厌氧菌的繁殖 * 五、氧化还原电势作用(五、氧化还原电势作用(Eh) * 氧化还原电势(Eh):指的是局部的氧气密度,用微伏特计:指的是局部的氧气密度,用微伏特计 量,阳性电压表示氧化环境,阴性电压为还原环境。阳性氧量,阳性电压表示氧化环境,阴性电压为
3、还原环境。阳性氧 化还原电位适宜于需氧微生物寄居,而阴性氧化还原电位则化还原电位适宜于需氧微生物寄居,而阴性氧化还原电位则 有利于厌氧微生物滋生。有利于厌氧微生物滋生。第三节 厌氧菌分离培养的方法* 一、造成厌氧环境的方法一、造成厌氧环境的方法 * 1、抽气换气法、抽气换气法 * 2、发生器法、发生器法第三节 厌氧菌分离培养的方法* 二、厌氧培养方法二、厌氧培养方法 * 1、厌氧袋法(、厌氧袋法(Bio-Bag) * 2、厌氧罐法(、厌氧罐法(Gaspak anaerobic jar) * 3、厌氧箱(、厌氧箱(Anaorobic chamber)()(golve box)三、厌氧菌分离培养的
4、操作要求三、厌氧菌分离培养的操作要求* 1、培养基、培养基 * (1)要求丰富的营养物质)要求丰富的营养物质 * (2)要求新鲜的培养基)要求新鲜的培养基2、标本收集、标本收集* 3、标本稀释、接种、培养:、标本稀释、接种、培养: * 4、鉴定:、鉴定: * (一)(一) 常规鉴定:常规鉴定: * (1 ) 观察菌落形态观察菌落形态 * (2 ) 观察菌体形态观察菌体形态 * (3 ) 分纯和耐氧试验分纯和耐氧试验 * (4 ) 生化试验生化试验 * (二)(二) 特殊鉴定特殊鉴定 * 3、鉴定要点、鉴定要点 * 分解甘露醇、山梨醇分解甘露醇、山梨醇 * 在在MSB培养基(选择)上的典型菌落培
5、养基(选择)上的典型菌落 * 粘附试验阳性粘附试验阳性第四章第四章 常见口腔厌氧菌常见口腔厌氧菌 第一节第一节 革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌 Streptococcus * Gram-positive * Spherical cells or may be oval or elongated to short rods Occur in pairs, clusters or chains * Facultatively anaerobic and capnophilic to obligately anaerobic There are now 3 groups Pyogenic strept
6、ococci Oral streptococci _ This group is divided into the S. oralis and S. mutans subgroups Other* 一一. MS菌群:过去统称为变形链球菌(菌群:过去统称为变形链球菌(S.mutans) * 1、 性状:性状:* (1)革兰氏阳性球菌,成链状(短链或长链),在)革兰氏阳性球菌,成链状(短链或长链),在MSB培培 养基(轻唾培养基)上典型的菌落为灰白或兰色,粗糙、坚养基(轻唾培养基)上典型的菌落为灰白或兰色,粗糙、坚 硬、不透明硬、不透明 、边缘不齐,能嵌入生长,菌落中央可以有圆、边缘不齐,能嵌入生
7、长,菌落中央可以有圆 形透明的多糖珠,少数菌落呈粘液型,为不规则的圆形,半形透明的多糖珠,少数菌落呈粘液型,为不规则的圆形,半 透明如粘液样。变链在含有蔗糖的液体培养基内生长,可以透明如粘液样。变链在含有蔗糖的液体培养基内生长,可以 附着在试管壁上。附着在试管壁上。(2)营养要求高,在微氧、厌氧环境中生长(在微)营养要求高,在微氧、厌氧环境中生长(在微 氧环境中生长更好),不溶血或不完全溶血(氧环境中生长更好),不溶血或不完全溶血(-溶血)。溶血)。(3)能分解甘露醇、山梨醇,能将蔗糖合成葡聚糖)能分解甘露醇、山梨醇,能将蔗糖合成葡聚糖 (glucan)3、鉴定要点、鉴定要点在在MSB培养基(
8、选择)上的典型菌落培养基(选择)上的典型菌落 分解甘露醇、山梨醇分解甘露醇、山梨醇 粘附试验阳性粘附试验阳性4、变链的生态学:、变链的生态学: 变链在口腔中仅存活在硬组织的表面,有如下特征:变链在口腔中仅存活在硬组织的表面,有如下特征: (1)它可以蔗糖合成不溶性多糖)它可以蔗糖合成不溶性多糖 (2)它是同型发酵乳酸型)它是同型发酵乳酸型 (3)它可移植于牙面)它可移植于牙面 (4)它比其他链球菌更为耐酸)它比其他链球菌更为耐酸* (5)、致病作用:)、致病作用: * 变链是龋病的主要致病菌,其致龋株含有溶原性噬菌体,致变链是龋病的主要致病菌,其致龋株含有溶原性噬菌体,致 病能力在于能利用蔗糖
9、合成细胞外多糖,粘附于牙齿表面,病能力在于能利用蔗糖合成细胞外多糖,粘附于牙齿表面,参与菌斑的形成,同时产酸使牙齿表面脱矿而引起龋病。当参与菌斑的形成,同时产酸使牙齿表面脱矿而引起龋病。当 此菌超过一定数量此菌超过一定数量4105,即有致龋的可能,所以,临床上,即有致龋的可能,所以,临床上 常以其为指示菌预防检查龋的活动性。常以其为指示菌预防检查龋的活动性。 (6)、变链菌群的敏感药物及影响其附着的物质:)、变链菌群的敏感药物及影响其附着的物质:* 药物:洗必肽、氯化钠、单氟磷酸钠、氟化铵银、厚朴、黄药物:洗必肽、氯化钠、单氟磷酸钠、氟化铵银、厚朴、黄 连、黄柏、金银花、茶叶;连、黄柏、金银花
10、、茶叶; * 影响附着:葡聚糖酶、果脯糖影响附着:葡聚糖酶、果脯糖 二、其他微厌氧链球菌二、其他微厌氧链球菌 * 1、 血链球菌(血链球菌(S.sanguis ):): * 菌体为圆形或卵圆形,在液体培养基中生长链状,菌体为圆形或卵圆形,在液体培养基中生长链状,0.8 1.2um ,在,在MS 培养基上呈粗糙、高凸、坚实、表面如霜玻培养基上呈粗糙、高凸、坚实、表面如霜玻 璃样,有时可见多糖水珠,边缘不规则,色灰蓝,嵌入琼脂,璃样,有时可见多糖水珠,边缘不规则,色灰蓝,嵌入琼脂, 在牙菌斑中占优势,约占菌斑链球菌的在牙菌斑中占优势,约占菌斑链球菌的1/2 ,还可引起细菌,还可引起细菌 性亚急性心
11、内膜炎。性亚急性心内膜炎。 2、 唾液链球菌(唾液链球菌(S.Salivarius):):* 菌体为圆形或卵圆形,短链或长链。菌体为圆形或卵圆形,短链或长链。 * 3、 轻链球菌(轻链球菌(S.Mitis ):): * 菌体为圆形或卵圆形,在牙菌斑中所占比例较高。菌体为圆形或卵圆形,在牙菌斑中所占比例较高。 4、 S.Milleri* 在在MS培养基上的菌落形态呈花瓣样、淡兰色,多见于龈沟培养基上的菌落形态呈花瓣样、淡兰色,多见于龈沟 龈上菌斑。龈上菌斑。 三、专性厌氧链球菌三、专性厌氧链球菌 * 1、 消化链球菌属(消化链球菌属(Peptostreptocus ):): * 菌体为革兰氏阳性
12、,常由于拔牙进入血循环引起细菌性亚菌体为革兰氏阳性,常由于拔牙进入血循环引起细菌性亚急性心内膜炎。急性心内膜炎。 * 2 、 消化球菌属(消化球菌属(Peptoccus ):): * 革兰氏阳性,为条件致病菌。革兰氏阳性,为条件致病菌。 * 四、葡萄球菌(四、葡萄球菌(Staphylococcus):): * 兼性厌氧,革兰氏阳性,排列不规则,堆聚呈葡萄串状,可兼性厌氧,革兰氏阳性,排列不规则,堆聚呈葡萄串状,可 由粘膜损伤而引起葡萄球菌性口炎,也可引起混合化脓性感由粘膜损伤而引起葡萄球菌性口炎,也可引起混合化脓性感 染,与链球菌等侵入根尖周围引起牙槽脓肿,蜂窝织炎及间染,与链球菌等侵入根尖周
13、围引起牙槽脓肿,蜂窝织炎及间 隙感染,与手术创伤感染也有一定的关系。隙感染,与手术创伤感染也有一定的关系。 第二节 革兰氏阴性球菌 * 一、韦荣氏菌属(一、韦荣氏菌属(Veillnella):正常存在于口腔内主要是三):正常存在于口腔内主要是三 个菌种个菌种-小韦荣氏菌(小韦荣氏菌(V.Parrula),不典型韦荣氏菌),不典型韦荣氏菌 (V.Atypica),特殊韦荣氏菌(种)(),特殊韦荣氏菌(种)(V.Dispar)。)。 * * 二、奈瑟氏菌二、奈瑟氏菌(Neisseria):): * 分布于口腔的唇舌、颊部、菌斑及唾液中,为兼性厌氧。分布于口腔的唇舌、颊部、菌斑及唾液中,为兼性厌氧。
14、 * 韦荣氏菌属韦荣氏菌属 * 1、 性状:性状:为专性厌氧菌,生长需要中间代谢产物如乳酸盐为专性厌氧菌,生长需要中间代谢产物如乳酸盐 (lactate)、丙酮酸盐()、丙酮酸盐(pyrurate)、苹果酸盐()、苹果酸盐(malate)、)、 延胡索酸盐(延胡索酸盐(fumarate)。)。 * 2、 致病性:致病性:可以产生内毒素,典型的脂多糖,有抗原性,大部分构成可以产生内毒素,典型的脂多糖,有抗原性,大部分构成 混合性感染,致病力弱。韦荣氏菌在牙菌斑的生态系中和龋混合性感染,致病力弱。韦荣氏菌在牙菌斑的生态系中和龋 病的病原学中起重要作用,除甲酸以外,乳酸属口腔细菌产病的病原学中起重要
15、作用,除甲酸以外,乳酸属口腔细菌产 生的最强酸,因而参与牙釉质的溶解,而菌斑中的韦荣氏菌生的最强酸,因而参与牙釉质的溶解,而菌斑中的韦荣氏菌 能代谢乳酸使之转为弱酸范围,主要为丙酸,从而减少变链能代谢乳酸使之转为弱酸范围,主要为丙酸,从而减少变链 菌的致龋作用。菌的致龋作用。 第三节 革兰氏阳性杆菌 * 一、乳酸杆菌属(一、乳酸杆菌属(Lactobacillus):因发酵糖产生大量乳酸):因发酵糖产生大量乳酸而命名,共而命名,共25个菌种。个菌种。 * 二、放线菌(二、放线菌(Actinomyces) :主要存在于龈袋(龈上、龈:主要存在于龈袋(龈上、龈 下)和牙菌斑内、根管内,下)和牙菌斑内
16、、根管内, * 三、其他:双歧杆菌属(三、其他:双歧杆菌属(Bifidobacterium) 丙酸杆菌属(丙酸杆菌属(Propionibacterium)真杆菌属()真杆菌属(Fubacterium) 丙酸蛛网菌属(丙酸蛛网菌属(Arochinia propionia) 一、乳酸杆菌属(一、乳酸杆菌属(Lactobacillus):): * 1、性状:、性状: * (1) 革兰氏阳性,无动力,无芽孢杆菌革兰氏阳性,无动力,无芽孢杆菌 * (2 ) 主要是微厌氧菌,在厌氧环境中也能生长,嗜酸主要是微厌氧菌,在厌氧环境中也能生长,嗜酸 性,最适性,最适PH5.5-6.0 ,PH3.0-4.5 环境
17、中也能生长环境中也能生长 * (3 ) 生化反应:根据对葡萄糖发酵不同可将其分为同生化反应:根据对葡萄糖发酵不同可将其分为同 型发酵型及异型发酵型,前者主要产生乳酸(约型发酵型及异型发酵型,前者主要产生乳酸(约65% ),), 后者产生乳酸少(小于后者产生乳酸少(小于65% ) * 2. 与人的关系:与人的关系: * 乳杆菌在人类口腔中的移植规律为出生乳杆菌在人类口腔中的移植规律为出生2岁时仅暂时存在于岁时仅暂时存在于 口腔中且数量很少,为中嗜酸性,乳酪乳酸杆菌的一些种,口腔中且数量很少,为中嗜酸性,乳酪乳酸杆菌的一些种, 在菌斑(龋洞处)能产生大量的酸,使在菌斑(龋洞处)能产生大量的酸,使P
18、H下降,牙齿脱钙,下降,牙齿脱钙, 促进龋齿的产生和发展。龋齿的活动状态与唾液乳酸杆菌计促进龋齿的产生和发展。龋齿的活动状态与唾液乳酸杆菌计 数之间有明确的相互关系,在龋蚀的牙本质菌丛中此菌占较数之间有明确的相互关系,在龋蚀的牙本质菌丛中此菌占较 多的比例。多的比例。 二二.放线菌(放线菌(Actinomyces)* 主要有主要有伊氏放线菌(伊氏放线菌(A.israelii)内氏放线菌(内氏放线菌(A.naeslundii)龋齿放线菌(龋齿放线菌(A.odontolyticus)粘性放线菌(粘性放线菌(A.viscosus)麦氏放线菌(麦氏放线菌(A.mgeri)牛型放线菌(牛型放线菌(A.b
19、ovis) * 1、性状:、性状:革兰氏阳性杆菌,革兰氏阳性杆菌,A.a菌体是棒状,常为多型性,菌体是棒状,常为多型性, 可在厌氧、可在厌氧、 微厌氧环境中生长。微厌氧环境中生长。* 2、致病性:、致病性: * 伊氏放线菌常引起颌部放线菌病,颌面部术后感染,其特征伊氏放线菌常引起颌部放线菌病,颌面部术后感染,其特征 为慢性肉芽肿、化脓,皮肤出现窦道,并有黄色的为慢性肉芽肿、化脓,皮肤出现窦道,并有黄色的“硫磺颗硫磺颗 粒粒”随分泌物排出,颗粒中有许多放线菌菌丝。从持久感染随分泌物排出,颗粒中有许多放线菌菌丝。从持久感染 的根管中可分离出伊氏菌,而且根尖肉芽肿组织中存在伊氏的根管中可分离出伊氏菌
20、,而且根尖肉芽肿组织中存在伊氏 菌,因此,其与根尖放线病有关。内氏菌在幼儿口腔中占优菌,因此,其与根尖放线病有关。内氏菌在幼儿口腔中占优 势,粘放菌的比例随年龄而递增,在青少年(势,粘放菌的比例随年龄而递增,在青少年(13-19岁)和岁)和 成年人牙菌斑中占优势。内氏菌在舌颊部占多数。粘放菌比成年人牙菌斑中占优势。内氏菌在舌颊部占多数。粘放菌比 内氏菌易移植于干净的牙面上,对牙齿的亲和力较强,在人内氏菌易移植于干净的牙面上,对牙齿的亲和力较强,在人 类的牙石及根面龋中常分离到粘放菌,牙龈炎、牙周炎的病类的牙石及根面龋中常分离到粘放菌,牙龈炎、牙周炎的病 灶中常分离到粘放菌和内氏菌。灶中常分离到
21、粘放菌和内氏菌。 第四节 革兰氏阴性杆菌* 一、类杆菌属(一、类杆菌属(Bacteroides)为革兰氏阴性、专性厌氧、无动力、无芽孢杆菌。为革兰氏阴性、专性厌氧、无动力、无芽孢杆菌。 * 二、放线共生放线杆菌(二、放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetem comitans) * 三、嗜二氧化碳菌属(三、嗜二氧化碳菌属(Capnocytophaga)分为分为3个种:个种:黄褐二氧化碳嗜纤维菌(黄褐二氧化碳嗜纤维菌(C.oohraciea) 生痰二氧化碳嗜纤维菌(生痰二氧化碳嗜纤维菌(C.sputigena)牙龈二氧化碳嗜纤维菌(牙龈二氧化碳嗜纤维菌(C.gin
22、gialis) * 四、梭形杆菌属(四、梭形杆菌属(Fusobasterium) * 五、其他与口腔感染有关的革兰氏阴性杆菌五、其他与口腔感染有关的革兰氏阴性杆菌一、类杆菌属(一、类杆菌属(Bacteroides)1.分类:牙龈紫质单胞菌分类:牙龈紫质单胞菌(Porphyromanus gingivalis)-牙龈牙龈 类杆菌(类杆菌(B.gingivalis)- 人口内、动物人口内、动物牙髓紫质单胞菌(牙髓紫质单胞菌(Porphyromanus endodontalis)-牙髓类杆牙髓类杆 菌(菌(B.endodontalis)-口内固有、牙髓腔内口内固有、牙髓腔内不解糖类杆菌(不解糖类杆菌
23、(B.asaccharolyticus)-不解糖紫质单胞菌不解糖紫质单胞菌 (P.asacchrolyticus)-口腔、全身口腔、全身产黑色素普氏菌(产黑色素普氏菌( )产黑色素类杆菌)产黑色素类杆菌 (B.melaninogenieus)-口内口外口内口外小齿类杆菌(小齿类杆菌(B.denticola)-口内口外口内口外* 颗氏类杆菌(颗氏类杆菌(B.loescheii)-口内口外口内口外* 中间型类杆菌(中间型类杆菌(B.intermedius)-口内口外口内口外* 躯体类杆菌(躯体类杆菌(B.coporis)-口内口外口内口外* 莱氏类杆菌(莱氏类杆菌(B.lerii)-动物动物* 恒
24、猕猴类杆菌(恒猕猴类杆菌(B.macacal)Human Black-Pigmenting Anaerobic Rods* Prevotella * melaninogenicaNo disease * loescheii No disease *denticola No disease *intermediaGingivitis, ANUG, Periodontitis *nigrescensEndodontic infections *corporisEndodontic infections *pallens? (newly isolated) Human Black-Pigmentin
25、g Anaerobic Rods* Porphyromonas *asaccharolytica No disease *levii No disease *endodontalisEndodontic infections *gingivalis Periodontal disease *catoniae? (newly isolated)2、性状:、性状: 革兰氏阴性杆菌,专性厌氧革兰氏阴性杆菌,专性厌氧* 3、致病性:、致病性: * (1)可以引起全身的化脓性感染)可以引起全身的化脓性感染 * (2)与口腔疾病)与口腔疾病-牙周及牙髓的感染有着密切的关系牙周及牙髓的感染有着密切的关系 *
26、 牙龈紫质单胞菌牙龈紫质单胞菌-是成年人牙周炎的重要致病菌之是成年人牙周炎的重要致病菌之 一,具有多种致病因素:一,具有多种致病因素: * a 荚膜荚膜-抗白细胞吞噬抗白细胞吞噬 * b 表面菌毛结构表面菌毛结构-对细胞有强的吸附力对细胞有强的吸附力 * c 毒素毒素-主要是内毒素(脂多糖)主要是内毒素(脂多糖)-刺激破骨细胞,刺激破骨细胞,促进骨质吸收促进骨质吸收 * d 破坏牙周组织的各种酶破坏牙周组织的各种酶-纤维蛋白酶、胶原酶、蛋白纤维蛋白酶、胶原酶、蛋白 水解酶(水解酶(IgA、IgG、补体水解酶)使牙周纤维组织溶解,、补体水解酶)使牙周纤维组织溶解, 附着丧失,磷酸脂酶促进骨吸收,
27、胰蛋白酶和氨基肽酶分解附着丧失,磷酸脂酶促进骨吸收,胰蛋白酶和氨基肽酶分解 组织蛋白组织蛋白 二、放线共生放线杆菌(二、放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetem comitans)* 1、性状:、性状:A.a * 革兰氏阴性小杆菌,在厌氧、微氧中及含革兰氏阴性小杆菌,在厌氧、微氧中及含5-10%二氧化碳的二氧化碳的 氮气中生长,有氮气中生长,有3个血清型个血清型-a、b、c。 * 2、致病性:、致病性: * (1)降低宿主抵抗力:)降低宿主抵抗力:a 白细胞毒素白细胞毒素 b PMN趋化抑制因趋化抑制因 子子 c 淋巴细胞抑制因子淋巴细胞抑制因子 d 杀上皮毒
28、素杀上皮毒素 * (2)骨吸收因子:)骨吸收因子:a LPS b 非非LPS骨吸收因子骨吸收因子 c 荚膜荚膜 * (3)组织破坏因子:)组织破坏因子:a 成纤维细胞抑制因子成纤维细胞抑制因子 b 胶原酶毒性因子胶原酶毒性因子 c 内毒素(脂多糖)内毒素(脂多糖)-破坏牙周组破坏牙周组 织织 d白细胞毒素白细胞毒素-破坏多形核白细胞,在全身引起心内膜破坏多形核白细胞,在全身引起心内膜 炎。炎。- 目前认为它是青少年牙周炎的主要致病菌目前认为它是青少年牙周炎的主要致病菌,属嗜血杆属嗜血杆 菌属菌属,改称放线共生嗜血杆菌改称放线共生嗜血杆菌(伴放线嗜血杆菌伴放线嗜血杆菌) (Haemophilus
29、 actinomycetem comitans)。三、嗜二氧化碳菌属(三、嗜二氧化碳菌属(Capnocytophaga)* 1、性状:革兰氏阴性杆菌,菌体为长杆状,似梭形,两端、性状:革兰氏阴性杆菌,菌体为长杆状,似梭形,两端稍钝,生长要求二氧化碳环境稍钝,生长要求二氧化碳环境-5-10%二氧化碳二氧化碳 * 2、致病性:、致病性: * 内毒素内毒素-抑制人的纤维母细胞增殖,使白细胞的游走性减抑制人的纤维母细胞增殖,使白细胞的游走性减 弱及形态异常。弱及形态异常。 * 该菌与青少年牙周炎有密切关系,其中以生痰二氧化碳嗜纤该菌与青少年牙周炎有密切关系,其中以生痰二氧化碳嗜纤 维菌在牙周炎病因学上
30、意义最大。维菌在牙周炎病因学上意义最大。 四、梭形杆菌属(四、梭形杆菌属(Fusobasterium) * 1、性状:、性状:革兰氏阴性菌,专性厌氧。革兰氏阴性菌,专性厌氧。 * 2、致病性:、致病性:在口腔坏疽性疾病中为主要病原。在口腔坏疽性疾病中为主要病原。具核梭杆菌(具核梭杆菌(F.nucleatum)革兰氏阴性菌,梭形核杆菌,)革兰氏阴性菌,梭形核杆菌, 专性厌氧,培养物有特殊的专性厌氧,培养物有特殊的“恶臭味恶臭味”,是牙周病龈下菌丛的,是牙周病龈下菌丛的 优势菌。优势菌。 五、其他与口腔感染有关的革兰氏阴性杆菌五、其他与口腔感染有关的革兰氏阴性杆菌 * 1、侵蚀艾肯氏菌(、侵蚀艾肯
31、氏菌(Eikenella corrodens) * 革兰氏阴性,兼性厌氧杆菌,是人口腔、上呼吸道和肠道的革兰氏阴性,兼性厌氧杆菌,是人口腔、上呼吸道和肠道的 正常菌群,在牙周病损害部位检出率高。正常菌群,在牙周病损害部位检出率高。 * 2、沃廉氏菌属(、沃廉氏菌属(Wolinella) * 有有2个种:个种: * 产琥珀酸沃廉氏菌属(产琥珀酸沃廉氏菌属(W.succinogenes) * 直肠沃廉氏菌属(直肠沃廉氏菌属(W.recta) * 为革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,极生鞭毛,具有震颤运动性,为革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,极生鞭毛,具有震颤运动性, 严格厌氧,在成年性牙周炎齿槽骨丧失的牙周部位
32、及牙周炎严格厌氧,在成年性牙周炎齿槽骨丧失的牙周部位及牙周炎 活动区检出率较高。活动区检出率较高。 第五节 与口腔疾病有关的其他微生物* 一、螺旋体一、螺旋体(Oral spirochetes) * 主要寄居在牙龈沟内及牙邻面区,可与梭形杆菌共同形成病主要寄居在牙龈沟内及牙邻面区,可与梭形杆菌共同形成病 原微生物而引起口腔感染,与进行性牙周炎关系密切,在口原微生物而引起口腔感染,与进行性牙周炎关系密切,在口 腔中有以下几种:腔中有以下几种:* 包柔氏奋森氏螺旋体(包柔氏奋森氏螺旋体(T.Borrelia Vinentil) * 大牙密螺旋体大牙密螺旋体(T.mucrodentinrm) * 小
33、牙密螺旋体小牙密螺旋体(T.microdentinum) * 蚀疮溃疡螺旋体(蚀疮溃疡螺旋体(T.phagedenis) * 折光螺旋体(折光螺旋体(T.refingens) * 口腔螺旋体(口腔螺旋体(T.orale)二、支原菌属(二、支原菌属(Mycoplasma) * 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,呈高度多形支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,呈高度多形 性,一般为大菌落,性,一般为大菌落,100300nm,菌落形似煎荷包蛋,也,菌落形似煎荷包蛋,也 有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。 * 它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普
34、通染色法不易着它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着 色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚 绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。 * 支原体兼性厌氧,在支原体兼性厌氧,在5%10%CO2、80%90%湿度的条湿度的条 件下,生长较好,支原体细胞中的主要成分胆固醇及蛋白质件下,生长较好,支原体细胞中的主要成分胆固醇及蛋白质 均来自培养基。生长需均来自培养基。生长需714d. 二、支原菌属(二、支原菌属(Mycoplasma) * 目前已知的支原体有目前已知
35、的支原体有80多种,人体支原体十几种,唾液支原多种,人体支原体十几种,唾液支原 体和口腔支原体(体和口腔支原体(M.orale)、是上呼吸道常居菌)、是上呼吸道常居菌 * 为口腔固有菌,可从菌斑、牙石、感染根管、龋病、牙周疾为口腔固有菌,可从菌斑、牙石、感染根管、龋病、牙周疾 病中分离出。病中分离出。 三、酵母三、酵母(Yests)* 为口腔常住菌为口腔常住菌,其中最常见的是白色念珠菌其中最常见的是白色念珠菌(Candida albicaus),),唾液的唾液的pH和酵母带菌率有关和酵母带菌率有关,pH越低则带菌越低则带菌 率越高。白念是一种小而椭圆、芽生、薄壁酵母样细胞,有率越高。白念是一种
36、小而椭圆、芽生、薄壁酵母样细胞,有 假菌丝,革兰氏染色阳性,直接涂片可见厚膜孢子及芽生孢假菌丝,革兰氏染色阳性,直接涂片可见厚膜孢子及芽生孢 子,可引起雪口、抗菌素性口炎,义齿性口炎、口角炎等,子,可引起雪口、抗菌素性口炎,义齿性口炎、口角炎等, 此外,白斑癌变中白念的作用已引起重视。此外,白斑癌变中白念的作用已引起重视。四四口腔毛滴虫口腔毛滴虫 (Trichomonas tenax Muller) * 口腔毛滴虫口腔毛滴虫(Trichomonas tenax Muller, 1773)寄生于人体寄生于人体 口腔口腔,定居于齿龈脓溢袋和扁桃体隐窝内定居于齿龈脓溢袋和扁桃体隐窝内,常与齿槽化脓同
37、常与齿槽化脓同 时存在。生活史仅有滋养体阶段,外形似阴道毛滴虫,呈梨时存在。生活史仅有滋养体阶段,外形似阴道毛滴虫,呈梨 状,有状,有4根前鞭毛和根前鞭毛和1根无游离端的后鞭毛,波动膜稍长于阴根无游离端的后鞭毛,波动膜稍长于阴 道毛滴虫,核单个,位于虫体前部中央,含丰富染色质粒,道毛滴虫,核单个,位于虫体前部中央,含丰富染色质粒, 轴柱较纤细,沿虫体末端伸出,以纵二分裂法繁殖。轴柱较纤细,沿虫体末端伸出,以纵二分裂法繁殖。 T.tenax 四四口腔毛滴虫口腔毛滴虫 (Trichomonas tenax Muller * 口腔共栖性原虫,是否致病尚无定论。据文献资料认为与牙口腔共栖性原虫,是否致
38、病尚无定论。据文献资料认为与牙 龈炎、牙周炎、单纯龋齿、冠周炎等有关,曾有呼吸道感染龈炎、牙周炎、单纯龋齿、冠周炎等有关,曾有呼吸道感染 及扁桃体陷窝内查见本虫报告。实验诊断可用牙龈刮拭物作及扁桃体陷窝内查见本虫报告。实验诊断可用牙龈刮拭物作 生理盐水涂片镜检或作培养。滋养体对外环境抵抗力较大,生理盐水涂片镜检或作培养。滋养体对外环境抵抗力较大, 在室温下可生存在室温下可生存36天,借飞沫或污染的食物、餐具间接传天,借飞沫或污染的食物、餐具间接传 播。播。 * 接吻是本虫的直接传播方式;也可通过飞沫、食物、餐具等接吻是本虫的直接传播方式;也可通过飞沫、食物、餐具等 传播。平时注意口腔卫生是预防
39、本虫感染的最有效方法。传播。平时注意口腔卫生是预防本虫感染的最有效方法。 五、口腔龈阿米巴五、口腔龈阿米巴第五章第五章 菌斑菌斑 第一节 菌斑的化学成分菌斑的化学成分 *菌斑由细胞和非细胞成分组成,其中 20%为固体,80%均 是水分,在固体物质中 45%为蛋白质,15%为糖,12%为脂肪。第二节第二节 菌斑形成菌斑形成*一、附着机制: *1、口腔内一些菌利用口腔内存在的蔗糖,通过葡糖基转 移酶(GTF,glucosytransferase)作用产生葡聚糖,与牙体 表面获得性膜附着,并且又不断的吸附其他细菌等物质而形成 菌斑(plaque)。 *2、有的细菌具有绒毛外膜,使细菌吸附于牙面。 *
40、3、静电作用:细菌在一般情况下带负电荷,彼此之间以 钙桥方式结合。 *4、口腔中某些细菌可合成胞外多糖,与牙面以氢键连接 介导某些细菌粘附。 *细菌的凝聚作用:唾液中的凝集素、特异性抗体与非特 异性糖蛋白凝固因子,由唾液介导使细菌凝集。 *二、菌斑形成的过程 1 获得性膜的形成(acdquiredpellicle ): 获得性膜定义:指唾液成分在牙体表面沉积而形成的一层1-10微米厚、结 构均匀、 无细胞成分的薄膜。在几秒中内可以形成,1-2小时 迅速增厚后趋缓。获得性薄膜是细菌附着的必须条件。 获得性膜的构成获得性膜的构成: : 二、菌斑形成的过程2、细菌附着-菌斑的形成 3、菌斑成熟三、菌
41、斑形成的影响因素:*(1) 口腔咀嚼动作、舌运动,使菌斑不易积聚。*(2) 唾液粘稠度小,则菌斑不易堆积。 *(3) 饮食-纤维素食物-则菌斑少;食 物含蔗糖量多,则菌斑增加。 *(4) 口腔卫生、刷牙方法正确、坚持刷牙则菌 斑少。 *用药:药物牙膏-抑菌,菌斑减少;应用药物漱口 剂,则菌斑减少 第三节、菌斑分类第三节、菌斑分类 *二、龈下菌斑(Subgingival plaque):位于龈缘下,受多种因素影响: *1、 在龈沟内使菌斑免受口腔清洁活动(刷牙、唾液 冲洗及吞噬作用)。 *2 、独特的生理条件:龈缘处的菌斑妨碍龈沟液向外流动和上皮细胞向外移出,同时能封锁唾液进入龈沟,造成氧化 还
42、原电位降低,形成相对缺氧环境。 可分为: *1、 附着性龈下菌斑: * 位于龈沟和牙周袋内,直接附着于牙面或牙结石表面的 菌斑,以 G+ 杆菌、球菌、丝状菌为主。 *2 、 非附着性龈下菌斑: * 为不直接附着于牙面的龈下菌斑,主要是革兰氏阴性菌 和能动型细菌,生活于附着性菌斑的外表面和龈沟上皮之间, 与结合上皮和龈沟上皮直接接触,菌体本身或代谢产物可直接 侵入到上皮下结缔组织,造成损伤。 第六章、龋齿的细菌学第六章、龋齿的细菌学 *龋齿是细菌引起的感染性疾病,属于内源性感染,在其 四大病因-微生物、食物、宿主、时间中,菌斑内细菌是最 主要的因素。*微生物在龋齿发生的病因学上的根据是: *1、
43、 无菌鼠+蔗糖+链球菌致龋 *2、 无菌鼠+蔗糖不致龋 *3、 用抗生素喂养动物则不发生龋或龋产生的范围减少, 程度减轻 *4、 未萌出的牙不产生龋齿,但同一牙暴露于口腔微生 物丛时则形成龋齿 *5、 口腔细菌能在试管内使釉质和牙本质脱钙,并发生 龋状病变 *6.组织学证明微生物侵入龋齿釉质及牙本质,能从龋齿 病变中分离培养出来 一、 对龋齿的认识*脱钙是龋齿发生的主要阶段,产酸菌可引起脱钙,乳酸 杆菌不是唯一产生乳酸的微生物,其作用主要有以下几方面: *1、 在有龋者(早、晚期龋)唾液及菌斑中一般都有乳 酸杆菌 *2、 乳酸杆菌在菌斑及釉质表面所占比例增加则龋齿病 变发展 *3、 在肉眼可见
44、龋齿出现前的 36 个月,唾液中乳酸 杆菌增加 一、 对龋齿的认识 *4、 当龋齿病变数目及大小增加时乳酸杆菌增加,而龋 洞充填后乳酸杆菌减少 *5、 龋易感性增加时乳酸杆菌增加 *6、 摄入氟降低至一定程度时,唾液中乳酸杆菌及龋的 活动性均增加 *7、精制糖类食物摄入量增加时,可在牙釉质表面发现乳 酸杆菌,在其接触部位的牙面产生和 自然龋相似的病变 纵向研究患龋率高的口腔中S.Mutans和Lactobacilli比例增高,在 有活动性龋的口腔中80%有变链,在龋齿发生前变链即可增多, 而乳酸杆菌在龋发生时增多,因此认为引起龋齿的细菌和使龋 病发展的微生物是不同的。 *动物实验证明: *MS
45、 的作用与感染牙的部位、Eh 有关。二、与龋齿有关的口腔微生物的测定 1、窝沟裂隙龋:主要微生物有-变链、唾链、血链等。*2、光滑面龋:变链是最重要的一种微生物。 *3、牙本质深龋:乳酸杆菌为优势菌。 *4、根面龋:根部表面受菌斑及衍生物的侵入的一种缓 和的 进行性病变,主要致病菌是粘性放线菌。三、致龋过程 1、附着: *(1)细菌细胞壁上的带阳离子的受体与沉积在牙面上的 含粘蛋白的获得性膜上的侧方基通过 Ca+附着。 *(2)通过细菌产生粘性的粘肽物质、不溶性葡聚糖,促 使菌体粘附到牙齿硬组织表面,促进菌斑形成。 *(3)变链的细胞壁上含有脂磷壁酸,对羟磷灰石具有高 度的亲和力,且能在葡糖基
46、转移酶聚集和结合到细菌表面等过 程中起作用。 * 三、致龋过程 *2、变链对蔗糖的利用: *(1)合成胞外多糖: *葡聚糖(gluan) *果聚糖(frutan) *(2)合成胞内多糖:利用无氧酵解途径发酵产酸。 *糖的分解代谢: 3、致龋过程(1)大量变链或中等的变链和乳酸杆菌加少量的韦荣 氏菌吸附牙面形成菌斑。*(2)细菌产生的不溶性葡聚糖等使菌斑形成,细菌不断 吸附,菌斑增厚。 *(3)菌斑内细菌代谢产物增加酸性物质增加pH5.5 以下脱钙,龋形成。 牙菌斑致龋必须具备的2个条件*(1) 牙菌斑内含有大量在短时间内能产生高浓度酸的细 菌 *(2) 物质通过菌斑基质的扩散相当缓慢,菌斑内的
47、酸通 过相当长时间才扩散到外环境。StephanStephan 曲线(曲线( A A plotplot ofof thethe pHpH ofof plaqueplaquebeforebefore andand afterafter a a glucoseglucose mouthmouth rinse.rinse. )(1)the(1)the pHpH dropsdrops duedue toto acidacid producedproduced byby bacteriabacteria ferment-ferment-inging thethe sucrose.sucrose. AtAt a a pHpH ofof 5.35.3enamelbeginsenamelbegins toto dissolve.dissolve. (2)(2) thethe PHPH risesrises duedue toto thethebufferingbuffering actionaction ofof plaqueplaque andand saliva.saliva. (3)one(3)one sideside ofof thethe archarch isis brushedbrushed andand thethe pHpH risesrise
限制150内