中文说明书 UNIONHONEST.doc
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1、 SYSTEMS 中文说明书 UNIONHONEST酶联免疫吸附测试 Enzyme linked lmmunosorbent Assay _鸡(鸡(Chicken)白介素)白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒检测试剂盒本试剂仅供研究使用 试验原理试验原理:IL-1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-1浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-1的浓度呈比例关系。试剂盒
2、内容及其配制试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:200pg/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗IL-1抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自备材料自备材料:1. 蒸馏水。2
3、. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3. 振荡器及磁力搅拌器等。4.样品收集、处理及保存方法样品收集、处理及保存方法:1、 血清操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液1000g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。1000g离心10分钟,取上清液。5、 保存如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用
4、溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在 37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。操作注意事项操作注意事项: 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用
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