D二聚体检测作业指导书.doc
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1、D二聚体检测作业指导书1. 原理D-二聚体单一试剂盒应用免疫渗滤法原理进行检测将血浆加入反应板孔内,样品被吸收,D-Dimer分子由包被D-Dimer单克隆抗体的膜捕获,然后加入D-Dimer单克隆抗体与胶体金的缀合物溶液,膜中D-Dimer将与胶体金抗体发生结合反应,形成三明治嵌合体,过剩金标抗体用洗涤液洗去,用NycoCardREADERII金标定量仪检测膜是哪个红色强度,色泽强度也可用比色卡进行评价,红色强度与D-Dimer得浓度成正比例。2. 标本采集:2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。2.2 标本种类:血浆2.3标本要求:使用0.11或者0.13M的柠檬酸钠抗凝剂与静脉血1:
2、9进行抗凝。2000g离心标本15分钟。3. 标本储存:待测血浆室温下储存不超过4小时,4不超过8小时,-20不超过一个月。4. 标本运输:室温运输。5. 标本拒收标准:凝集、溶血、脂血和细菌污染标本不能作测定。6. 试剂6.1 试剂名称:D二聚体检测试剂盒 6.2 试剂生产厂家:武汉生泰祥科贸有限公司6.3 包装规格:24人份6.4 试剂组成:6.4.1 反应板(TD):1*24块6.4.2 胶体金缀合物(R1):1*2.0ml6.4.3 洗涤液(R2):1*0.7ml6.4.4 阳性指控品:1*1.0ml6.5 试剂储存条件及有效期:保存于28,保存到有效期。7. 操作步骤:7.1 预洗涤
3、:吸取50ul洗涤液R2加入反应板内,使洗涤液侵润反应板。7.2 加样:向反应孔加入50ul未稀释的柠檬酸盐抗凝的无血小板血浆标本或指控品,样品应在50秒内吸入膜内。7.3 加金标抗体:向反应孔加入50ul金标抗体R1,加入前须将此瓶颠倒两次使其混匀,应在50秒内吸入膜内。7.4 洗涤:用加样器吸取50ul洗涤液R2加入反应孔中。9. 参考范围:正常值小于0.3mg/l 临界值为0.3mg/l10. 质量控制:每次试验均应设阴性和阳性对照,其结果应与预期相符。11. 临床意义:11.1 高凝状态,血栓性疾病和DIC时,血浆D-二聚体明显升高,是诊断DIC的重要依据。11.2 D-二聚体在继发性纤溶症时升高,而在原发性纤溶症时正常,这是鉴别两者的重要依据。12. 操作性能:快捷简便、灵敏度0.225g/ml,重复性好,特异性高。13. 方法局限性:13.1 D-二聚体阴性不能完全排除栓塞的存在。13.2 正常水平的D-二聚体偶尔会出现非特异性凝集。13.3 EDTA抗凝血储存超过4个小时,将会出现非特异性凝集。14. 注意事项:14.1 脂血或者有微生物污染都有可能造成非特异性凝集。14.2 2分钟内观察结果。14.3 试剂和对照中含叠氮钠,勿触及皮肤和粘膜。
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