沙眼衣原体核酸扩增荧光检测作业指导书.doc
《沙眼衣原体核酸扩增荧光检测作业指导书.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《沙眼衣原体核酸扩增荧光检测作业指导书.doc(5页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、沙眼衣原体核酸扩增荧光检测作业指导书1 目的:保证CT DNA检测结果准确、可靠。2 适用范围:CT DNA的TaqMan荧光定量检测,标本类型为分泌物。3 负责人: 操作人: 4 原理:本试剂盒用一对沙眼衣原体特异引物和一条沙眼衣原体特异性荧光探针,PCR反应液,耐热DNA聚合酶(Taq酶),四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,再用PCR体外扩增法检测沙眼衣原体DNA。5 性能参数:检出低值25基因拷贝/ml。6 标本要求:(1)标本类型:分泌物。(2)标本采集:见标本采集手册。(3)标本储存和运输:室温放置不超过8小时,4-8不超过72小时,-20保存期6个月,应避免反复冻融。室温运输。(
2、4)标本拒收状态:细菌污染标本不能作测定。7 容器和添加剂类型:无菌离心管和无菌试管。8 所需设备:ABI GeneAmp 5700、台式高速离心机、混匀器、冰箱(4、-20)、生物安全柜、紫外灯9 试剂:DNA提取液(500l/管)2管;CT-PCR反应液(未贴标签管)20管;阳性定量质控标准品(1108基因拷贝/ml)(50l/管)1管;阴性质控品(250l/管)1管。10 校准程序(计量学溯源性):送XXX市计量检测所校准。11 程序步骤::11.1标本采集、保存和运送男性:取尿道分泌物或细小棉拭子伸入快尿道约24cm,略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管,用
3、无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。女性:阴道用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物,再用无菌棉拭子插入宫颈内,停5秒钟后旋动棉拭采取宫颈分泌物,将棉拭子置入无菌玻璃管,用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。尿道用无菌生理盐水棉球洗净尿道口,再用无菌棉拭子插入尿道约2cm,略捻拭子取出分泌物(应略带黏膜)。将棉拭子置入无菌玻璃管,用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。标本可立即用于测试,也可保存于-20待测,保存期为6个月。标本运送应采用0冰壶。11.2标本及对照标准品的处理标本试管中加入1ml无菌生理盐水,充分震荡摇匀,吸取液体转至1.5ml离心管中(如分泌物较多,只取0.2ml)12000rpm离心5分钟
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 沙眼 衣原体 核酸 扩增 荧光 检测 作业 指导书
限制150内