动物细胞融合与单克隆抗体.pptx
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1、专题二专题二 细胞工程细胞工程 2.2.22.2.2动物动物细胞融合与单克隆抗体细胞融合与单克隆抗体2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程 第一百中学第一百中学张永花张永花【学习目标学习目标】 1掌握动物细胞融合掌握动物细胞融合技术技术的原理和方法的原理和方法。 2归纳归纳单克隆抗体单克隆抗体的的制备过程制备过程。 3了解动物细胞融合和单克隆抗体技术的应用。了解动物细胞融合和单克隆抗体技术的应用。【重点】【重点】 动物动物细胞融合技术;单克隆抗体技术。细胞融合技术;单克隆抗体技术。【难点】【难点】 杂交瘤细胞杂交瘤细胞的筛选过程的筛选过程。情景情景导入导入20世纪世纪90年代初,英国科学家成
2、年代初,英国科学家成功功地地利用利用“生物导弹生物导弹”单克隆抗体单克隆抗体瞄瞄准准并杀死了癌细胞,使患血癌的并杀死了癌细胞,使患血癌的一一名名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。被岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。被称为称为“生物导弹生物导弹”的单克隆抗体,能够跟踪和杀死细菌、的单克隆抗体,能够跟踪和杀死细菌、病毒或癌细胞。病毒或癌细胞。灭活的病毒灭活的病毒 有丝分裂有丝分裂基础自主梳理基础自主梳理两个或多个两个或多个杂交杂交DNA杂交杂交远缘远缘遗传遗传细胞免疫细胞免疫新品种新品种5.5.特别特别提醒提醒 灭灭活活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌是指用物理或化学的手
3、段使病毒或细菌失去感染能力失去感染能力,但是并但是并不破坏不破坏这些病原体的这些病原体的抗原结构抗原结构。克服了远克服了远缘杂交不亲和的障碍缘杂交不亲和的障碍解决了因两种细胞密度不同而难以融解决了因两种细胞密度不同而难以融合的问题合的问题灭活的病毒灭活的病毒制备单克隆抗体制备单克隆抗体有性生殖、无性生殖有性生殖、无性生殖三三二二、单克隆抗体、单克隆抗体1传统抗体的获得传统抗体的获得(1)方法:方法:向动物体内反复注射某种向动物体内反复注射某种_,使动物,使动物产生产生 _;从动物从动物_中分离所需抗体。中分离所需抗体。(2)特点:特点:_、纯度低、纯度低、_差。差。抗原抗原抗体抗体血清血清产量
4、低产量低特异性特异性抗原蛋白抗原蛋白 脾脏脾脏 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 B淋巴细胞淋巴细胞 杂交瘤杂交瘤 迅速大量繁殖迅速大量繁殖 产生专一的抗体产生专一的抗体 克隆化克隆化 抗体抗体 体外培养体外培养 小鼠腹腔小鼠腹腔 细胞培养液细胞培养液 腹水腹水 特异性强特异性强 灵敏度高灵敏度高 高效高效 快捷快捷 治疗疾病治疗疾病 运载药物运载药物 特别提醒特别提醒.B淋巴细胞为经过淋巴细胞为经过免疫免疫的的B淋巴细胞,淋巴细胞,B淋巴细胞在淋巴细胞在体外体外 培养培养时不能无限增殖;骨髓瘤细胞能够无限增殖。时不能无限增殖;骨髓瘤细胞能够无限增殖。 每每一个一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体;不同淋
5、巴细胞只能分泌一种特异性抗体;不同种类种类 的的B淋巴细胞分泌的抗体淋巴细胞分泌的抗体不同不同。杂交瘤细胞的特点:杂交瘤细胞的特点: 既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体。既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体。5植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较比较比较项目项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融细胞融合原理合原理细胞膜的流动性、细胞的全细胞膜的流动性、细胞的全能性能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融细胞融合方法合方法用纤维素酶、果胶酶去除细用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合胞壁后诱导原生质体融合用胰蛋白酶或胶原蛋白酶用胰蛋白酶
6、或胶原蛋白酶使细胞分散后,诱导细胞使细胞分散后,诱导细胞融合融合诱导诱导手段手段离心、电激、振动、显微操离心、电激、振动、显微操作、聚乙二醇等诱导作、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比,与植物体细胞杂交相比,还可用灭活的病毒诱导还可用灭活的病毒诱导结果结果获取杂种植株获取杂种植株获得杂交细胞,以生产细获得杂交细胞,以生产细胞产品胞产品用途用途克服远缘杂交不亲和的障碍克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本组合范围,培扩展杂交亲本组合范围,培育新品种育新品种制备单克隆抗体、病毒疫制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等苗、干扰素等特别提醒特别提醒植物体细胞杂交植物体细胞杂交与动物细胞融合相比,与动物细胞
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