梅毒诊断研究进展.docx
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1、编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第10页 共10页梅毒诊断研究进展He who knows syphilis,knows medicine-Sir William Osler一、概述二、梅毒螺旋体三、梅毒四、梅毒的实验室诊断五、我国梅毒诊断试剂的现状六、中国药品生物制品检定所简介一、概述名 词梅毒(Syphilis)由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性全身性性传播疾病是我国卫生部规定的8种重点防治性病之一中华人民共和国传染病防治法规定的乙类传染病世界卫生组织列为世界上最常见的50种传染病之一 梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP )是梅毒的病原体,
2、因其透明,不易着色,故又称苍白螺旋体 溯 源关于梅毒(syphilis)的起源和传播有很多争执 梅毒来源于美洲:有记载,1493年哥伦布发现新大陆,其水手从西印度群岛上感染了梅毒,1497年回到欧洲,其水手带回去的梅毒很快在欧洲广泛流行。亦有考证在美洲印地安人的骨骼上留有梅毒病损的遗迹1498年梅毒传到印度1510年传入日本,随后蔓延全世界。大约于1505年由印度传入我国广东,当时称为“广东疮”、“杨梅疮”,此后梅毒向内地传播解放前梅毒在我国的传播甚为广泛,一些大城市的发病率达,某些少数民族地区高达解放后,我国政府采取措施,只花费了十几年时间就控制了梅毒等性病的流行。尔后,撤销了大部分性病防治
3、机构,医学院校也取消了性病课程,许多中青年医务人员压根儿就没见到过早期梅毒,至于一般年轻人甚至还没听说过这种病。 80年代初,梅毒和其他性传播疾病一样在我国死灰复燃,而且迅速蔓延 二、梅毒螺旋体分类螺旋体目(Spirochaetales)螺旋体科(Spirochaetaceae)密螺旋体属(Treponema)苍白螺旋体种(Treponema pallidum)分几个亚种生物学特性形态学1细长,5150.10.2um,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则,平均814个,两端尖直电镜下显示结构复杂,从外向内分为:外膜(主要由蛋白质、糖及类脂组成)、轴丝(主要由蛋白质组成)、圆柱形菌体(包括细胞壁、细胞膜
4、及胞浆内容物) 生物学特性形态学2透明不易染色,姬姆萨染色则可染成桃红色 在暗视野显微镜下观察,螺旋体浮游于组织中 有三种特征性的运动方式:旋转式,依靠自己的长轴旋转,向前后移动伸缩螺旋间距离活动,不断地拉长身体,使一端附着,再收缩旋距而前进;蛇行式,弯曲,像蛇爬行,是常见的方式 生物学特性形态学3细胞质外有三层细胞质膜,有柔软而较坚固的粘蛋白包绕,以维持其一定的结构,外膜含有丰富的脂类及少量的蛋白6条内鞭毛围绕其内层细胞壁和外层细胞膜之间的空间旋转,是负责运动的收缩成分表面有特异性抗原,能刺激机体产生特异性的凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体 繁 殖繁殖方式与其生活环境有关近年来电子显微镜观察
5、,在培养条件下或在体内适宜环境中为横断分裂,分裂时将躯干分裂成长短两段分裂增代时间为3033小时当条件不利时,以分芽子繁殖生活发育周期:颗粒期、球形体期及螺旋体期,与所致疾病周期、隐伏发作及慢性病程有关 培 养一般不能人工培养Nichols株(有毒株)能接种在家兔睾丸中或眼前房内繁殖,能保持毒力转种至加有多种氨基酸的兔睾丸组织碎片的特殊培养基中,25厌氧环境下能使螺旋体保持运动能力4-7天1981年Fieldsteel等采用棉尾兔单层上皮细胞在1.5%氧的大气环境进行培养,经9-12天孵育后,螺旋体数比接种数平均增加49倍,对兔仍保持毒力Reiter株能生长繁殖,已丧失致病力Nichols株和
6、Reiter株已广泛用作多种梅毒血清学的诊断抗原生存条件厌氧寄生物,在人体内可长期生存,体外不易生存干燥、肥皂水及一般消毒剂如1:1000苯酚、新洁尔灭、稀酒精均可于短时间将其杀死在血液中4经3日可死亡,故在血库冰箱冷藏3日以上的血液就无传染性温度的影响:41-42时可生活1-2小时,在48仅半小时即失去感染力,100立即死亡。对寒冷抵抗力大,在0时,可生活48小时,如将梅毒病损标本置于冰箱内,经1周仍可致病。在低温(-78)保存数年,仍可保持其形态、活动及毒性在封存的生理盐水稀释的组织液中可生活10小时左右在潮湿的器具或湿毛巾中,亦可生存数小时在干燥环境中可见迅速死亡 宿 主梅毒螺旋体只感染
7、人类人是梅毒的唯一传染源 毒力因子目前未证明具有内毒素或外毒素粘多糖和粘多糖酶是其主要毒力因子 荚膜样的粘多糖能保护菌体免受环境中不良因素的伤害,在体内可阻止大分子物质(如抗体)穿透,从而保护菌体,还有抗吞噬作用 粘多糖酶与对组织细胞的吸附,对组织基质的分解和荚膜的合成有密切关系致 病 性 由于其表面有赖以生存的荚膜样的粘多糖,荚膜中含有的N-乙酰-D-半乳糖胺,不能自行合成,须从宿主细胞获得其粘多糖酶吸附含粘多糖的组织细胞表面的粘多糖受体上,分解宿主细胞的粘多糖、获取合成荚膜所需的物质由于粘多糖是宿主组织和血管支架的重要基质成分,粘多糖被梅毒螺旋体分解后,组织受到损伤破坏,从而引起血管的塌陷
8、,血供受阻,造成管腔闭合性动脉内膜炎,动脉周围炎及坏死,溃疡等病变 抗 原 分为三类:1表面特异性抗原:刺激机体产生特异凝集抗体及密螺旋体制动或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体2螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体,与非病原性螺旋体有交叉反应3,螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原:当螺旋体侵入组织后,组织中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合抗原,此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体,称为反应素(Aegagin),可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应(康氏试验)或补体结合反应(华氏试验) 免 疫以细胞免疫为主,体液免疫只有一定的辅助防御作用当螺旋体从体内清除后可再感染,
9、而且仍可出现一期梅毒症状此病周期性潜伏与再发的原因可能与体内产生的免疫力有关机体免疫力强,螺旋体能变成颗粒形或球形,在体内一些部位潜伏起来,一旦机体免疫力下降,螺旋体又可侵犯体内某些部位而复发。三、梅 毒分 类人是梅毒的唯一传染源由于感染方式不同可分:先天性梅毒:患梅毒的孕妇经胎盘间接传染给胎儿后天性梅毒:出生后感染的,其中95%是由性交直接感染,少数通过输血感染先天性梅毒又称胎传梅毒梅毒螺旋体经胎盘进入胎儿血循环,引起胎儿全身感染螺旋体在胎内儿脏(肝、脾、肺及肾上腺)及组织中大量繁殖,造成流产或死胎如胎儿不死则称为梅毒儿,会出皮肤梅毒瘤、骨膜炎、锯齿形牙、神经性耳聋等症状后天获得性梅毒表现复
10、杂,依其传染过程可分为三期:一、二期梅毒又统称为早期梅毒,此期传染性强而破坏性小三期梅毒又称为晚期梅毒,该期传染性小,病程长、破坏性大 初期梅毒梅毒螺旋体侵入皮肤粘膜约三周后,在侵入局部出现无痛性硬结及溃疡,称硬性下疳局部组织镜检可见淋巴细胞及巨噬细胞浸润下疳多发生于外生殖器,其溃疡渗出物含有大量梅毒螺旋体,传染性极强下疳常可自然愈合约23个月无症状的隐伏期后进入第二期二期梅毒此期的主要表现为全身皮肤粘膜出现梅毒疹,全身淋巴结肿大,有时亦累及骨、关节、眼及其他器官在梅毒疹及淋巴结中有大量螺旋体。不经治疗症状一般可在3周3个月后自然消退而全愈;部分病例经隐伏312个月后可再发作二期梅毒因治疗不当
11、,经过5年或更久的反复发作,而进入三期 三期梅毒主要表现为皮肤粘膜的溃疡性损害或内脏器官的肉芽肿样病变(梅毒瘤)严重者在经过1015年后引起心血管及中枢神经系统损害,导致动脉瘤、脊髓痨及全身麻痹等此期的病灶中螺旋体很少,不易检出 梅毒分类总结 Early(infectious)syphilisTime after exposure9-90 days primary6weeks-6months secondary(4-8weeks after primary lesion)2 years (early)Latent Late(non-infectious)syphilis2 years (lat
12、e)Latent3-20years Tertiary Gummatous Cardiovascular Neurosyphilis Congenital syphilis2 years since birth early congenital syphilis(includes stillbirth)2years Late congenital syphilis防治原则梅毒是一种性病,预防的主要措施是加强卫生宣传教育和社会管理目前尚无疫苗预防对病人应早诊、早治,现多采用青霉素3个月1年,以血清中抗体阴转为治愈指标四、梅毒的实验室诊断梅毒检测的应用临床诊断及筛查血源筛查出入境人员等的体检梅毒螺旋
13、体检查 1暗视野显微镜检查2免疫荧光染色3活体组织检查梅毒螺旋体,如用银染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或荧光抗体染色螺旋体的鉴别 与雅司、地方性梅毒、品他三种非性病性螺旋体鉴别,还应与齿大螺旋体、齿小螺旋体、软螺旋体、生殖器螺旋体相鉴别 1雅司、地方性梅毒、品他三种非性病螺旋体:形态上不能区别2齿大螺旋体:为疏螺旋体,比梅毒螺旋体长,存在于口腔中,尤其在齿缝内最多; 3齿小螺旋体:比梅毒螺旋体短,旋距也短,运动不规则,两端较中部略宽。主要见于齿垢中; 4软螺旋体:为疏螺旋体,螺旋较少,运动不规律且快,常不断改变其形态。寄生于皮肤溃疡中。 5生殖器螺旋体:比
14、梅毒螺旋体短小,螺旋体大而不规则,生于阴垢内,不经常清洗者检出率较高。 6其他:与螺旋形网状纤维、纤维蛋白细丝、纤毛、串状红细胞等呈螺旋状的物体相鉴别。 基因诊断技术检测梅毒螺旋体 梅毒螺旋体不能进行体外培养。检测临床标本中梅毒螺旋体最敏感、可靠的方法是兔感染试验(RIT),RIT能证实活的梅毒螺旋体存在,是检测梅毒螺旋体常用的标准方法 目前有四套扩增梅毒螺旋体DNA的系统:扩增47KDa膜抗原基因(tpp47基因),扩增39KDa碱性膜蛋白基因(bmp基因),扩增TpF1蛋白基因(tpf-1)或TyF1蛋白基因(tyf-1)和扩增tmpA基因 梅毒血清试验 非梅毒螺旋体抗原血清试验 (非特异
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