动物细胞融合与单克隆抗体 (6)讲稿.ppt
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1、关于动物细胞融合与单克隆抗体(6)第一页,讲稿共三十页哦(1)(1)(2)(3)(4)(5)回顾:植物体细胞杂交过程示意图第二页,讲稿共三十页哦A细胞细胞B细胞细胞人工诱导人工诱导杂交细胞杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂交)动物细胞融合(也称细胞杂交):是指:是指两个或多个细胞两个或多个细胞融合形融合形成一个成一个单核细胞单核细胞的过程。的过程。一、动物细胞融合概念一、动物细胞融合概念第三页,讲稿共三十页哦细胞膜的流动性细胞膜的流动性灭活的病毒、灭活的病毒、PEGPEG、电激等、电激等融合后的细胞进行有丝分裂,形融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞成完整的杂交细胞2 2、诱导的手段?
2、、诱导的手段?3 3、融合后细胞的类型?、融合后细胞的类型?4 4、ABAB杂种细胞遗传物质杂种细胞遗传物质有什么特点?有什么特点?三种三种AAAA、ABAB、BBBB含两种生物的遗传物质含两种生物的遗传物质动物细胞融合过程动物细胞融合过程1 1、原理?、原理?第四页,讲稿共三十页哦动物动物细胞融合技术的意义和应用细胞融合技术的意义和应用第五页,讲稿共三十页哦比较动、植物细胞杂交技术比较动、植物细胞杂交技术第六页,讲稿共三十页哦【例例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是能使动物细胞融合的特有的诱导因子是()A.离心离心 B.灭活的病毒灭活的病毒 C.电刺激电刺激 D.振动振动【例例2】融合后
3、的杂交细胞的遗传物质有何特点(融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点()A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖能无限增殖 C.可形成新个体可形成新个体 D.培养过程会贴壁培养过程会贴壁【例例3】动物细胞融合的作用中最重要的是(动物细胞融合的作用中最重要的是()A.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C.培育新物种培育新物种 D.生产杂种细胞生产杂种细胞 BBA第七页,讲稿共三十页哦抗体:能够与抗原发生特异抗体:能够与抗原发生特异性结合的性结合的免疫球蛋白免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是能产生抗体的细胞是浆细胞浆细胞(即
4、效应(即效应B细胞)。细胞)。二、单克隆抗体二、单克隆抗体强调:强调:强调:强调:效应效应效应效应B B淋巴细胞是能够产淋巴细胞是能够产淋巴细胞是能够产淋巴细胞是能够产生抗体的生抗体的生抗体的生抗体的B B淋巴细胞,下文将淋巴细胞,下文将淋巴细胞,下文将淋巴细胞,下文将其简称为其简称为其简称为其简称为B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞第八页,讲稿共三十页哦抗体的传统生产方法抗体的传统生产方法抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离抗体中分离抗体该法制备抗体的缺点:该法制备抗体的缺点:产量低、纯度低,且抗体的产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。特异性差、灵敏度
5、低。单克隆抗体!单克隆抗体!第九页,讲稿共三十页哦读下面一段资料,读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念找出单克隆抗体的概念 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B B细胞可以产生细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B B细胞只分泌一种化学性细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个个B B细胞进行无性繁殖,即克隆。细胞进行无性繁殖,即克隆。单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念单克隆单克隆抗体:单个抗体:单个B
6、 B细胞克隆产生的细胞克隆产生的单一、特单一、特异性强异性强的抗体的抗体问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设计一个方案。第十页,讲稿共三十页哦一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术设计方案:设计方案:动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆单克隆抗体抗体 既能产生特异性抗体,既能产生特异性抗体,又又能大量增殖的细胞能大量增
7、殖的细胞19751975年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和柯勒柯勒的实验的实验第十一页,讲稿共三十页哦BBBB 、B B瘤瘤 、瘤瘤瘤瘤 (一选)(一选)选择选择性培养基性培养基:只:只有有杂交瘤细杂交瘤细胞胞才能存活才能存活获得产生相应抗获得产生相应抗体的体的B B细胞细胞(二选):选能(二选):选能产生所需产生所需专一专一抗体的杂交瘤抗体的杂交瘤细胞细胞体外培养体外培养体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点:杂交瘤细胞特点:既能产生特异性既能产生特异性抗体,又能大量抗体,又能大量增殖。增殖。第十二页,讲稿共三十页哦杂交杂交杂交杂交
8、细胞细胞细胞细胞灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞经免疫经免疫经免疫经免疫的小鼠的小鼠的小鼠的小鼠杂交瘤杂交瘤杂交瘤杂交瘤细胞细胞细胞细胞第一次筛选第一次筛选第一次筛选第一次筛选用特定的用特定的选选择性培养基择性培养基第二次筛选第二次筛选第二次筛选第二次筛选能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞体外培养体外培养体外培养体
9、外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体第十三页,讲稿共三十页哦单克隆抗体的应用:单克隆抗体的应用:1、诊断试剂、诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点:单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。特异性强,灵敏度高,并能大量制备。第十四页,讲稿共三十页哦“生物导弹生物导弹”单克隆抗体药物单克隆抗体药物 单抗导向,药物为弹头单抗导向,药物为弹头2、治疗疾病和运载药物、治疗疾病和运载药物 主要用于治疗主要用于治疗癌症治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,
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