《茎尖分生组织培养》PPT课件.ppt
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1、4 茎尖分生组织培养茎尖分生组织培养 一、概念和意义一、概念和意义 1.概念概念茎尖分生组织培养茎尖分生组织培养:指对不超过的茎尖或几十微米的茎尖进行的培养。特点:可获无病毒苗,操作困难,成苗时间长。普通茎尖培养:对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。2.意义 茎尖培养在园艺植物离体培养中最常见,可快速繁殖无性系、培养无病毒苗培养无病毒苗、品种改良。二、茎尖分生组织培养一般方法二、茎尖分生组织培养一般方法1.材料的制备健壮枝梢 去除叶片 分成1-2cm 自来水冲洗 消毒 75%的酒精30秒 0.1%升汞或20倍次氯酸钠消毒8-10min 无
2、菌水 修剪剥离茎尖,通常切割下顶端0.20.5 mm叶原基的茎尖(无菌水)接种。2.培养基 多为MS培养基及其改良配方,还有White、B5、Heller、Gautheret等。3.培养条件(1)温度:2628(2)光照:光培养的效果通常比暗培养好。(3)湿度:与其他器官培养相似。4.3 脱毒苗的培育和病毒检测脱毒苗的培育和病毒检测一、脱毒苗的培育脱毒苗的培育(一)脱毒苗培育的意义(一)脱毒苗培育的意义全世界已发现植物病毒有近700种,植物病毒病严重地影响果树、蔬菜、花卉、林木等植物的生长,造成产量降低,品质变劣,其危害仅次于真菌病害。受病毒浸染的植物终身带毒,目前尚无药物可以治愈。通过茎尖分
3、生组织脱毒、热处理脱毒等方法可脱除植物体内病毒,恢复植物原有特性。(二)热处理脱毒 1.原理热处理脱毒又叫热温处理或热疗法。其基本原理是一些病毒对热不稳定,在高于常温的温度下(35-40度)既钝化失活。2.热处理法有:温汤处理(热水浸泡)和热风处理两种。具体方法:第一,热水浸泡处理,适用于切下的材料,在50度左右的温水中浸渍数分钟至数小时,方法简便易行但材料易受伤。第二,热风处理,将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内,处理温度因植物种类、生理状况而异。一般为3540度,短则几十分钟,长达数月。(三)茎尖培养脱毒(三)茎尖培养脱毒 1.茎尖培养脱毒的原理(1)病毒在植物体内的分布 病毒浓度不同,离
4、尖端越远病毒浓度越高。茎尖或根尖离体培养便可获得无病毒再生植株。必必须须指指出出的的是是,所所谓谓无无病病毒毒,只只是是相相对对的的,不不是是绝对的。绝对的。(2)茎尖大小与脱毒 茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。茎尖分生组织不能合成自身需要,生长素,细胞分裂素,因而带叶原基的茎尖生长快,成苗率高。因此茎尖越大培养成活率越高。因此对不同植物脱毒适宜的茎尖大小不同。2.茎尖培养脱毒的方法(1)取样与消毒可直接选定的植株上取顶芽进行消毒接种。采顶芽与侧芽消毒接种。消毒方法是:剪取顶芽梢段3、5厘米,剥去大叶片,用自来水冲洗干净,在75%酒精中浸泡30秒左右,用1%-3次氯酸钠或5%-7%的漂白粉溶
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