维生素A (2).ppt
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1、维生素维生素维生素维生素A A的分析的分析的分析的分析临床药学 第组讲解员:施文玲 胡家勇PPT制作:郭贤旋内容来源:武丰瑾 陈燕兰 贺智杰 马天著 陈天威学习要求学习要求1.掌握维生素A的化学结构、理化性质以及与分析方法间的关系,专属鉴别反应、主要的含量测定方法和原理。2.熟悉维生素A的有关物质、检查方法与原理。维生素A的来源、成分主要内容主要内容主要内容主要内容维生素A的结构与性质鉴别试验含量测定杂质检查维生素维生素A A的来源、成分的来源、成分不饱和脂肪醇主要来自鲛类无毒海鱼肝脏中提取的脂肪油(通称鱼肝油)包括:VitA1(视黄醇)、VitA2(去氢 维生素A)和VitA3(去水维生素A
2、)等。生物活性:VitA1活性最高,VitA2是VitA1的30%-40%,VitA3是VitA1的0.4%。故通常所说的维生素A是指维生素A1。维生素维生素A A的来源、成分的来源、成分维生素生素A1视黄醇黄醇维生素生素A23-去去氢视黄醇黄醇维生素生素A3脱水脱水维生素生素A维生素A是指人工合成的维生素A醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液。ChP2010收载结构:为具有一个共轭多烯醇侧链的环 己烯。天然维生素A主要是全反式维生素A。结构与性质R的不同则决定了维生素A的醇式或酯式状态。结构决定性质溶解性(脂溶性)不稳定性(多个不饱和键)紫外吸收特性(共轭多烯醇的侧链结构,最大吸收325-32
3、8nm)与三氯化锑呈色 维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇甲烷溶液中即显蓝色,渐变成红色。鉴别试验 方法:取维生素A油溶液1滴,加三氯甲烷10ml振摇使溶解;取出两滴,加三氯甲烷2ml与25%三氯化锑的三氯甲烷溶液0.5ml,即显蓝色,渐变成紫红色。(一)三氯化锑反应(ChP2010)机制:维生素A和氯化锑()中存 在的亲电试剂氯化高锑()作用形成不稳定的蓝色碳正离子。方法:取约相当于10IU的维生素A供试品,加无水乙醇-盐酸(100:1)溶液溶解,应在326nm的波长处有单一的吸收峰。将此溶液水浴加热30秒,迅速冷却,鉴别试验(二)紫外光谱法应在348、367和389nm的波长处有三个尖锐的吸
4、收峰,且在332nm的波长处有较低的吸收峰或拐点。分别取供试品与对照品(不同维生素A脂类)的环己烷溶液(5IU/l)各2l,点于薄层板上,立即展开,空气中挥干,喷以三氯化锑溶液,比较供试品和对照品所显蓝色斑点位置。鉴别试验(三)薄层色谱法 吸附剂:硅胶G 展开剂:环己烷-乙醇(80:20)检查酸值 取乙醇与乙醚各15ml,置锥形瓶中,加酚酞指示剂5滴,滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至显粉红色,再加本品2.0g,振摇使溶解,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定,酸值应不大于2.0(附录VIIH)过氧化值检查取本品1.0g,加冰醋酸-三氯甲烷(6:4)30ml,振摇使溶解,加碘化钾的饱
5、和溶液1ml,振摇1分钟,加水100ml与淀粉指示液1ml,用硫代硫酸钠滴定液(0.01mol/L)滴定至紫蓝色消失,并将滴定的结果用空白试验校正。消耗硫代硫酸钠滴定液(0.01mol/L)不得过1.5ml。含量测定(一)紫外可见分光光度法(二)高效液相色谱法(三)三氯化锑比色法含量测定(一)紫外可见分光光度法 (三点校正法)对维生素A测定有影响的杂质有:(1)维生素A2和维生素A3(2)维生素A的氧化产物:环氧化物、维生素A醛、维生 素A酸(3)维生素A在光照条件下产生的无活性的聚合物:鲸醇(4)维生素A的异构体及其他为了得到准确的测定结果,消除非维生素A物质的无关吸收所引起的误差,而求得维
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