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1、Glucose Test1 1、实验目的、实验目的2 2、原理、原理3 3、试剂、试剂4 4、实验步骤、实验步骤5 5、计算、计算6 6、结果分析、结果分析实验目的实验目的 掌握掌握GODGODPODPOD法测定血法测定血糖浓度的原理、方法及临床糖浓度的原理、方法及临床意义。意义。原原 理理D-D-葡萄糖葡萄糖 +O+O2 2+H+H2 2O O H H2 2O O2 2+D-+D-葡萄糖酸葡萄糖酸 H H2 2O O2 2+4-AAP+4-AAP+酚酚 2H2H2 2O+O+红色红色醌类化合物醌类化合物 PODGOD试剂盒组成试剂盒组成 R R1 1:酶试剂酶试剂 1100ml1100ml
2、葡萄糖氧化酶(葡萄糖氧化酶(GODGOD)14U/ml14U/ml 过氧化物酶(过氧化物酶(PODPOD)2U/ml2U/ml 4-4-氨基安替比林氨基安替比林 0.5mmol/L0.5mmol/LR R2 2:酚试剂酚试剂 1100ml 1100ml 酚酚 20mmol/L 20mmol/L 葡萄糖校准液葡萄糖校准液 5.5mmol/L5.5mmol/L 12ml12ml 实验步骤实验步骤1 1工作液配制:工作液配制:根据测定所需试剂量,取根据测定所需试剂量,取R1R1和和R2R2混合混合(按照试剂盒的要求按照试剂盒的要求),即为工作液,即为工作液 (ml)空白(B)校准(S)测定(U)样品
3、0.03校准液0.03蒸馏水0.03工作液3.003.003.00 混匀,混匀,3737恒温恒温1515分钟,分钟,505505nmnm波长,以波长,以空白管调零空白管调零,测定各管吸,测定各管吸光度。光度。样样 品品待测血浆:待测血浆:抽血抽血5ml5ml,加抗凝剂肝素,加抗凝剂肝素,离心,离心,30003000转分,转分,5 5分钟分钟取上清液即为样品取上清液即为样品离心机离心机(1 1)使用前应先检查调速旋钮)使用前应先检查调速旋钮是否在是否在“O”O”处处(2 2)离心操作,都必须严格遵)离心操作,都必须严格遵守平衡的要求:样品不超过离守平衡的要求:样品不超过离心管心管2 23 3体积
4、;对称放置。体积;对称放置。(3 3)盖严离心机盖)盖严离心机盖 ;(4 4)开动时,先开电门,然后慢慢)开动时,先开电门,然后慢慢拨动变速旋钮,使速度逐渐增加,拨动变速旋钮,使速度逐渐增加,转速稳定后开始计时。转速稳定后开始计时。(5 5)停止时,先将旋钮逐步拨动到)停止时,先将旋钮逐步拨动到“O”O”,待自动停止后方可打开机盖。待自动停止后方可打开机盖。不继续使用时,拔下插头不继续使用时,拔下插头 注意事项注意事项离心时,若听到特殊响声或有振动,离心时,若听到特殊响声或有振动,可能是离心管破碎或不平衡,应立可能是离心管破碎或不平衡,应立即关机,作相应处理。即关机,作相应处理。严禁用手或其他
5、物品迫使离心机停严禁用手或其他物品迫使离心机停止。止。离心时,人远离离心机。机盖上不离心时,人远离离心机。机盖上不可放任何物品。可放任何物品。分光光度计分光光度计722S722S型型 1 1、接通电源,预热接通电源,预热3030,调波长,调波长2 2、校校准准,打打开开盖盖为为数数显显为为0 0,关关上为上为1001003 3、放入比色杯比色,手拿比色杯粗、放入比色杯比色,手拿比色杯粗糙面糙面 4 4、清洗比色皿,用滤纸或拭镜纸擦、清洗比色皿,用滤纸或拭镜纸擦干干100 0FUNCMODETRANSABSFACTCONC波长旋钮计 算样品葡萄糖含量(样品葡萄糖含量(mmolmmol/L/L)=Cs =Cs (CsCs为为5.555.55)AsAs:标准液的吸光度:标准液的吸光度 AuAu:待测液的吸光度:待测液的吸光度参考值范围:参考值范围:3.893.895.56mmol/L5.56mmol/L Au Au As As
限制150内