检疫性真菌病害.ppt
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1、第五章第五章 检疫性真菌病害检疫性真菌病害uu 小麦矮腥黑穗病小麦矮腥黑穗病小麦矮腥黑穗病小麦矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt Wheat dwarf bunt v 小麦印度腥黑穗病小麦印度腥黑穗病 Wheat karnal buntw 烟草霜霉病烟草霜霉病 Tobacco blue moldx马铃薯癌肿病马铃薯癌肿病 Potato warty榆树枯萎病榆树枯萎病 Dutch elm disease复习思考题植物检疫性真菌常见检疫检验技术植物检疫性真菌常见检疫检验技术n n直接检验直接检验n n染色检验染色检验n n洗涤检验洗涤检验n n保湿萌芽检验保湿萌芽检验n n分离培养检验分
2、离培养检验1.直接检验n n适用范围:具明显症状的植物材料n n主要工具:放大镜或解剖镜,主要是利用肉眼现场快速初检2.染色检验法n n原理:染病的组织,或病原菌本身,经特殊的化学药品处理后,可带有特殊的颜色n n例如:马铃薯癌肿病(Synchytriumendobioticum)薯块上癌瘤不明显时,可做徒手切片,加1滴1的“藏花红”染色液,健康组织细胞壁呈亮红色,感病组织细胞壁呈暗红色。3.洗涤检验法洗涤检验法n n原理:种子表面常附着真菌孢子,将一定量的样品放入容器内,加一定量的无菌水,充分振荡,可使病菌孢子洗涤下来,而后离心后,可沉淀,镜检沉淀物可确定其种类和数量。n n主要仪器和试剂:
3、振荡器、离心机、显微镜、0.1吐温溶液等n n主要试验流程如下:称取样品洗脱孢子(振荡)离心富集镜检计数n n影响检验结果的因素:种子表面的病菌孢子不一定能完全洗涤下来;离心管内,悬浮液表面常形成一层极难沉降的孢子薄膜,管壁上也可能黏附孢子;将悬浮液滴于玻片时,由于孢子迅速沉淀,造成一些视野间孢子分布极不均匀;操作不够严格,造成人为误差。4.保湿萌芽检验n n原理:种子携带的真菌,无论外表黏附的还是潜伏种子内的,在种子萌发阶段即可开始侵染,甚至有些在种子还未萌发时就可长出病菌。n n主要仪器及试剂:吸水纸、沙土、冰箱、培养箱等。n n主要包括:保湿培养检验、沙土萌芽和土内萌芽检验等三种方法,其
4、中保湿培养检验法是国内外最常用的一种方法。n n吸水纸法无菌吸水纸(3层)灭菌培养皿 吸水11.5cm培养、观察12h光照黑暗交替恒温所观察到的结果示意图如下5.分离培养检测分离培养检测n n常规植物病理学方法小麦矮腥黑穗病小麦矮腥黑穗病 Wheat dwarf bunt Wheat dwarf bunt分布:分布:是麦类黑穗病中危害最大、防治最难的一种病害,它于1847年及1860年先后发现于捷克和美国,在全世界范围内传播和蔓延,目前已在欧洲、北美、南美、澳洲、亚洲、非洲等40多个国家发生。寄主:寄主:禾本科5个族,18个属,65个种。主要栽培植物有冬小麦、大麦、黑麦,冰草属为天然发病的主要
5、禾草寄主。危害性:1962年美国减产68.7,1972年西部7州,平均减产17,损失1.2亿Kg。菌瘿可存活10年以上。症状症状:系统侵染性,表现为:病株特矮(1/31/2),分孽特多(1倍),病穗特密,病粒特硬,有鱼腥臭味。病原菌:病原菌:病原菌:病原菌:TilletiaTilletiacontroversacontroversa J.G.J.G.KhnKhn,inRabenhorst,inRabenhorst,HedwigiaHedwigia 1313:188(1874):188(1874)Position in classification:Position in classificat
6、ion:Tilletiaceae,Tilletiales,Exobasidiomycetidae,Ustilaginomycetes,Tilletiaceae,Tilletiales,Exobasidiomycetidae,Ustilaginomycetes,Basidiomycota,FungiBasidiomycota,Fungi形态特征形态特征形态特征形态特征:冬孢子冬孢子,冬孢子萌发冬孢子萌发。生物学特征:生物学特征:生物学特征:生物学特征:冬孢子萌发冬孢子萌发-2-21515(3838),弱光,弱光400400600lx600lx,土壤含水量土壤含水量35358888,萌发周期长,萌
7、发周期长33个月。冬孢子内含有个月。冬孢子内含有内源孢子萌发抑制剂。内源孢子萌发抑制剂。生理分化:生理分化:生理分化:生理分化:美国美国1515小种,德国小种,德国8 8个小种。个小种。初侵染来源:初侵染来源:初侵染来源:初侵染来源:土壤带菌,冬孢子可存活土壤带菌,冬孢子可存活1 1年,菌瘿可存活年,菌瘿可存活3 31010年。年。传播:传播:传播:传播:种子;运输工具、包装材料及下脚料;粪肥;雨水。种子;运输工具、包装材料及下脚料;粪肥;雨水。发病规律发病规律发病规律发病规律:侵染期长,侵染期长,1212月月4 4月,月,1 12 2月是盛期,月是盛期,幼嫩分蘖处侵入,细胞间蔓延,幼嫩分蘖处
8、侵入,细胞间蔓延,5050天到生长点,天到生长点,随寄主生长,菌丝进入穗原始体,到各个花器,随寄主生长,菌丝进入穗原始体,到各个花器,破坏子房,形成冬孢子堆。长时间破坏子房,形成冬孢子堆。长时间3 38 8 低温利低温利于侵染;冬麦区苗期日平均温度于侵染;冬麦区苗期日平均温度0 010 10 达达45d45d以以上,即使没有雪覆盖也同样利于发病。上,即使没有雪覆盖也同样利于发病。TCKTCK的循环的循环的循环的循环:流行因素流行因素流行因素流行因素:大面积感病品种、足够菌源、冬季日大面积感病品种、足够菌源、冬季日均温均温0 010 10 的日数的日数40d40d、稳定积雪稳定积雪70d70d以
9、上,以上,积雪厚度积雪厚度10cm10cm以上。以上。国内适生区域:国内适生区域:国内适生区域:国内适生区域:西北高原冬麦区和新疆、青藏高西北高原冬麦区和新疆、青藏高原晚播冬麦区极为适宜病害的发生,属高度危险原晚播冬麦区极为适宜病害的发生,属高度危险区;江淮流域及华北、东北冬麦区基本适合病害区;江淮流域及华北、东北冬麦区基本适合病害发生,属危险区;西南高海拔地区有时也具备病发生,属危险区;西南高海拔地区有时也具备病菌入侵条件,也可能受害;春麦区不发病。菌入侵条件,也可能受害;春麦区不发病。检验与检测:检验与检测:直接检查:放大镜直接检查:放大镜菌瘿菌瘿洗涤检查:洗涤检查:50g50g100ml
10、100ml无菌水,振荡无菌水,振荡5min5min,101015ml15ml离心离心3min3min,定容,制片观察。定容,制片观察。冬孢子鉴定:孢子形态鉴定(冬孢子鉴定:孢子形态鉴定(网脊高度、胶鞘厚网脊高度、胶鞘厚度、网目径、孢子大小、不育细胞等)度、网目径、孢子大小、不育细胞等)。冬孢子自发荧光实验:冬孢子自发荧光实验:TCKTCK孢子于荧光显微镜下孢子于荧光显微镜下有自发荧光现象,而有自发荧光现象,而TCTTCT孢子则无。孢子则无。冬孢子萌发试验:冬孢子萌发试验:5 5、1717 下,光照。矮腥孢下,光照。矮腥孢子子5 5 下下21d21d开始萌发,开始萌发,1717 不萌发。不萌发。
11、PCRPCR技术:引物技术:引物5-TGACAACGGATCTCTTGGTT-5-TGACAACGGATCTCTTGGTT-33、5-TCACCAACTCCAAGCAATCT-3,206bp5-TCACCAACTCCAAGCAATCT-3,206bp处有特异扩增带。处有特异扩增带。检疫和防治检疫和防治进口小麦和原粮必须进行检疫,病麦需除害处进口小麦和原粮必须进行检疫,病麦需除害处理理带菌小麦原粮必须集中在几个规定有条件的口带菌小麦原粮必须集中在几个规定有条件的口岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法,岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法,13030min13030min或或120 1h120 1h。病区用病
12、区用4040五氯硝基苯,种子重量五氯硝基苯,种子重量0.50.5的药量的药量拌种,并在播种沟内施药处理。或单用拌种,并在播种沟内施药处理。或单用1 1的药的药量拌种量拌种重病地应轮作倒茬或改种春小麦。冬小麦晚播重病地应轮作倒茬或改种春小麦。冬小麦晚播可减轻发病。可减轻发病。种植抗病品种。种植抗病品种。小麦印度腥黑穗病Wheatkarnalbunt分布:分布:印度、巴基斯坦、尼泊尔、阿富汗、伊拉克、土耳其、黎巴嫩、叙利亚、原苏联、瑞典、美国、墨西哥、澳大利亚等。寄主寄主:小麦、硬粒小麦、六倍体小麦危害及重要性危害及重要性:产量影响不大,对品质影响较大,3%面粉具臭味(三甲胺)。症状症状:局部侵染
13、性,部分黑穗病,麦粒的一部分被侵染,小穗顶端麦粒黑斑,颖片张开,主要侵染胚乳,一般不侵染胚,在种子腹面表皮下形成冬孢子堆,背面胚乳部分仍完好。病原菌病原菌病原菌病原菌:TilletiaTilletia indicaindica MitraMitra 异名:异名:NeovossiaNeovossia indicaindicaPosition in classification:Position in classification:TilletiaceaeTilletiaceae,TilletialesTilletiales,ExobasidiomycetidaeExobasidiomycetid
14、ae,UstilaginomycetesUstilaginomycetes,BasidiomycotaBasidiomycota,Fungi,Fungi冬孢子冬孢子冬孢子冬孢子:棕褐色,球形,近球形,棕褐色,球形,近球形,222249m 49m,外壁棘外壁棘状突起,状突起,1.51.55m 5m;未成熟黄色,透明胶质鞘,成熟消未成熟黄色,透明胶质鞘,成熟消失,外壁有尖形尾丝。不孕细胞球形,近球形,泪珠状,失,外壁有尖形尾丝。不孕细胞球形,近球形,泪珠状,半透明,淡黄褐色,附着菌丝体残体,半透明,淡黄褐色,附着菌丝体残体,131333m 33m。冬孢子萌发冬孢子萌发冬孢子萌发冬孢子萌发:4 4月
15、以上休眠期,萌发产生月以上休眠期,萌发产生1010190m 190m 先菌先菌丝,上产生丝,上产生6565185185个担孢子,长镰刀形,可不配对结合,个担孢子,长镰刀形,可不配对结合,而直接产生芽管,作侵染菌丝用。而直接产生芽管,作侵染菌丝用。A partially mature teliospore showing ornamentation in median view A partially mature teliospore showing ornamentation in surface view 初侵染来源:初侵染来源:种子带菌,土壤带菌,秸秆和粪肥等带菌。冬孢子可存活5年。传播
16、:传播:种子;运输工具、包装材料及下脚料;粪肥;雨水;也可气传。生理分化:生理分化:异宗配合,印度7个生理小种。发生规律:发生规律:冬孢子萌发的适温1522,扬花期先菌丝产生的担孢子随气流传播到麦穗上,产生次生担孢子,上生芽管,从颖片、外稃和内稃开张的气孔侵入。在一定温度范围内,该病流行与湿度正相关,与温度反相关。因此,扬花期遇多云、寡日照、细雨多雾的高湿天气适宜发病。检验方法检验方法:直接检查:根据病粒的特有症状鉴定直接检查:根据病粒的特有症状鉴定洗涤检验洗涤检验发病轻的麦粒可用发病轻的麦粒可用0.20.2NaOHNaOH浸浸24h24h(18182525),),吸去多余液体,实体显微镜下观
17、察。乌黑吸去多余液体,实体显微镜下观察。乌黑发亮的种子有病,淡褐色无病。发亮的种子有病,淡褐色无病。PCRPCR技术:技术:扩增引物为扩增引物为5-5-CGTGTGAGCCATGCTACGACT-3CGTGTGAGCCATGCTACGACT-3和和5-5-AACTTCCAAGGCGACCGTTT-3AACTTCCAAGGCGACCGTTT-3,在,在743bp743bp处有处有一特异性扩增带,其他近似种或相关种均未出现一特异性扩增带,其他近似种或相关种均未出现该扩增带。该扩增带。检疫和防治:检疫和防治:严格检疫严格检疫高温灭菌:带菌小麦原粮必须集中在几个规定高温灭菌:带菌小麦原粮必须集中在几个
18、规定有条件的口岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法,有条件的口岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法,8585,相对湿度,相对湿度8080,处理,处理3min3min可以杀死孢子,可以杀死孢子,处理处理5min5min可以杀死菌瘿。可以杀死菌瘿。农业措施:小麦与鹰嘴豆间作,适时早播,病农业措施:小麦与鹰嘴豆间作,适时早播,病轻。轻。化学防治:三唑类和苯并吡咯类拌种,喷洒药化学防治:三唑类和苯并吡咯类拌种,喷洒药剂(萎锈灵)等。剂(萎锈灵)等。烟草霜霉病烟草霜霉病Tobacoo blue mold分布与危害:分布与危害:分布与危害:分布与危害:18911891年澳大利亚首先报道,后传入欧年澳大利亚首先报道,后
19、传入欧洲、非洲、美洲和亚洲,现广泛分布,中国尚未发洲、非洲、美洲和亚洲,现广泛分布,中国尚未发现。现。苗床和田间均发病,蔓延速度极快,引起大量苗床和田间均发病,蔓延速度极快,引起大量植株枯死,是烟草的毁灭性病害。植株枯死,是烟草的毁灭性病害。19601960年欧洲流行,年欧洲流行,法国和比利时烟草损失法国和比利时烟草损失80809090,19611961年损失干烟年损失干烟叶叶100,000100,000吨。吨。寄主范围:寄主范围:寄主范围:寄主范围:专性侵染,寄主范围窄,主要侵染烟草,专性侵染,寄主范围窄,主要侵染烟草,自然条件下,还可侵染番茄、辣椒、茄子和马铃薯自然条件下,还可侵染番茄、辣
20、椒、茄子和马铃薯等茄科植物,人工接种可侵染矮牵牛、酸浆和灯笼等茄科植物,人工接种可侵染矮牵牛、酸浆和灯笼草等。草等。症状症状症状症状:发病时期:主要在苗期,大田期也发生。发病时期:主要在苗期,大田期也发生。发病部位:主要为害叶片。发病部位:主要为害叶片。症状特点:因病原菌的生理型不同,受害部门也有差异,症状特点:因病原菌的生理型不同,受害部门也有差异,如美国流行的是美国生理型。主要危害幼苗,成株感染较如美国流行的是美国生理型。主要危害幼苗,成株感染较少,不易感染茎部;欧洲流行提澳洲生理型,其危害特点少,不易感染茎部;欧洲流行提澳洲生理型,其危害特点是除危害烟草幼苗外,还能危害烟茎和成株。病叶表
21、面和是除危害烟草幼苗外,还能危害烟茎和成株。病叶表面和边缘表现淡黄色、黄绿色、暗绿色的病斑,病斑为圆形、边缘表现淡黄色、黄绿色、暗绿色的病斑,病斑为圆形、近圆形、多角形或形状不规则。病害发展迅速时,病斑可近圆形、多角形或形状不规则。病害发展迅速时,病斑可相互连接起来,布满整个叶片,或没有明显的界限。病叶相互连接起来,布满整个叶片,或没有明显的界限。病叶背面密生灰蓝色或灰褐色的霜霉层,干烟叶一般表现为灰背面密生灰蓝色或灰褐色的霜霉层,干烟叶一般表现为灰白色或灰褐色,苗床上的病苗表现为灰蓝色。条件适宜时,白色或灰褐色,苗床上的病苗表现为灰蓝色。条件适宜时,叶表面也产生霜霉层,随着病斑的发展,逐渐变
22、褐色,甚叶表面也产生霜霉层,随着病斑的发展,逐渐变褐色,甚至深褐色,最后成为枯褐色。干烟叶上病斑表面有突起,至深褐色,最后成为枯褐色。干烟叶上病斑表面有突起,老病斑边缘有一圈青褐色环,与马铃薯晚疫病症状相似。老病斑边缘有一圈青褐色环,与马铃薯晚疫病症状相似。烤后的烟叶症状尚隐约可见;空气湿度大时,病斑更为明烤后的烟叶症状尚隐约可见;空气湿度大时,病斑更为明显。显。烟草霜霉病与其他病害的症状区别:烟草霜霉病烟草霜霉病与其他病害的症状区别:烟草霜霉病的病斑有时容易与烟草黑胫病叶部症状相混淆。的病斑有时容易与烟草黑胫病叶部症状相混淆。因黑胫病叶部病斑圆形,表现青褐色大斑,呈水因黑胫病叶部病斑圆形,表
23、现青褐色大斑,呈水渍状,背面霉层稀少,毛短色白,与霜霉病仍有渍状,背面霉层稀少,毛短色白,与霜霉病仍有区别。另外,烟草霜霉病染病部位产生霜状霉层,区别。另外,烟草霜霉病染病部位产生霜状霉层,不仔细观察与烟草白粉病产生的白色粉状霉层也不仔细观察与烟草白粉病产生的白色粉状霉层也易于混淆,但因霜霉病的霜状霉层大多局限于病易于混淆,但因霜霉病的霜状霉层大多局限于病叶背面,而白粉病的粉状霉层则在叶片的正反两叶背面,而白粉病的粉状霉层则在叶片的正反两面都产生,只要仔细观察亦不难区别。面都产生,只要仔细观察亦不难区别。病原菌病原菌:PeronosporaPeronosporahyoscyamihyoscya
24、mi dedeBaryBaryf.sp.f.sp.tabacinatabacina(Adam)(Adam)SkalickySkalicky 异名异名异名异名 PeronosporaPeronosporatabacinatabacina D.B.AdamD.B.AdamPeronosporaPeronospora hyoscyamihyoscyamidedeBaryBary PeronosporaPeronospora nicotianaenicotianae SpegSpeg 英文名称:英文名称:bluemouldoftobaccobluemouldoftobacco;tobaccobluet
25、obaccobluemouldmould;downymildewdownymildew;angulartobaccoleafspotangulartobaccoleafspot;tobaccoblackfiretobaccoblackfire;tobaccowildfiretobaccowildfire 分类地位:分类地位:ChromistaChromista藻物界(也称假菌界藻物界(也称假菌界)、OomycotaOomycota,OomycetesOomycetes,PeronosporalesPeronosporales,PeronosporaceaePeronosporaceae病原菌形
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