凝集反应 山大.pdf
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1、-凝集反响凝集反响试管凝集实验:试管凝集实验:实验目的:实验目的:1.掌握试管凝集试验的操作方法,了解其特点和用途。2.掌握试管凝集法的步骤及原理。实验原理:实验原理:1、颗粒型抗原在体外一定条件下有电解质存在,pH,温度恰当与相应抗体相遇,二者发生特异反响,出现肉眼可见的凝集物。参加凝集反响的抗原叫凝集原,而相应的抗体叫凝集素。根据一定的浓度的凝集原和相应的凝集素混合后,会出现肉眼可见的絮状沉淀,可定量的求出抗原的效价。2、试管凝集试验为半定量试验方法,在微生物学检验中常用细菌此实验是伤寒菌作为抗原液与一系列稀释的受检血清混合,保温后观察每管内抗原凝集程度,通常以产生明显凝集现象的最高稀释度
2、作为血清中抗体的效价。3、在试验中,由于电解质浓度和 pH 不适当等原因,可引起抗原的非特异性凝集,出现假阳性反响,因此必须设不加抗体的稀释液作对照组。4、应用此原理可帮助临床诊断和判断患者的病程、预后等。材料和试剂:材料和试剂:灭活的伤寒菌液生理盐水待检血清5ml 吸管、1ml 吸管、小试管、小试管架、水浴箱实验方法:实验方法:1、取试管 6 支,用红笔标记好顺序,依次放在试管架中。2、于第一管内加生理盐水0.9ml,其余各管加生理盐水0.5ml。然后在第一管内参加伤寒免疫血清 0.1ml,用吸管将它与生理盐水吹打混匀后,取出 0.5ml 参加第二管内;再将第二管中的液体吹打均匀,取出0.5
3、ml 参加第三管中,其余各管都照此方法将血清对倍稀释。至第五管时,将试剂混匀后,取出0.5ml 弃去不用。使第六管不含伤寒免疫血清,作为实验的阴性对照管。最后在各管中都参加0.5ml 伤寒菌液。最终 16 试管血清稀释度为 1:20、1:40、1:80、1:160、1:320、对照。.z.-3、轻摇试管架,混匀试管内液体,56C 水浴 1h,观察结果。实验结果:实验结果:图 1 自左向右依次为 16 号试管1、第六管,上清液浑浊,底管有沉淀的细菌,轻摇后分散呈均匀浑浊。为-2、第一管管底有沉淀的细菌,轻摇后分散呈均匀浑浊。为3、第二管轻度浑浊,大多凝集在管底。为+4、第三管清凉,大的凝集块。为
4、+5、第四管中度浑浊,局部凝集块。为+6、第五管浑浊,小的凝集块。为+出现明显可见凝集物+时的血清最高稀释度为血清效价。由此可见,血清效价是 1:160实验结果分析:实验结果分析:其他有的组做出的时间结果是第一管沉淀最多。我觉得不对,抗体与抗原的比例越接近1:1时沉淀最多,并不是稀释度最小的沉淀最多。再者我们的实验结果中一试管中沉淀为褐色的应该不是凝集,而是沉淀的细菌。本卷须知:本卷须知:1、标记试管2、正确使用滴管3、彻底混匀4、温度:56并记录时间5、轻拿试管,观察结果,首先观察对照管平板凝集实验人平板凝集实验人 ABOABO 血型鉴定血型鉴定:实验目的:实验目的:1.掌握平板凝集试验的操
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