2019高中生物 第一章 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序学案(无答案)新人教版选修3.doc
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1、11.21.2 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序【导学目标导学目标】 1.简述基因工程原理及基本操作程序。 2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。 【自主学习自主学习】 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序 1. 的获取。 2 的构建。 3将目的基因导入 。 4目的基因的 与鉴定。 一、目的基因的获取 1.目的基因:主要是指编码蛋白质的 ,也可以是一些具有 。 2基因文库 (1)基因文库的含 义:将含有某种生物不同基因的许多 ,导入 的 群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 (2 )基因文库的种类 基因组文库:含有一种生物的 基因。 部分基因文
2、库:含有一种生物的 基因。 3获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因 (2)利用 PCR 技术扩增目的基因 PCR 的含义:是一项在生物体外 特定 DNA 片段的核酸合成技术。 过程:目的基因受热形成 ,与引物结合,在 的作用下延伸形 成 DNA。 方式:指数扩增2n(n 为扩增循环的次数)。 (3)人工合成法:若 较小, 序列已知,可以人工合成。 二、基因表达载体的构建1.基因表达载体的组成2基因表达载体的功能 (1)使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以 给下一代。 (2)使目的基因 和发挥作用。 三、将目的基因导入受体细胞 1.转化: 进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳
3、定和表达的过程。 2导入植物细胞 (1)方法: 、基因枪法、花粉管通道法等。 (2)农杆菌的特点 易感染 和裸子植物。 Ti 质粒上的 可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞 上。 3导入动物细胞 (1)常用方法: 技术。 (2)常用受体细胞: 。24导入微生物细胞 (1)原核生物特点:繁殖快、多为 、遗传物质相对 等。 (2)对受体细胞的常用处理方法:用 处理细胞,使细胞处于一种能吸收周 围环境中 DNA 分子的生理状态(这种细胞称为 )。 四、目的基因的检测与鉴定 1.检测方法 (1) 技术:检测转基因生物的 上的目的基因;检测目的基因是 否转录出 。 (2)抗原抗体杂交技术:用于检测目的基
4、因是否翻译成 。 2鉴定: 鉴定、抗性鉴定等。 思考交流思考交流 1利用 PCR 技术扩增目的基因时,需要提供哪些物质和条件?2一般情况下,基因工 程操作获得成功的标志是什么?正误判断正误判断 1基因工程操作程序中的核心步骤是基因表达载体的构 建。( ) 2利用反转录法获取的目的基因在构建基因表达载体时,可以不另外添加启动子和终 止子。( ) 3基因表达载体中的启动子和终止子决定着翻译的开始与结束。( ) 4将目的基因导入微生物细胞时,对受体细胞不需做任何处理。( ) 5DNA 分子杂交是在分子水平上进行的目的基因的检测。( ) 【合作探究合作探究】一、什么是基因文库 、基因组文库、cDNA
5、文库?请列表比较基因组文库、cDNA 文库。文库类型cDNA 文库基因组文库概念文库大小小大基因中有无启动子基因中有无内含子基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种间的基因交流可以二、PC R 技术与生物体内 DNA 复制的比较:项目PCR 技术DNA 复制解旋方式解旋酶催化场所主要在细胞核内酶细胞内含有的 DNA 聚合酶温度条件细胞内温和条件不同点结果形成整个 DNA 分3子原理DNA 双链复制(碱基互补配对)原料四种游离的脱氧核苷酸相同点条件模板、ATP、酶等三、获取目的基因的方法有哪些,分别在什么情况下使用? 1如果不知道目的基因的核苷酸序列,可以通过 的方法。 2如果知道目的基
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