BJS201711畜肉中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因的测定.doc
《BJS201711畜肉中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因的测定.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《BJS201711畜肉中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因的测定.doc(7页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、1附件 2畜畜肉肉中中阿阿托托品品、山山莨莨菪菪碱碱、东东莨莨菪菪碱碱、普普鲁鲁卡卡 因因和和利多卡因利多卡因的测定BJS 2017111 范围本方法规定了畜肉中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于畜类肌肉组织中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因的定性确证和定量测定。2 原理用磷酸盐缓冲溶液提取畜类肌肉组织中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因,提取液经离心、净化后用液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。3 试剂和材料以下所用的试剂,除特别注明外均为分析纯,水应为符合 GB/T 6682 规定的一级水。3.1 试剂
2、3.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。3.1.2 乙腈(CH3CN):色谱纯。3.1.3 甲酸(HCOOH):色谱纯。3.1.4 乙酸(CH3COOH):色谱纯。3.1.5 正己烷(C6H14):色谱纯。3.1.6 氢氧化钠(NaOH)。3.1.7 磷酸二氢钾(KH2PO4)。3.1.8氨水(NH3H2O)。3.2 试剂的配制3.2.1 氢氧化钠溶液(200 g/L):称取氢氧化钠(3.1.6)20g,加适量的水溶解,冷却后加水稀释至100 mL,混匀。3.2.2 磷酸二氢钾缓冲溶液(0.1mol/L):称取磷酸二氢钾(3.1.7)13.6g,加水溶解至近1000 mL,用氢氧化钠溶液(3.
3、2.1)调节pH至4.0,加水定容至1000 mL,混匀。3.2.3 甲酸溶液(2 mL/100 mL):移取甲酸(3.1.3)2 mL,加水稀释至 100 mL,混匀。3.2.4 氨水甲醇溶液(2+98):移取氨水(3.1.8)2 mL,加甲醇(3.1.1)稀释至 100 mL,混匀。3.2.5 乙酸溶液(0.1 mL/100 mL):移取乙酸(3.1.4)1 mL,加水稀释至 1000 mL,混匀。3.2.6 甲酸溶液(0.1 mL/100 mL):移取甲酸(3.1.3)1 mL,加水稀释至 1000 mL,混匀。3.3 标准品硫酸阿托品、消旋山莨菪碱、氢溴酸东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因标
4、准品的中文名称、英2文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量和折算系数见附录A表A.1,纯度均98%。3.4 标准溶液的配制3.4.1 标准储备液(100 mg/L):准确称取标准品(3.3),分别折算成含阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱、普鲁卡因和利多卡因10 mg(精确至0.0001 g),置于100 mL烧杯中,加适量的甲醇(3.1.1)溶解,并用甲醇转移并定容至刻度,摇匀,配制成浓度为100 mg/L标准储备液。置-18 以下冰箱中保存,有效期6个月。3.4.2 标准中间液(1.00 g/mL):移取标准储备液(3.4.1)1.00 mL,置100 mL容量瓶中,加甲醇(3.1.1)定容至刻
5、度,摇匀,配制成浓度为1.00 g/mL标准工作液。置于48保存,有效期3个月。3.4.3 标准工作溶液:临用现配。3.5 SPE小柱:Oasis MCX阳离子交换柱,60mg/3mL,或性能相当者。4 仪器和设备4.1 液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源(ESI)。4.2 均质器。4.3 高速冷冻离心机:转速10000 r/min。4.4 固相萃取装置。4.5 涡旋混合器。4.6 超声波清洗器。4.7 氮气吹干仪。4.8 电子天平:感量分别为 0.01 g 和 0.000 1 g。4.9 pH 计:精度 0.01。5 测定步骤5.1 试样的制备与保存取空白或供试肌肉组织,绞碎,并使均质,得
6、空白或试样。5.2 试样的处理5.2.1 提取称取试样 5 g(精确至 0.01g)于 50 mL 具塞离心管中,加入磷酸二氢钾缓冲溶液(3.2.2)20 mL ,加盖后涡旋 2 min,再超声处理 15 min, 4以下 10000 r/min 离心 15min,上清液倒入另一离心管中。残渣中再加入缓冲溶液 20 mL,重复提取一次,合并上清液,滤纸过滤,用上述缓冲溶液 4 mL 洗涤滤纸,收集全部滤液于 50 mL 容量瓶中,用缓冲溶液定容至 50 mL,待净化。5.2.2 净化Oasis MCX 阳离子交换柱使用前依次用 3 mL 甲醇(3.1.1)、3 mL 水和 3 mL 甲酸溶液(
7、3.2.3)活化,保持柱体湿润。取待净化液 5.00 mL 加入 SPE 小柱(3.5),流速控制在 1 mL/min 内,依次用 3 mL 甲酸溶液、3 mL 甲醇、3mL 正己烷(3.1.5)淋洗小柱,弃去全部流出液,在 65 kpa 的负压下,抽干 2 min,最后用氨水甲醇溶液(3.2.4)5 mL 洗脱,收集洗脱液。洗脱液在 40以下氮气吹干,加入甲酸溶液(3.2.6)1.00mL,涡旋 0.5 min,过 0.22 m 滤膜,供测定。35.3 标准工作溶液的制备称取空白试样5 g(精确至0.01 g)于50 mL具塞离心管中,分别加入标准中间液(3.4.2)适量,使其浓度为0.50
8、0、1.00、2.00、5.00、10.0、50.0 ng/mL,经5.2步骤操作,供测定。注:可根据仪器的灵敏度及样品中待测物的实际含量确定标准系列溶液浓度。5.4 液相色谱-串联质谱测定5.4.1 液相色谱参考条件a.色谱柱:C18色谱柱(2.1 x 50 mm,1.8 m),或性能相当者。b.流动相:A:乙腈(3.1.2),B:乙酸溶液(3.2.5),梯度洗脱条件见表1。表1 梯度洗脱条件时间(min)A(%)B(%)0.010901.010903.017833.590104.010905.01090c.柱温:30 。d.流速:0.4 mL/min。e.进样量:5 L。5.4.2 质谱参
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- BJS201711 畜肉中 阿托品 莨菪 普鲁卡 利多 测定
限制150内