茎尖分生组织培养.pptx
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1、一、概念和意义 1.概念茎尖分生组织培养:指对不超过0.1mm的茎尖或几十微米的茎尖进行的培养。特点:可获无病毒苗,操作困难,成苗时间长。普通茎尖培养:对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。第一节茎尖分生组织培养第1页/共42页 茎尖分生组织培养除可以生产脱毒苗外,还具有方法简便,繁殖迅速,遗传性比较稳定,易保持植株的优良性状的优点,在基础理论研究和实际应用中具有重要价值。2.2.意义:1.1.形态建成研究 茎尖分生组织(茎尖分生组织(不带叶原基,不带叶原基,250um1mm1mm)4.4.育种中的应用 与辐射育种结合与辐射育种结合 第2页
2、/共42页二、茎尖分生组织培养一般方法1.材料的制备 健壮枝梢 去除叶片 分成1-2cm 自来水冲洗 消毒 75%的酒精30秒 0.1%升汞或20倍次氯酸钠消毒8-10min 无菌水 修剪剥离茎尖,通常切割下顶端0.20.5 mm叶原基的茎尖(无菌水)接种。第3页/共42页第4页/共42页2.培养基 多为MS培养基及其改良配方,还有White、B5等。3.培养条件(1)温度:2628(2)光照:光培养的效果通常比暗培养好。(3)湿度:与其他器官培养相似。第5页/共42页一、病毒的危害 多数栽培植物,尤其无性繁殖植物,都易受到一种或几种,甚至几十种病毒的侵染。例如,草莓感染6060多种病毒。并且
3、随着栽培时间的推移,侵染病毒的种类越来越多。受病毒侵染的植物生长缓慢、畸形、产量大幅度下降,品质变劣,甚至完全丧失商品价值。因此说,病毒带来极大的危害。第二节脱毒苗的培育和病毒检测第6页/共42页第7页/共42页目前,对细菌和真菌侵染的病害,可以通过药物处理达到治愈的目的,如多菌灵等。但目前,还没有药物能治病毒病。种子一般不带病毒,种子繁殖植物可以得到无菌植株。但对于无性繁殖植物,必须采用一种有效的方法,脱去病毒,才能达到提高产量和质量的目的。第8页/共42页二、病毒侵染的特点二、病毒侵染的特点早早在在4040年年代代,就就有有科科学学家家(White(White等等)发发现现病病毒毒在在根根
4、上上和和茎茎上上的的分分布布是是不不均均匀匀的的,离离根根尖尖和和茎茎尖尖越越近近,病病毒毒的的密密度度越越低低。反反之之,越越高高。即即病病毒毒在在植植物物体体内内的的分分布布是是不不均均匀匀的的,分分生生组组织织一一般无病毒侵染般无病毒侵染。第9页/共42页分生组织之所以能避开病毒侵染,可能有4 4方面原因:1 1、在植物体中,病毒的移动主要靠两条途径,一是通过维管系统,而分生组织中尚未形成维管系统;二是通过胞间连丝,但这条途径病毒移动速度非常缓慢,难以追赶上活跃生长的茎尖和根尖。第10页/共42页第11页/共42页2 2、在旺盛分裂的分生组织中,代谢活动很高,使病毒无法进行复制。3 3、
5、在茎尖中存在高水平内源激素,可以抑制病毒的增殖。4 4、在植物体内存在有一种“病毒钝化系统”,它在分生组织中的活性应最高,因而使分生组织不受侵染。第12页/共42页 以上是四种可能原因,无论哪种说法正确,事实是分生组织一般不带病毒。因此,利用这一原理,进行茎尖培养,培育无病毒苗。第13页/共42页植物脱病毒方法植物脱病毒方法物理方法物理方法化学方法化学方法生物方法生物方法高温处理高温处理茎尖培养茎尖培养微体嫁接微体嫁接珠心培养珠心培养愈伤脱毒愈伤脱毒热处理脱毒热处理脱毒第14页/共42页三、脱毒的方法(一)热处理脱毒法热处理脱毒原理 病毒DNA分子进入细胞后随植物细胞DNA一起复制。热处理并不
6、能杀死病毒,只能钝化病毒活性,使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止,失去传染能力。作为一种物理效应可以加速植物细胞的分裂,使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。第15页/共42页热处理法有:温汤处理(热水浸泡)和热风处理两种。具体方法:第一,热水浸泡处理,适用于切下的材料,在50度左右的温水中浸渍数分钟至数小时,方法简便易行但材料易受伤。第二,热风处理,将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内,处理温度因植物种类、生理状况而异。一般为3540度,短则几十分钟,长达数月。第16页/共42页热处理的优缺点优点:方法简单,效果明显。缺点:1)具有局限性,不能去除所有病毒。只对圆形病毒(苹果花叶病毒),或对线状
7、病毒(马铃薯卷叶病毒)有效;而对杆状病毒(千日红病毒)无效。2)热处理后只有小部分植株能够存活。极易使植物材料受热枯死,造成损失3)延长热处理时间,病毒钝化效果好,同时也可能会钝化植物组织中的抗性因子而降低处理效果。第17页/共42页其它效果其它效果香石竹(康乃馨)在香石竹(康乃馨)在3840下经两个下经两个月处理可除去全部病毒。月处理可除去全部病毒。第18页/共42页 马铃薯在马铃薯在37下处理下处理1020天能除去卷天能除去卷叶病毒。叶病毒。第19页/共42页(二)茎尖培养脱毒 1.茎尖培养脱毒的原理(1)病毒在植物体内的分布 病毒浓度不同,离尖端越远病毒浓度越高。茎尖或根尖离体培养便可获
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