降钙素原(PCT)检测及临床意义.pdf
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1、.降钙素原(PCT)检测及临床意义 一、概述:PCT 是无激素活性的降钙素前肽物质,由 116 个氨基酸组成,分子量为 13 KD 的糖蛋白。PCT 的半衰期为 25-30小时,在体外稳定性很好。健康人血浆 PCT 含量极低.PCT 选择性地对系统性细菌感染、真菌感染及寄生虫感染有反应,而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。许多学者研究发现,全身性细菌、真菌和寄生虫感染时,PCT 水平异常增高,增高的程度与感染的严重程度及预后相关,在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。PCT 水平的监测,对于严重威胁生命的感染性疾病过程和跟踪治疗方案是很有用的
2、,PCT 浓度的升高标志着炎症反应正在进行中,使用足够的抗生素、炎症灶清除术治疗等,PCT 值下降,证明治疗方案正确,预后良好,反之改变治疗方案。PCT 为所有不知病因的炎症性疾病的鉴别诊断提供帮助与支持,如细菌性与毒素性的急性成人呼吸窘迫综合症(ARDS)的鉴别;胆源性与毒素性胰腺炎的鉴别;细菌性与病毒性脑膜炎的鉴别;微生物诱导的发热与非细菌性发热的鉴别,特别是发热待查(FOU)的诊断,病毒感染或自身免疫失调与免疫抑制条件下的急性细菌感染的鉴别,发热的病因的鉴别,如在肿瘤患者中被肿瘤溶解物或化疗诱导与细菌、真菌或其他感染病因区别,早期诊断新生儿和婴儿全身性细菌感染与败血症引起的急性发热;术后
3、常规,包括术后感染预警及用药监测,术后切除感染灶(如腹膜炎、软组织感染)后的治疗指导,监测腹膜炎、吻合口漏和无典型腹部症状的疾病过程;器官移植后的监测,移植前排除急性细菌或其他感染,鉴别急性器官排斥、急性病毒、细菌与真菌感染;长期在 ICU 的患者及长期机械通气患者的监测,监测疾病过程及指导治疗;监测高危患者,早期获得有关并发症和内环境衰退的信息。许多临床研究证明,PCT 在不同医学领域对诊断和指导治疗有很高的价值,与目前所应用的诊断指标相比,PCT在鉴别诊断和控制感染及严重炎症方面提供了额外的信息。随着临床实践性研究的不断深入,临床数据的不断积累,PCT 作为一个全身性细菌感染和脓毒症辅助和
4、鉴别诊断的常规指标将成为共识,并将得到广泛的应用。二、PCT 分子生物学结构:PCT 来自定位于第 11 号染色体上(11P15,4)单拷贝基因(与降钙素基因相关肽为同一基因)。该基因由 2800 个碱基对组成,含 6 个外显子和 5 个内含子,基因全长约 7.6Kb。转录后经特定剪辑产生PCTmRNA,再翻译成降钙素原前体(Pre-PCT),在高尔基复合体及分泌囊中,经一系列水解酶作用最终形成 PCT 氨基酸多肽(aminoPCT),降钙素(CT)及羧基端 21 个 氨基多肽(CT:CCP-1)。三、血清 PCT 来源及可能的生物学机制 正常条件下人血清 PCT 含量极低,约 2.5pg/m
5、l(运用高效液相色谱分析),而成熟 CT 含量约 6.3 pg/ml。髓质甲状腺肿瘤或其他神经内分泌肿瘤患者血清 PCT 及其组分均增高,组分相对含量也发生变化。在一些非甲状腺损伤如慢性肾衰、吸入性烧伤、急性细菌感染、中风、败血症等患者血清 PCT 及其组分也均增高,有些甚至成倍的上升,而 CT 略微升高,说明除甲状腺髓质细胞分泌贮存 PCT 外,仍有其他细胞具有这些功能。血清 PCT 升高的可能的生物学机制:靶细胞(PBMCs 等)在 LPS 各种败血症相关因子作用下应急分泌 PCT,这种应急分泌超过细胞后转录过程(由 Pro-CT 分解为 aminoPCT、CT、CT:CCP-1)或后转换
6、过程缺少必需的水解酶,从而导致实验所观察到的 PCT 成倍增长,而 CT 水平不变或稍增高。四、检测方法及正常参考值范围目前除了费时不易自动化的凝胶层析法及高效液相色谱分析法,检测 PCT 较特异与敏感的分析方法有:双抗夹心免疫化学发光法(双抗夹心法)和放射免疫分析法(RIA)。.双抗夹心法运用双单克隆抗体,其一作为捕获抗体直接结合 PCT96-106 氨基酸残基即未成熟 CT:CCP-1 部分,另一作为示踪抗体直接结合 PCT70-76 氨基酸残基,即未成熟 CT 分子,人工合成的 PCT 作为标准。该方法比较特异无交叉反应,其检测最低为 10pgml-1l,标准曲线线性范围为 10-60p
7、gml-1。批内、批间变异系数分别为 7和 8。该法已有商品试剂,所需时间较短,易自动化,但该法不能检测到正常人血清中 PCT。RIA 使用一种对人工合成的aminoPCT 特异的多克隆抗体 RIB7。RIB7 直接作用 PCT 的 aminoPCT 部分,故 RIA 既能检测游离的 PCT,又能检测结合型的 PCT,也可检测降钙素基因相关前体(Pro-CGRP),此法可信的敏感度为 4 pgml-1。线性范围 10-77pgml-1,50的结合游离比为 140 pgml-1,该法能检测正常人血清 PCT,故较双抗夹心法敏感,另一优点是 RIA 与患者病程呈现正相关(r=0.47,p=0.07
8、1)。RIA 缺点是所需时间较长。五、PCT 检测在不同临床科系的应用:1.血液肿瘤科-对因接受化疗或骨髓移植而引起的免疫抑制和中性粒细胞减少的患者来说,严重的感染是致命的并发症,化疗期间有多种原因引起发热。发热通常是细菌、病毒或真菌感染的症状,但有时是治疗过程中对药物的反应。肿瘤细胞溶解引起的发热较常见,大多数病例的发热源仍不清楚。PCT 有助于对细菌和真菌引起的系统性感染作出明确的诊断。即使是化疗患者,PCT 对是否有败血症感染也能作出可靠的检测和评估。中性粒细胞减少症患者常常缺乏炎症的特异性症状。PCT 在免疫抑制和中性粒细胞减少患者中的表现与无免疫抑制患者中观察的结果相似。其诊断价值已
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