动物细胞融合和单克隆抗体 (2).ppt
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1、动物细胞融合和单克隆抗体现在学习的是第1页,共22页考考纲纲考情考情 2013海南海南 2014新课标新课标高考指数高考指数:动物动物细细胞融合与胞融合与单单克隆抗体克隆抗体现在学习的是第2页,共22页知识回顾知识回顾1.1.动物细胞融合动物细胞融合过程:过程:动物细胞动物细胞A A动物细胞动物细胞B B诱导,融合诱导,融合2 2个完整的杂个完整的杂交细胞交细胞ABAB有丝分裂有丝分裂(膜融合、质融合)(膜融合、质融合)(核融合)(核融合)突破了突破了有性杂交方法的局限有性杂交方法的局限,使远缘杂交,使远缘杂交成为可能成为可能。主要是应用主要是应用杂交瘤技术制造单克隆抗体杂交瘤技术制造单克隆抗
2、体2.2.意义:意义:3.3.应用:应用:三、动物细胞融合三、动物细胞融合方法?方法?现在学习的是第3页,共22页4.植物体细胞杂交和动物细胞融合比较植物体细胞杂交和动物细胞融合比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理融合前处理融合前处理诱导方法诱导方法用途用途意义意义细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、果胶酶去壁果胶酶去壁果胶酶去壁果胶酶去壁用胰蛋白酶用胰蛋白
3、酶用胰蛋白酶用胰蛋白酶使细胞分散使细胞分散使细胞分散使细胞分散物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学、物理、化学、物理、化学、物理、化学、生物生物生物生物方法方法方法方法获得部分或完整获得部分或完整获得部分或完整获得部分或完整植株植株植株植株主要用于制备主要用于制备主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体考点疑难分析考点疑难分析克服远源杂交克服远源杂交不亲和的障碍不亲和的障碍突破有性杂交方法突破有性杂交方法的局限,的局限,使远缘杂使远缘杂交成为可能交成为可能(讨论归纳)(讨论归纳)现在学习的是第4页,共22页 高考仿真题练高考仿真题练1.1.
4、(2016(2016海口模拟海口模拟)(1)(1)动物细胞动物细胞诱导融合运用的原理诱导融合运用的原理是是_,该过程中区别于原生质体融合的该过程中区别于原生质体融合的方法是用方法是用_处理。处理。细胞膜具有流动性细胞膜具有流动性灭活病毒灭活病毒现在学习的是第5页,共22页2.2.科学工作者用绿色和红色荧光材料,分别标记人和鼠的科学工作者用绿色和红色荧光材料,分别标记人和鼠的细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后,细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后,起初一半膜发出绿色荧光,另一半膜发出红色荧光,一段起初一半膜发出绿色荧光,另一半膜发出红色荧光,一段时间后,两种颜色的荧光点
5、均匀分布,如图所示。请分析时间后,两种颜色的荧光点均匀分布,如图所示。请分析回答:回答:该实验结果说明了细胞膜该实验结果说明了细胞膜 ,这是因为,这是因为若在两个细胞融合成一个细胞后,将融合细胞置于若在两个细胞融合成一个细胞后,将融合细胞置于0条件下再保持条件下再保持40min,则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧,则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧光,另一半膜发红色荧光,这说明光,另一半膜发红色荧光,这说明具有一定的流动性具有一定的流动性 构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的 膜的流动性受温度影响,在低温下分子的运动受抑制膜的流动性受温度影响,在低温
6、下分子的运动受抑制现在学习的是第6页,共22页1.单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念单个单个B B细胞克隆产生的细胞克隆产生的化学性质化学性质单一、特异性强单一、特异性强的抗体的抗体将将单个单个B B淋巴细胞淋巴细胞和和骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞融合成融合成杂交瘤细胞杂交瘤细胞分泌的分泌的四、单克隆抗体四、单克隆抗体(1)(1)单克隆单克隆抗体:抗体:(2)(2)制备原理:制备原理:知识回顾知识回顾现在学习的是第7页,共22页B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤(未融合的(未融合的B、瘤)、瘤)(一选)(一选)选择选择性培养基性培养基:只:只有有杂交瘤细胞杂交瘤细胞才能存活才能存活获得产生相应获得产生相应抗体
7、的抗体的B细胞细胞(二选):(二选):选选能产生所需能产生所需专专一抗体的杂交瘤一抗体的杂交瘤细胞细胞体外培养体外培养体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点:杂交瘤细胞特点:既能产生特异性既能产生特异性抗体,又能大量抗体,又能大量增殖。增殖。2.单克隆抗体单克隆抗体制备过程制备过程现在学习的是第8页,共22页B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导融诱导融合合B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择培养基选择培养基杂交瘤细胞杂交瘤细胞(B-瘤细胞)瘤细胞)克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测产生所需抗产生所需抗体的体的杂交瘤杂交瘤细胞细胞体外培养体外培养小鼠腹
8、腔内增殖小鼠腹腔内增殖单克隆抗体单克隆抗体 2.单克隆抗体制备过程图解单克隆抗体制备过程图解(用箭头和文字写出概念图)(用箭头和文字写出概念图)知识自主构建知识自主构建提纯提纯(讨论归纳)(讨论归纳)共有几种细胞?共有几种细胞?现在学习的是第9页,共22页(1 1)为为什什么么选选用用小小鼠鼠骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞与与B B淋淋巴巴细细胞融合胞融合?小鼠骨髓瘤细胞可小鼠骨髓瘤细胞可大量增殖大量增殖,B B淋巴细胞淋巴细胞能产生抗体能产生抗体。(2 2)骨髓瘤细胞是癌细胞吗)骨髓瘤细胞是癌细胞吗?有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞,有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞,具有转移能力的肿瘤细胞,称为癌细胞,具
9、有转移能力的肿瘤细胞,称为癌细胞,所以说,所以说,瘤细胞不能等于癌细胞瘤细胞不能等于癌细胞。感悟拓展感悟拓展现在学习的是第10页,共22页(3 3)整个制备过程为何要经过两次筛选)整个制备过程为何要经过两次筛选?第一次第一次筛选得到筛选得到杂交瘤细胞杂交瘤细胞(多种)(多种)第二次第二次需先在多孔培养板上,在每孔只有需先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出再筛选出能产生特异性抗体的细胞群能产生特异性抗体的细胞群。现在学习的是第11页,共22页3.3.单克隆抗体的应用:单克隆抗体的应用:(1 1)作为诊断试剂:作为诊断试剂:准
10、确识别各种抗原物质,准确识别各种抗原物质,并与抗原特异性结合并与抗原特异性结合(2 2)用于用于运载药物:制成运载药物:制成“生物导弹生物导弹”治疗疾病:主要用于癌症治疗治疗疾病:主要用于癌症治疗优点:准确、高效、简易、快速优点:准确、高效、简易、快速单克隆抗体的单克隆抗体的优点:优点:优点优点:疗效高、毒副作用小疗效高、毒副作用小特异性强,灵敏度高,特异性强,灵敏度高,能大量制备。能大量制备。现在学习的是第12页,共22页(20132013年年 海南卷)海南卷)31.31.(15(15分分)单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒I I型型HSV-I)HSV-I)可引起水可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制
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