无菌实验室操作规程.doc
《无菌实验室操作规程.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《无菌实验室操作规程.doc(6页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、无菌试验室操作规程为无菌试验室的操作,无菌试验室的保护供给一个标准化规程,保证明验室操作顺当进展,保证明验结果的准确性。无菌试验室操作程序很重要,安徽人和净化为您供给。操作程序1、微生物检验的预备工作1.2 操作前的预备:1.2.1 无菌试验室使用前必需翻开无菌试验室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时翻开超净台进展吹风。以保证无菌试验室的干净度符合要求。1.2.2 微生物检验玻璃仪器的清洗1.2.2.1 按技术要求将各种玻璃仪器进展清洗,可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗,然后用自来水充分冲洗干净。热的肥皂水去污力气更强,可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉和去污粉较难冲洗干净
2、而常在器壁上附有一层微小粒子,故要用水屡次甚至10次以上充分冲洗,或可用稀盐酸摇洗一次,再用水冲洗,然后倒置于磁盘或木架上, 在室内晾干,放烘箱烘干。1.2.2.2 玻璃器皿经洗涤后,假设内壁的水是均匀分布成一薄层,表示油垢完全洗净,假设挂有水珠,则还需用洗涤液浸泡数小时,然后再用自来水充分冲洗。1.2.2.3 装有固体培育基的器皿应先将其弃去,然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2 煤酚皂溶液来苏尔或0.25洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时,再用上法洗涤。带 病原菌的培育物最好先行高压蒸汽灭菌,然后将培育物倒去,再进展洗涤。1.2.2.4 盛放一般培育基用的器皿经上法洗涤后,即可使用,假设需
3、准确配制化学药品, 或做科研用的准确试验,要求自来水冲洗干净后,再用蒸馏水淋洗三次,晾干或烘干后备用。1.2.2.5 预备好所用的各种试剂,做好一般养分琼脂或其他选择的培育基。1.3 消毒、灭菌微生物检验用器材及场所必需进展灭菌或消毒处理,不同的对象承受不同的处理方法。1.3.1. 高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等,置高压杀菌锅内,一般承受121灭菌半小时,固然不同的培育基有不同的要求,应分别处理1.3.2. 火焰灭菌: 接种针、接种环等可直接火焰灭菌1.3.3. 高温枯燥灭菌: 各种玻璃器皿、注射器、吸管等,置于燥箱中160灭菌2小时 。1.3.4. 一 般消毒:无菌试验室内的凳、工作台
4、、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进展灭菌,必需用其他方法进展消毒处理,承受2%石炭酸或来苏儿水溶液擦拭消毒,工作人员的手也用此法进展消毒。1.3.5. 空气的消毒: 开启紫外灯照耀3060分钟即可。2、培育基的配制、验证及存储培育基制备的质量将直接影响微生物生长。由于各种微生物对其养分要求不完全一样, 培育目的的不同,各种培育基制备要求如下。2.1. 依据培育基配方的成分按量称取,然后溶于蒸馏水中,在使用前对应用的试剂药品应进展质量检验。2.2. PH测定及调整:PH测定要在培育基冷至室温时进展,因在热或冷的状况下,其PH 有确定差异,当测定好时,按计算量加进碱或酸混匀后,应再测试一次。
5、培育基PH值确定要正确,否则会影响微生物的生长或影响结果的观看。但需留意因高压灭菌可影响一些培育基的PH降低或上升,故不宜灭菌压力过高或次数太多,以免影响培育基的质量,指示剂、往氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加进。2.3. 培育基需保持澄清,便于观看细菌的生长状况,培育基加热煮沸后,可用脱脂棉花或绒布过滤,以除往沉淀物,必要时可用鸡蛋白澄清处理,所用琼脂条要预先洗净晾干后使用,避开因琼脂含杂质而影响透亮度。2.4. 培育基的灭菌既要到达完全灭菌目的,又要留意不因加热而降低其养分价值,一般12115min即可,如为含有不耐高热物质的培育基如糖类、血清、明胶等,则应承受低温灭菌或间歇法灭菌,一
6、些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等,待根底琼脂高压灭菌后凉至50左右再加进。2.5. 每批培育基制备好后,应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。假设是生化培育 基,使用标准菌株接种培育,观看生化反响结果,应呈正常反响,培育基不应贮存过久,必要时可置4冰箱存放。2.6. 目前各种枯燥培育基较多,每批需用标准菌株进展生长试验或生化反响观看,各种培育基用相应菌株生长试验良好前方可应用,购进的或存放过久的枯燥培育基,在配制 时也应测PH,使用时需依据产品说明书用量和方法进展。2.7. 每批制备的培育基所用化学试剂、灭菌状况及菌株生长试验结果、制作职员等应做好记录,以备查询。3、样品的采集
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 无菌 实验室 操作规程
限制150内