EDMAN降解法学习教程.pptx
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1、蛋白质测序蛋白质测序中文名称:蛋白质测序中文名称:蛋白质测序 英文名称:英文名称:protein sequencing protein sequencing 定义:测定蛋白质分子的氨基酸排列顺序。定义:测定蛋白质分子的氨基酸排列顺序。目前自动化的蛋白质测序仪系从肽链的目前自动化的蛋白质测序仪系从肽链的N N端测端测入。入。第1页/共20页 当前,所谓蛋白质测序,主要指的是当前,所谓蛋白质测序,主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构结构(Primary structure)(Primary structure)包括组成蛋白包括组成蛋白质的多肽链数目
2、、多肽链的氨基酸顺序,质的多肽链数目、多肽链的氨基酸顺序,它是蛋白质生物功能的基础。它是蛋白质生物功能的基础。蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。研究的基础。第2页/共20页测序要求测序要求1 1 样品必需纯(样品必需纯(97%97%以上)以上)2 2 知道蛋白质的分子量;知道蛋白质的分子量;3 3 知道蛋白质由几个亚基组成;知道蛋白质由几个亚基组成;4 4 测定蛋白质的氨基酸组成;并根据分测定蛋白质的氨基酸组成;并根据分子量计算每种氨基酸的个数。子量计算每种氨基酸的个数。5 5 测定水解液中的氨量,计算酰胺的含测定水解液中的氨量,计算酰胺的含量。量
3、。第3页/共20页EdmanEdman降解(降解(EdmandegradationEdmandegradation):是测定蛋):是测定蛋白质一级结构的方法,主要是从蛋白质或多肽白质一级结构的方法,主要是从蛋白质或多肽氨基末端进行分析。由埃德曼(氨基末端进行分析。由埃德曼(P PEdmanEdman)在)在上世纪上世纪5050年代所创立。分为耦合、切割、萃取、年代所创立。分为耦合、切割、萃取、转化、鉴定等几个步骤。转化、鉴定等几个步骤。第4页/共20页1.偶联1 1).定义:定义:是由两个有机化学单位(moiety)进行某种化学反应而得到一个有机分子的过程实验过程第5页/共20页 2).异硫氰
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