干旱盐碱胁迫下禾本科植物谷胱甘肽还原酶的活性课件.ppt
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1、答 辩 人:关 春 龙专 业:生物工程干旱、盐碱胁迫对苗期干旱、盐碱胁迫对苗期羊草羊草GSH-Px活性的影响活性的影响 指导教师:崔 喜 艳材料与方法 结果分析与讨论结论与致谢目录前言羊草(羊草(Leymus chinesis)是多年生根茎型禾本科植物,具有无性繁殖)是多年生根茎型禾本科植物,具有无性繁殖能力强、生产力高、耐干旱、耐贫瘠、耐盐碱等生物生态学特性。能力强、生产力高、耐干旱、耐贫瘠、耐盐碱等生物生态学特性。谷谷胱甘肽过氧化物酶胱甘肽过氧化物酶(GSH一一PX)即谷胱甘肽即谷胱甘肽:H2O氧化还原酶氧化还原酶,分子量分子量76009600,是一种水溶性四聚蛋自酶,是一种水溶性四聚蛋自
2、酶,其其四个亚基处在一个平面上,四个亚基处在一个平面上,且均且均有一个硒原子有一个硒原子。具有催化活性的硒半胱氨酸位于酶分子具有催化活性的硒半胱氨酸位于酶分子178个氨个氨基酸的第基酸的第35位置上,在酶分子表面凹穴的活性部位,易于接触有机氢位置上,在酶分子表面凹穴的活性部位,易于接触有机氢过氧化物并使其还原为有机羟过氧化物并使其还原为有机羟化化物物;GSH一一PX也可使也可使H2O2变成变成H2O,以消,以消除氧化胁迫。除氧化胁迫。还原型谷胱甘肽还原型谷胱甘肽(GSH)在催化反应中作为氢供体,氧化型在催化反应中作为氢供体,氧化型谷胱甘肽谷胱甘肽(GSSG)在谷胱甘肽还原酶在谷胱甘肽还原酶(G
3、SSG一一R)作用下,还原成作用下,还原成GSH。本研究以不同盐碱化程度及干旱程度下的羊草为试验对象,探讨本研究以不同盐碱化程度及干旱程度下的羊草为试验对象,探讨羊草体内谷胱甘肽过氧化物酶对盐碱和干旱环境的活性,进一步揭示羊草体内谷胱甘肽过氧化物酶对盐碱和干旱环境的活性,进一步揭示羊草抗干旱、盐碱及适应不同生镜的机制,力求为治理退化草地提供羊草抗干旱、盐碱及适应不同生镜的机制,力求为治理退化草地提供理论依据理论依据材料与方法实验材料与材料培养1.羊草2.吉林农业大学生命科学学院生物化学515研究室,RXZ型智能人工气候箱材料培养方法与管理1.盆栽砂培2.人工气候箱培养,出苗前每天上午8:00-
4、8:30分浇去离子水50mm透灌,苗出齐后浇Hoagland营养液,照光时间12h(早7:00-晚19:00)。白天温度为282,夜间温度为16212盐碱水、PEG6000的配置及浓度2 23 34 46 65 51 11.试验方法 用0.2 mo l/L pH 6.2的磷酸缓冲液(含 1 mmo l/L EDTA-2Na,5%的水溶性PVP)作为谷胱甘肽过氧化物酶(GSH一PX)的提取介质,偏磷酸为酶促反应的蛋白质沉淀剂,二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)与 GSH显色反应3min,在412 nm测定酶管和非酶管的OD值,以测定谷胱甘肽过氧化物酶的活性。测定项目与方法3 31 16 65 54
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