荧光显微镜的结构及荧光染色.pptx
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1、会计学1荧光显微镜的结构及荧光染色荧光显微镜的结构及荧光染色1.了解荧光显微镜的基本构成和基本原理。了解荧光显微镜的基本构成和基本原理。2.初步掌握荧光显微镜的调节步骤和使用。初步掌握荧光显微镜的调节步骤和使用。实验目的实验目的第1页/共18页实验用品实验用品Olympus荧光显微镜,载玻片,盖玻片,擦镜纸,吖啶橙染料等实验用材料。第2页/共18页实验内容实验内容一、荧光显微镜的成像原理一、荧光显微镜的成像原理二、荧光显微镜的基本结构二、荧光显微镜的基本结构三、荧光显微镜的使用方法三、荧光显微镜的使用方法四、观察动植物细胞的自发荧光四、观察动植物细胞的自发荧光和继发性荧光和继发性荧光第3页/共
2、18页一、显微镜的成像原理一、显微镜的成像原理 荧光显微镜是利用一定波长的光使样品受到激发,产生不同颜色的荧光,以用来观察和分辨样品中某些化学成分和细胞组分的一种显微镜。自发荧光自发荧光:组织、细胞不经荧光色素染色,在紫外光照射下,某些成分所呈现的荧光,称为自发荧光。继发性荧光继发性荧光:组织、细胞经荧光色素染色,由于荧光色素和组织细胞内的某种成分结合后而呈现的荧光为继发性荧光。第4页/共18页二、荧光显微镜的基本结构和光路二、荧光显微镜的基本结构和光路图图1.基本结构基本结构:光源:光源:超高压汞灯,用以产生强光照(含大量紫外光,蓝紫光)滤片系统滤片系统:激发滤色镜,提供一定波长范围的激发光
3、.阻断滤色镜,透过相应波长范围的荧光,阻断 或吸收剩余激发光.二向分色镜,透射长波光线和反射短波光线的功能.荧光物镜荧光物镜普通显微镜普通显微镜第5页/共18页荧光显微镜结构图荧光显微镜结构图第6页/共18页荧光显微镜的光路图荧光显微镜的光路图第7页/共18页三三 荧光显微镜的使用方法荧光显微镜的使用方法1.汞灯的安装汞灯的安装:切断电源切断电源,从插座上拔下电源线从插座上拔下电源线.开启灯室开启灯室,将汞灯安装到灯架上将汞灯安装到灯架上.严防手指触摸灯管严防手指触摸灯管,特别是中心球状部分特别是中心球状部分,以免污染以免污染 汞灯装入灯室汞灯装入灯室,封上灯室盖后封上灯室盖后,方可按通方可按
4、通电源电源.(一)荧光显微镜的调整方法(一)荧光显微镜的调整方法第8页/共18页2.汞灯的点亮汞灯的点亮:确信各连接部分皆处于正常状态 接通启动器电源开关,按下起动钮,汞灯点亮,经2-3min,电弧趋于稳定.点亮后 15min内,勿切断电源,一旦汞灯熄灭,在5min或稍长时间内,不许重新点亮,待汞灯冷却后,始能再次点亮.第9页/共18页3.汞灯的调中汞灯的调中:开启光阀开启光阀.开放孔径光阑和视场光阑至最大开度开放孔径光阑和视场光阑至最大开度,即即“Min”-“Max”.旋转物镜转换器旋转物镜转换器,无物镜的空洞进入光无物镜的空洞进入光路路,旋下防尘盖光线射向镜台旋下防尘盖光线射向镜台.载物台
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