【公开课件】基因工程的基本操作程序(第2课时)课件高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3.pptx
《【公开课件】基因工程的基本操作程序(第2课时)课件高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《【公开课件】基因工程的基本操作程序(第2课时)课件高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3.pptx(35页珍藏版)》请在得力文库 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、The basic operating procedures of genetic engineeringy基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序目录目录CONTENTS习题巩固习题巩固目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞123将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞基因表达载体基因表达载体受体细胞受体细胞导入导入动物动物植物植物微生物微生物将目的基因导入不同受体将目的基因导入不同受体细胞的细胞的方法有何不同方法有何不同?将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞常用的受体细胞:常用的受体细
2、胞:有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。方法方法植物细胞:植物细胞:动物细胞:动物细胞:微生物细胞:微生物细胞:花粉管通道法、农杆菌转化法、基因枪法花粉管通道法、农杆菌转化法、基因枪法显微注射技术、病毒介导法显微注射技术、病毒介导法Ca2+处理法处理法(感受态细胞法感受态细胞法)由于受体细胞有植物、动物、微生物之分,以及目的基因导入由于受体细胞有植物、动物、微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的方法不同,因此,受体细胞的方法不同,因此,基因表达载体的构建也会有差别基因表达载体的构建也会有差别。用用微量注射器微量注射器将
3、含目的基因的将含目的基因的DNADNA溶液溶液直接注入直接注入子房子房中;中;(2)(2)操作方法操作方法:方法方法1 1:花粉管通道法花粉管通道法(1)(1)实例实例:我国科学家独创的一种方法,将我国科学家独创的一种方法,将BtBt基因导入棉花细胞。基因导入棉花细胞。培育培育出了出了“转基因抗虫棉转基因抗虫棉”A.A.子房注射:子房注射:花粉管通道法导入外源花粉管通道法导入外源DNADNA将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞植物细胞植物细胞在在植物授粉后植物授粉后一定时间内,一定时间内,剪去柱头剪去柱头,将,将DNADNA溶液滴在溶液滴在花柱切面花柱切面,使目的基因通过,使目的基因通
4、过花粉管通道花粉管通道进入胚囊。进入胚囊。B.B.花柱滴加:花柱滴加:花粉落到柱头上刺花粉落到柱头上刺激花粉管萌发并生激花粉管萌发并生长至子房长至子房滴管蘸取外源滴管蘸取外源DNADNA溶液涂抹雌溶液涂抹雌蕊柱头蕊柱头外源外源DNADNA沿花粉管沿花粉管通道进入胚囊通道进入胚囊外源外源DNADNA进入受精卵进入受精卵DNADNA随机整合随机整合将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞植物细胞植物细胞将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞花粉管通道法花粉管通道法优点利用植物授粉后形成的天然花粉管通道植物授粉后形成的天然花粉管通道,将外源基因携带进 入胚囊,此时的受精卵未形成细胞壁受精卵
5、未形成细胞壁,且正在进行活跃的 DNA复制,容易将外源容易将外源DNA片段整合到受体基因组中片段整合到受体基因组中。操作简单、技术成本低,免去了组织培养以及诱导再生植株 的全套人工培养过程。受体细胞:受体细胞:受精卵受精卵将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法转化转化 目的基因进入目的基因进入_内,并且在受体细胞内维持内,并且在受体细胞内维持_和和_的过程。的过程。受体细胞受体细胞稳定稳定表达表达 实质是基因重组基因重组。农杆菌的特点农杆菌的特点a.a.农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下能在自然条件下侵侵染染_植物和
6、植物和_植物,对大多数植物,对大多数植物植物没有侵染能力没有侵染能力。双子叶双子叶裸子裸子单子叶单子叶方法方法2 2:农杆菌转化法农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法农杆菌的特点农杆菌的特点 b.b.农杆菌细胞内含有农杆菌细胞内含有 ,当它侵染植物细胞后,能将,当它侵染植物细胞后,能将TiTi质粒上质粒上的的 (可转移的(可转移的DNADNA)转移)转移到被侵染的细胞,并且将其整合到该细到被侵染的细胞,并且将其整合到该细胞的胞的 上。上。TiTi质粒质粒T T-DNA-DNA染色体染色体DNADNATiTi质粒质粒T-DNAT-DNA农杆菌农杆菌当植
7、物体受到损伤时,伤口处的当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会细胞会分泌大量酚类化合物分泌大量酚类化合物,吸,吸引农杆菌移向这些细胞引农杆菌移向这些细胞方法方法 将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养,然后将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养,然后筛选转化细胞,并再生成植株;筛选转化细胞,并再生成植株;可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液一段时间,然后可以将花序直接浸没在含有农杆菌的溶液一段时间,然后培植植株并获得种子,再进行筛选、鉴定等。培植植株并获得种子,再进行筛选、鉴定等。受体细胞为受体细胞为_体细胞体细胞受体细胞为受体细胞为_受精卵受精卵将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受
8、体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法 _插入Ti质粒的_中形成重组Ti质粒重组Ti质粒转入_转化植物细胞目的基因插入植物细胞中的_上目的基因在植物细胞中稳定存在并_表达表达目的基因目的基因TDNA农杆菌农杆菌染色体染色体DNA将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法Ti质粒目的基因构建表达载体含目的基因的重组Ti质粒转入农杆菌含重组Ti质粒的农杆菌导入植物细胞表现出新性状的植物将目的基因插入染色体DNA中植物细胞两次拼接两次拼接第一次拼接:第一次拼接:目的基因拼接到目的基因拼接到TiTi质粒的质粒的T-DNAT-DNA上;上;第二次拼接第二次拼接(非人工操作非人工操作):
9、被插入目的基因的被插入目的基因的T-DNAT-DNA拼接到受体拼接到受体 细胞染色体的细胞染色体的DNADNA上。上。将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法两次导入两次导入第一次导入:第一次导入:将含目的基因的将含目的基因的重组重组TiTi质粒导入农杆菌;质粒导入农杆菌;第二次导入第二次导入(非人工操作非人工操作):含目的基因的含目的基因的T-DNAT-DNA导入受体细胞。导入受体细胞。将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌转化法方法方法3 3:基因枪法基因枪法适用于单子叶
10、植物适用于单子叶植物 基因枪法又称微弹轰击基因枪法又称微弹轰击法,是法,是利用压缩气体产生的利用压缩气体产生的动力动力,将包裹在金属颗粒表,将包裹在金属颗粒表面的表达载体面的表达载体DNA打入受体打入受体细胞中细胞中,使目的基因与其整,使目的基因与其整合并表达的方法。合并表达的方法。方法方法1 1:显微注射法显微注射法(2)(2)操作程序:操作程序:(1)(1)受体细胞:受体细胞:构建基因表达载体构建基因表达载体并并提纯提纯动物的动物的受精卵受精卵中中显微注射显微注射早期胚胎早期胚胎获得具有获得具有新性状新性状的动物的动物胚胎移植胚胎移植受精卵受精卵雌性动物雌性动物输卵管或子宫输卵管或子宫个体
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 公开课件 公开 课件 基因工程 基本 操作 程序 课时 下学 生物 人教版 2019 选择性 必修
链接地址:https://www.deliwenku.com/p-89736437.html
限制150内