黄曲霉毒素的检测.pptx
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1、会计学1黄曲霉毒素的检测黄曲霉毒素的检测第1页/共58页真菌毒素简介真菌毒素简介1黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义2黄曲霉毒素的种类及性质黄曲霉毒素的种类及性质3现有检测方法介绍现有检测方法介绍4中药黄曲霉毒素检测药典收载状况中药黄曲霉毒素检测药典收载状况5药典检测方法详解药典检测方法详解6 安全防护措施安全防护措施7中药中黄曲霉毒素检测方法研究中药中黄曲霉毒素检测方法研究第2页/共58页真菌毒素简介真菌毒素简介n n是真菌在适宜的环境条件下,在食品或饲料里生长所产生的代谢产物,对人类和动物都有害第3页/共58页真菌毒素简介真菌毒素简介毒素名称毒素名称 毒素来源毒素来源 毒性毒性 黄曲
2、霉毒素(常见毒素)黄曲霉、寄生曲霉等肝毒性黄绿青霉毒素 黄绿青霉 神经毒性橘青霉毒素橘青霉肾毒性黄天精和环氯素岛青霉肝毒性T2毒素拟分枝镰刀菌和梨孢镰刀菌心衰、出血第4页/共58页黄曲霉毒素的起源黄曲霉毒素的起源 第一次发现黄曲霉毒素的起源事件:第一次发现黄曲霉毒素的起源事件:第一次发现黄曲霉毒素的起源事件:第一次发现黄曲霉毒素的起源事件:19601960年,英国发现有年,英国发现有1010万只火鸡死于一种以前没见过的病,被称为万只火鸡死于一种以前没见过的病,被称为“火鸡火鸡X X病病”,主要症状为食欲减退,羽翼下垂,染病后昏睡死亡,主要症状为食欲减退,羽翼下垂,染病后昏睡死亡,死时头脚向后伸
3、。解剖可见肝出血、坏死,肾肿大。再后来鸭子也被死时头脚向后伸。解剖可见肝出血、坏死,肾肿大。再后来鸭子也被波及。追根溯源,最大的嫌疑是饲料。这些可怜的火鸡和鸭子吃的是波及。追根溯源,最大的嫌疑是饲料。这些可怜的火鸡和鸭子吃的是花生饼。花生饼是花生榨油之后剩下的残渣,富含蛋白质,是很好的花生饼。花生饼是花生榨油之后剩下的残渣,富含蛋白质,是很好的禽畜饲料。科学家们很快从花生饼中找到了罪魁祸首,一种真菌产生禽畜饲料。科学家们很快从花生饼中找到了罪魁祸首,一种真菌产生的毒素。它被命名为的毒素。它被命名为“aflatoxin aflatoxin”,就是现在所说的黄曲霉毒素。,就是现在所说的黄曲霉毒素。
4、第5页/共58页黄曲霉毒素黄曲霉毒素点击录入内容点击录入内容点击录入内容点击录入内容显微镜下的黄曲霉第6页/共58页黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义 n n毒性极强毒性极强19931993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHOWHO)的)的癌症研究机构划定为癌症研究机构划定为类致癌物,是一种毒性类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质,仅次肉毒霉素,是目前已知极强的剧毒物质,仅次肉毒霉素,是目前已知霉菌中毒性最强的。霉菌中毒性最强的。第7页/共58页黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义 n n毒性极强毒性极强急性毒性急性毒性急性毒性急性毒性:比氰化钾大:比氰化钾大
5、1010倍,比砒霜大倍,比砒霜大6868倍。倍。慢性毒性慢性毒性慢性毒性慢性毒性:肝脏损害,呈急性肝炎、出血性坏:肝脏损害,呈急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。脾脏和胰脏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。脾脏和胰脏也有轻度的病变。也有轻度的病变。第8页/共58页黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义 n n存在极其广泛存在极其广泛主要存在于土壤,动植物及各种坚果中。家庭自主要存在于土壤,动植物及各种坚果中。家庭自制发酵食品等也经常发现黄曲霉毒素。一般在热制发酵食品等也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区,食品中黄曲霉毒素的检出率比带和亚热带地区,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高
6、。未能及时晒干或储藏不当的粮食容易产生,较高。未能及时晒干或储藏不当的粮食容易产生,在农作物正常的生长期中也可以形成。在农作物正常的生长期中也可以形成。第9页/共58页黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义n n存在极其广泛存在极其广泛中药中容易产生黄曲霉毒素的有:种子、果实、中药中容易产生黄曲霉毒素的有:种子、果实、粮谷类中药材或含此类药材的中成药;发酵类粮谷类中药材或含此类药材的中成药;发酵类中药;贮存期中药材、中成药中药;贮存期中药材、中成药;油性成分多的中油性成分多的中药材药材第10页/共58页欧盟欧盟(g/kg)德国德国(g/kg)中国香港中国香港(g/kg)中国(中国(g/kg)
7、黄曲霉毒素黄曲霉毒素Alfatoxin B1食用花生食用花生 8,食用坚果、玉米、调味品食用坚果、玉米、调味品 5,食用干制水果及其制品食用干制水果及其制品 2,生乳、热处理牛奶,婴幼儿食生乳、热处理牛奶,婴幼儿食品品 0.1,婴幼儿奶粉婴幼儿奶粉 0.1,婴幼儿食疗食品婴幼儿食疗食品0.1.药材药材 2药材药材 5玉米、花生及其制品玉米、花生及其制品 20,大米、植物油大米、植物油 10,其他粮食、豆类、发酵食品其他粮食、豆类、发酵食品 5,婴幼儿配方食品婴幼儿配方食品 5.药材药材 5黄曲霉毒素黄曲霉毒素AlfatoxinsB1,B2,G1,G2食用坚果、玉米、调味品食用坚果、玉米、调味品
8、 10,食用干制水果及其制品食用干制水果及其制品 4.药材药材 4药材药材 10药材药材 10黄曲霉毒素的检测意义黄曲霉毒素的检测意义n国际上对中药材中黄曲霉毒素的检测越来越多国际上对中药材中黄曲霉毒素的检测越来越多第11页/共58页黄曲霉毒素的种类及性质黄曲霉毒素的种类及性质 根据在紫外线照射下产生荧光颜色的不同,分为B族和G族两大类及其衍生物ACCD PPTB族:蓝色荧光1G族:黄绿色荧光212第12页/共58页黄曲霉毒素的种类及性质黄曲霉毒素的种类及性质n n生长温度生长温度最低最低6-86-8,最高达,最高达44-4644-46,3232时黄曲霉毒时黄曲霉毒素素B1B1的产量最高。的产
9、量最高。第13页/共58页黄曲霉毒素的种类及性质黄曲霉毒素的种类及性质n n化学结构化学结构结构类似结构类似结构类似结构类似,目前发现约,目前发现约2020余种,已分离鉴定出余种,已分离鉴定出1212种:种:B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2aB1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇和毒醇.基本结构基本结构基本结构基本结构:二呋喃环和香豆素二呋喃环和香豆素,B1,B1是二氢呋喃氧杂萘是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)酮(香豆素).前者为基本毒性结构,后者
10、与致癌有前者为基本毒性结构,后者与致癌有关关.第14页/共58页黄曲霉毒素的种类及性质黄曲霉毒素的种类及性质n化学结构化学结构B1,B2,G1,G2,M1,M2M1是B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2主要存在于牛奶中B1:最常见、毒性及致癌性最强第15页/共58页黄曲霉毒素化学结构式黄曲霉毒素化学结构式 第16页/共58页黄曲霉毒素化学结构式黄曲霉毒素化学结构式 第17页/共58页黄曲霉毒素化学结构式黄曲霉毒素化学结构式 第18页/共58页理化性质理化性质相对分子量为312-346难溶于水、易溶于油,甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂,但不溶于石油醚、己烷和乙醚中中性溶液及弱酸性溶液中较稳
11、定,强酸性溶液中稍有分解,强碱溶液中分解迅速纯品为无色结晶.在紫外光灯下,B1、B2发蓝色荧光,G1、G2发绿色荧光耐高温,一般烹调温度不能破坏,B1的分解温度为268紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性第19页/共58页黄曲霉毒素现有检测方法介绍黄曲霉毒素现有检测方法介绍n n薄层层析法薄层层析法:灵敏度低,定量困难n nHPLC-紫外检测法紫外检测法:不衍生,灵敏度低,采用UPLC可以增强灵敏度n nHPLC-荧光检测法荧光检测法:需衍生,灵敏度高(目前药典采用此法)第20页/共58页黄曲霉毒素现有检测方法介绍黄曲霉毒素现有检测方法介绍n n免疫化学分析方法免疫化学分析方法 酶联免疫吸附
12、法:快速、简便、单一毒素、假阳性多酶联免疫吸附法:快速、简便、单一毒素、假阳性多免疫亲和柱免疫亲和柱-荧光分光光度法:高效、无毒、假阳性多荧光分光光度法:高效、无毒、假阳性多微柱筛选法微柱筛选法 :半定量,测总量:半定量,测总量一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法 :快速、现场大批量:快速、现场大批量初筛初筛n nHPLC/MS/MS:不衍生,灵敏度高,假阳性少,成本高第21页/共58页LC-MS/MSLC-MS/MSHPLCHPLCTLCTLCGCGC色谱学方法色谱学方法黄曲霉毒素现有检测方法介绍黄曲霉毒素现有检测方法介绍第22页/共58页免疫学方法免疫学方法ELIS
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